副鸡禽杆菌基因缺失与筛选系统的构建及其应用

    公开(公告)号:CN117660510A

    公开(公告)日:2024-03-08

    申请号:CN202311519617.X

    申请日:2023-11-15

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种副鸡禽杆菌基因缺失与筛选系统的构建方法,具体包括如下步骤:步骤10:将质粒pSJ001导入副鸡禽杆菌,经与抗性基因相对应的抗生素筛选,得到第一次同源重组的菌株;步骤20:将质粒pSJ002导入第一次重组菌株,经蓝白斑筛选系统筛选得到第二次同源重组的菌株;该方法应用到菌株筛选后,通过正向筛选使用所对应的抗生素筛选出含有lacZ基因和抗性基因的目标菌株,反向筛选使用X‑Gal蓝白系统进行筛选。两种方法的结合后,可以直观、简便且高效地筛选出副鸡禽杆菌基因缺失突变株。同时本发明还公开了该采用重组表达载体系统敲除副鸡禽杆菌的基因的应用。

    一种犬α干扰素生物学活性检测方法

    公开(公告)号:CN117286146A

    公开(公告)日:2023-12-26

    申请号:CN202311216897.7

    申请日:2023-09-19

    Abstract: 本发明公开了一种犬α干扰素生物学活性检测方法。包括以下步骤:(1)将犬ISRE基因片段插入含有荧光素酶的质粒中,构建重组质粒pGL3‑ISRE;(2)将步骤(1)所述重组质粒线性化,连接EGFP片段,构建重组表达质粒pGL3‑ISRE‑EGFP;(3)将步骤(2)所述重组表达质粒转染细胞,将待检测犬α干扰素样品加入转染后的细胞,孵育,观察荧光蛋白的表达,判断待检测犬α干扰素样品的生物学活性。本发明的检测方法通过绿色荧光蛋白表达反映犬α干扰素抗病毒活性,提高了检测准确性和重复性。

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