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公开(公告)号:CN111206109A
公开(公告)日:2020-05-29
申请号:CN202010141729.6
申请日:2020-03-02
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明提供了用于牛种、羊种和猪种布鲁氏菌多重RPA检测引物组、试剂盒,属于布鲁氏菌检测技术领域;所述引物组包括包括B107F、B107R、B192F、B192R、B285F和B285R;所述B107F、B107R、B192F、B192R、B285F和B285R的核苷酸序列依次如SEQ ID No.1~SEQ ID No.6所示。本发明通过特定的引物组对样品进行多重RPA检测,对牛种布鲁氏菌检测灵敏度为10pg/μL、对羊种布鲁氏菌和猪种布鲁氏菌检测灵敏度均为1pg/μL;本发明提供的引物组和试剂盒分别对人工设置血清、牛肉、牛奶三种加标样品进行检测,并与国标《GB/T 18646-2018动物布鲁氏菌病诊断技术》布鲁氏菌Bruce-Ladder检测方法作对照,结果相符。
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公开(公告)号:CN109342711B
公开(公告)日:2019-08-09
申请号:CN201811336380.0
申请日:2018-11-09
Applicant: 吉林大学
IPC: G01N33/53 , G01N33/533
Abstract: 本发明涉及一种多物种IL‑1Ra与IL‑1β及其比值同步测定的ELISA试剂盒,属于生物技术检测领域。包括抗IL‑1β和IL‑1Ra兔源多克隆捕获用抗体预包被酶标板、IL‑1β和IL‑1Ra重组蛋白标准品、稀释液、20×PBS‑T浓缩洗涤液、蓝色荧光微球标记的豚鼠源抗IL‑1β多克隆检测用抗体、绿色荧光微球标记的豚鼠源抗IL‑1R多克隆检测用抗体。本发明具有灵敏度高、特异性强、检测物种范围广等优点,可用于绵羊、人、牛、马、猪、鼠、兔血清、血浆及其它组织样品中IL‑1β和IL‑1Ra含量测定,并可计算其比值,两种目标物同步检测减少比值计算的误差,灵敏度达到pg级,本试剂盒测定IL‑1Ra与IL‑1β比值可用于布鲁氏菌病自然感染与疫苗免疫区别诊断,以及其它与该比值变化相关的疾病诊断标示研究。
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公开(公告)号:CN109342711A
公开(公告)日:2019-02-15
申请号:CN201811336380.0
申请日:2018-11-09
Applicant: 吉林大学
IPC: G01N33/53 , G01N33/533
CPC classification number: G01N33/5304 , G01N33/533
Abstract: 本发明涉及一种多物种IL‐1β与IL‐1Ra及其比值同步测定的ELISA试剂盒,属于生物技术检测领域。包括抗IL‐1β和IL‐1Ra兔源多克隆捕获用抗体预包被酶标板、IL‐1β和IL‐1Ra重组蛋白标准品、稀释液、20×PBS‐T浓缩洗涤液、蓝色荧光微球标记的豚鼠源抗IL‐1β多克隆检测用抗体、绿色荧光微球标记的豚鼠源抗IL‐1R多克隆检测用抗体。本发明具有灵敏度高、特异性强、检测物种范围广等优点,可用于绵羊、人、牛、马、猪、鼠、兔血清、血浆及其它组织样品中IL-1β和IL-1Ra含量测定,并可计算其比值,两种目标物同步检测减少比值计算的误差,灵敏度达到pg级,本试剂盒测定IL-1Ra与IL-1β比值可用于布鲁氏菌病自然感染与疫苗免疫区别诊断,以及其它与该比值变化相关的疾病诊断标示研究。
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公开(公告)号:CN111206109B
公开(公告)日:2021-07-09
申请号:CN202010141729.6
申请日:2020-03-02
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明提供了用于牛种、羊种和猪种布鲁氏菌多重RPA检测引物组、试剂盒,属于布鲁氏菌检测技术领域;所述引物组包括包括B107F、B107R、B192F、B192R、B285F和B285R;所述B107F、B107R、B192F、B192R、B285F和B285R的核苷酸序列依次如SEQ ID No.1~SEQ ID No.6所示。本发明通过特定的引物组对样品进行多重RPA检测,对牛种布鲁氏菌检测灵敏度为10pg/μL、对羊种布鲁氏菌和猪种布鲁氏菌检测灵敏度均为1pg/μL;本发明提供的引物组和试剂盒分别对人工设置血清、牛肉、牛奶三种加标样品进行检测,并与国标《GB/T 18646‑2018动物布鲁氏菌病诊断技术》布鲁氏菌Bruce‑Ladder检测方法作对照,结果相符。
