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公开(公告)号:CN117720593A
公开(公告)日:2024-03-19
申请号:CN202311688205.9
申请日:2023-12-11
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种鞘氨醇胶寡糖及其制备方法与应用。本发明提供了一种鞘氨醇胶寡糖,其主链结构均为β‑L‑Rhap‑(1→3)‑β‑D‑Glcp‑(1→4)‑β‑D‑GlcpA,由鞘氨醇降解酶SpnR降解鞘氨醇胶(威兰胶、结冷胶和迪特胶),再通过液相色谱法纯化获得的。采用本发明制备方法制备鞘氨醇胶寡糖反应条件温和,分离简便。本发明制备得到的鞘氨醇胶寡糖具有较好的植物促生能力和肠道益生作用,可用于农业、食品、保健品等领域,拓展了鞘氨醇胶与鞘氨醇胶寡糖的应用。
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公开(公告)号:CN117187080A
公开(公告)日:2023-12-08
申请号:CN202311193991.5
申请日:2023-09-15
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种高效获得银耳孢子原生质体制备和再生的方法,该方法包括银耳孢子活化培养、种子液培养、原生质体的制备和原生质体的再生等步骤。本发明利用30mg/mL复合酶解液(溶壁酶与崩溃酶的质量比为4:1,稳渗剂为0.6mol/L氯化钾,pH为5)将菌体浓度为3.6×108个/mL的银耳孢子的细胞壁于26℃酶解后,在含0.8mol/L蔗糖和促生剂生。运用本发明方法制备的原生质体数量可达(20mg/LVB1+500mg/L牛血清蛋白)的再生培养基上复1.14×108个/mL,再生率达到43.52%。本发明提供了一种高效稳定的银耳孢子原生质体制备和再生方法,操作简单,重复性高,可为后续银耳孢子的遗传转化操作提供高质量的原生质体。
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公开(公告)号:CN117180520A
公开(公告)日:2023-12-08
申请号:CN202311158184.X
申请日:2023-09-08
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种γ‑聚谷氨酸‑季铵盐‑贻贝蛋白涂层的制备方法与应用,它是由带负电荷的γ‑聚谷氨酸和带正电的阳离子季铵盐、贻贝蛋白通过静电自组装相互作用所形成的聚氨基酸复合物;所述γ‑聚谷氨酸是通过微生物发酵法直接分离纯化得到;所述阳离子季铵盐为苯扎氯氨、十二烷基三甲基溴化铵、十二烷基三甲基氯化铵十六烷基三甲基溴化铵中的任意一种。将涂层作为医疗器械表面抗菌涂层,可有效降低各种医疗器械引起的获得性感染的风险,此修饰方法适用于预防各种医疗器械引起的细菌感染。
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公开(公告)号:CN116987653A
公开(公告)日:2023-11-03
申请号:CN202310968782.7
申请日:2023-08-03
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种表达牛乳铁蛋白的解淀粉芽孢杆菌及其构建方法与应用,属于生物工程技术领域。本发明采用具有高效蛋白分泌能力的解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)NFΔSE和组成型表达载体pMA5进行牛乳铁蛋白的重组表达。进一步通过信号肽筛选实现乳铁蛋白的胞外分泌表达,并通过组合营养条件优化及强化铁供应等策略,在发酵罐上实现了乳铁蛋白的高效发酵合成。相比于传统提取工艺,本工艺可通过该重组菌株发酵生产乳铁蛋白,能够有效提高乳铁蛋白的生产能力,具有较好的工业化潜力。
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公开(公告)号:CN112048090B
公开(公告)日:2023-10-03
申请号:CN202010971833.8
申请日:2020-09-16
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种吸水抑菌可降解的淡水鱼保鲜膜及其制备方法,包括微晶纤维素水悬浮液,γ‑聚谷氨酸水悬浮液,ε‑聚赖氨酸,以及增塑剂;所述微晶纤维素水悬浮液和γ‑聚谷氨酸水悬浮液的质量比为2:1;ε‑聚赖氨酸添加量为微晶纤维素水悬浮液和γ‑聚谷氨酸水悬浮液总质量的1~5wt%;增塑剂添加量为微晶纤维素水悬浮液和γ‑聚谷氨酸水悬浮液总质量的1~2wt%。本发明以ε‑聚赖氨酸、聚谷氨酸、微晶纤维素三个可食用基材,使用微晶纤维素作为成膜基质,聚谷氨酸作为吸水剂,ε‑聚赖氨酸作为抗菌剂,开发出集抑菌、水分调控、可降解三位一体功能化保鲜膜材料,其结构为水凝胶三维网状,实现肉品血水的有效吸附,避免染菌;同时水凝胶保湿锁水功效可防止产品过度失水变质。
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公开(公告)号:CN116396855A
公开(公告)日:2023-07-07
申请号:CN202310546049.6
申请日:2023-05-15
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于射流旋转搅拌的生物发酵反应器及方法,包括发酵罐、补料曝气循环系统和高温蒸汽灭菌装置;发酵罐与补料曝气循环系统之间通过一内循环管道连接,内循环管道的一端连接在发酵罐的底部,另一端与位于发酵罐内的旋转射流搅拌装置连接,且内循环管道上设有真空水泵;补料曝气循环系统连接在该内循环管道上,用于向管道内提供发酵所需的物料与气源;高温蒸汽灭菌装置与补料曝气循环系统连接,用于向整个系统以及发酵罐提供高温蒸汽进行灭菌。通过曝气与射流连用的方式取代普通内置供气操作,使得气体以更小尺寸进入反应体系,并且在循环发酵液的过程中将微米级尺寸的气源混合,可以有效提高气体的溶解效率,促进菌体代谢。
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公开(公告)号:CN113862171B
公开(公告)日:2023-05-23
申请号:CN202110429416.5
申请日:2021-04-21
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开一株对甲醇具有较高耐受性的芽孢杆菌,属于微生物培养、分子生物学以及应用技术领域。本发明的菌株已于2021年4月6日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2021326。该菌株可耐受20%甚至更高的甲醇,且菌株的传代稳定性好,传代50代后仍然保持着甲醇耐受特性,可用于甲基营养化菌株构建及以甲醇为底物合成高附加值产物等方面,具有广阔的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN116042502A
公开(公告)日:2023-05-02
申请号:CN202310168298.6
申请日:2023-02-27
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种胞外分泌贻贝蛋白的基因工程菌及其构建方法与应用,属于基因工程技术领域。本发明通过信号肽筛选,将信号肽与贻贝蛋白的基因进行连接并转入质粒pET‑Duet进行融合表达。进一步的,本发明将角质酶Tfu‑0883基因转入质粒pET‑Duet,与信号肽‑贻贝蛋白融合蛋白进行共表达,最终实现贻贝蛋白的胞外分泌。此外本发明通过添加表面活性剂的方式优化了发酵培养基,从而提高胞外分泌水平。纯化后的发酵液中的贻贝蛋白产量可达20‑40mg/L。本发明实现了在大肠杆菌中胞外分泌具有生物活性的可溶性贻贝蛋白,减弱了产物积累造成的细胞毒性作用,促进了贻贝蛋白的持续合成,并且避免了后续破碎细胞操作,优化了工艺。
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公开(公告)号:CN115873885A
公开(公告)日:2023-03-31
申请号:CN202211417026.7
申请日:2022-11-14
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种响应蓝光调控的基因表达系统构建及应用,属于合成生物学领域。本发明通过在解淀粉芽孢杆菌中使用蓝光激活启动子和蓝光抑制启动子对基因的表达进行调控;启动子pBLind在蓝光照射环境下,表达eGFP的水平相较于黑暗环境下提高了1.4倍。启动子pBLrep在蓝光照射环境下,其eGFP表达的水平相较于黑暗环境下降低了10倍,实现了在解淀粉芽孢杆菌中对基因表达的快速、定向、精确调控。
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公开(公告)号:CN115786377A
公开(公告)日:2023-03-14
申请号:CN202210876273.7
申请日:2022-07-25
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/12 , C12N15/62 , C12P21/02 , C07K14/435
Abstract: 本发明公开了一种双顺反子翻译偶联表达载体,所述表达载体在pET‑28a(+)质粒上插入分子伴侣、新的核糖体结合位点和目的蛋白基因,构建成双顺反子翻译偶联表达载体。进一步地,本发明构建了基因工程菌,其为以E.coli BL21(DE3)为表达宿主,利用双顺反子翻译偶联表达载体,实现贻贝蛋白Mgfp‑3B与分子伴侣SUMO和/或TrxA的共表达,促进Mgfp‑3B正确折叠翻译从而以可溶性形式表达。本发明实现了在大肠杆菌中简便快捷地生产具有生物活性的可溶性贻贝蛋白,并且双顺反子表达载体避免了融合表达造成的酶切分子伴侣操作。此外本发明通过优化的发酵培养基与发酵工艺,使可溶性贻贝蛋白产量达到200‑300 mg/L,简化了下游纯化工艺。
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