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公开(公告)号:CN111118188A
公开(公告)日:2020-05-08
申请号:CN202010136434.X
申请日:2020-03-02
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及一种可视化布鲁氏菌种间鉴定检测试剂盒。本发明所述试剂盒,包括含混合体系的八联管、ddH2O和阳性质控模板;所述混合体系包括PCR Mix、引物对和SYBR Green Ⅰ;所述八联管中每管各含一对不同的引物。本发明所述试剂盒能够应用于不同种布鲁氏菌的种间鉴定检测,实现对PCR产物进行快速、简便、可视化检测。
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公开(公告)号:CN110343744A
公开(公告)日:2019-10-18
申请号:CN201910801583.0
申请日:2019-08-28
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/06
Abstract: 本发明提供了一种基于PMA-qPCR技术的布鲁氏菌活菌计数方法,属于微生物计数技术领域。本发明优化PMA处理布鲁氏菌S2的处理浓度与曝光时间,再结合qPCR方法检测布鲁氏菌BCSP31基因,建立PMA-qPCR定量检测布鲁氏菌活菌的方法。采用PMA-qPCR检测布鲁氏菌的灵敏度是普通PCR的100倍,可对布鲁氏菌活菌数进行准确定量,且PMA处理不对qPCR反应造成干扰。用PMA-qPCR法计数布鲁氏菌活菌数具有快速、简便、特异性较好等特点。与平板技术方法相比,既可以快速完成布鲁氏菌活菌数测定,又可以同时完成布鲁氏菌的定量定性检测。
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公开(公告)号:CN110412266A
公开(公告)日:2019-11-05
申请号:CN201910710708.9
申请日:2019-08-02
Applicant: 吉林大学
IPC: G01N33/558 , G01N33/52
Abstract: 本发明提供了一种用于同时检测IL-1β、IL-1Ra含量和IL-1Ra/IL-1β比值的胶体金试纸条及其应用,涉及免疫检测技术领域;所述胶体金试纸条,包括玻璃纤维垫、硝酸纤维素膜和吸水纸;所述玻璃纤维素垫上包被有胶体金标记的同时结合IL-1β和IL-1Ra的抗IL-1β-1Ra-2兔源多克隆抗体;所述硝酸纤维素膜依次包括检测线T1、检测线T2和质控线;所述检测线T1上包被有结合IL-1β的抗IL-1β-1的豚鼠源多克隆抗体;所述检测线T2上包被有结合IL-1Ra的抗IL-1Ra-1的豚鼠源多克隆抗体;所述质控线上包被有羊抗兔抗体。本发明提供的胶体金试纸条具有特异、便捷、成本低、重复性好等优点。
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公开(公告)号:CN111154903A
公开(公告)日:2020-05-15
申请号:CN202010136433.5
申请日:2020-03-02
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种用于布鲁氏菌RPA扩增的引物组、可视化检测试剂盒及应用,属于分子生物学检测技术领域;所述引物组包括上游引物和下游引物。利用本发明的引物组对布鲁氏菌进行RPA扩增,结合SYBR Green I可对布鲁氏菌进行现场可视化检测,本发明不依赖PCR仪等热循环仪器,利用RPA技术对布鲁氏菌核酸进行扩增,扩增结束后使用395nm波长的紫外灯进行照射,观察反应体系是否呈现荧光判定检测结果,本发明的引物组具有特异性强、敏感性好,所发明的试剂盒操作简单、检测快速、结果可视化等优点,为布鲁氏菌的现场可视化检测提供新的方法。
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