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公开(公告)号:CN119955699A
公开(公告)日:2025-05-09
申请号:CN202411970967.2
申请日:2024-12-30
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/90 , C12N15/31 , C12N15/55 , C12N15/113 , A61K35/741 , A61K38/16 , A61K48/00 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了三种微菌素重组整合的工程益生菌,这三种重组整合的工程益生菌分别为微菌素MccJ25重组整合的工程益生菌、微菌素MccY重组整合的工程益生菌以及微菌素MccJ25、MccY重组整合的工程益生菌,本发明的三种工程益生菌共同具有无抗性标记基因、具有良好生长活性、遗传稳定性、抗菌活性的特点。同时,本发明还提供了该工程益生菌的制备方法以及用途。
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公开(公告)号:CN119185524A
公开(公告)日:2024-12-27
申请号:CN202411150185.4
申请日:2024-08-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/145 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/81 , C12N1/19 , A61K39/385 , A61P31/16 , A61K39/39 , A61P37/04 , C12R1/84
Abstract: 本发明属于疫苗制备技术领域,具体公开了一种免疫原性复合物,包含:含有H7N9禽流感病毒的HA蛋白的抗原和含有载体蛋白的纳米颗粒载体;所述载体蛋白为Ferritin蛋白;所述纳米颗粒载体与所述抗原之间通过SpyCatcher‑SpyTag共价连接。本发明提供的含有H7N9禽流感病毒的HA蛋白和Ferritin蛋白的免疫原性复合物,该免疫原性复合物的抗原特性显著增强,可以诱导更高滴度的中和抗体。将其制备成疫苗,通过免疫验证实验,证明由免疫原性复合物制备得到的疫苗能有效提高抗原蛋白对机体的体液免疫和细胞免疫效果,为防控H7N9亚型高致病性禽流感的流行提供了新的方案。
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公开(公告)号:CN115747126B
公开(公告)日:2024-09-17
申请号:CN202211015993.0
申请日:2022-08-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生产微菌素J25的枯草芽孢杆菌重组整合工程菌株、构建方法及应用,属于微生物技术、药物和基因工程领域,本发明通过对mcjABCD基因序列和表达原件的优化,使得MccJ25可以在枯草芽孢杆菌中成功表达,并将mcjABCD基因同时整合至枯草芽孢杆菌基因组两个位点中,得到一株可以高效生产MccJ25的枯草芽孢杆菌W25AS2工程菌株,该菌可以在无抗性、无诱导、双位点共表达且无芽孢生成的条件下,对MccJ25具有较高的表达水平,并且表达产物对于肠炎沙门氏菌具有良好的杀菌活性,为MccJ25的生产应用开发了新的应用模式。
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公开(公告)号:CN117683126A
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202311480016.2
申请日:2023-11-08
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种抗H5亚型禽流感病毒纳米抗体蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该纳米抗体蛋白的活性、亲和性、特异性均优异,该纳米抗体蛋白具有较好的可溶性,利于表达和纯化,本发明还公开了该抗H5亚型禽流感病毒纳米抗体蛋白、用途、表达载体、菌株和药物以及试剂盒。
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公开(公告)号:CN117660510A
公开(公告)日:2024-03-08
申请号:CN202311519617.X
申请日:2023-11-15
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种副鸡禽杆菌基因缺失与筛选系统的构建方法,具体包括如下步骤:步骤10:将质粒pSJ001导入副鸡禽杆菌,经与抗性基因相对应的抗生素筛选,得到第一次同源重组的菌株;步骤20:将质粒pSJ002导入第一次重组菌株,经蓝白斑筛选系统筛选得到第二次同源重组的菌株;该方法应用到菌株筛选后,通过正向筛选使用所对应的抗生素筛选出含有lacZ基因和抗性基因的目标菌株,反向筛选使用X‑Gal蓝白系统进行筛选。两种方法的结合后,可以直观、简便且高效地筛选出副鸡禽杆菌基因缺失突变株。同时本发明还公开了该采用重组表达载体系统敲除副鸡禽杆菌的基因的应用。
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公开(公告)号:CN117625666A
公开(公告)日:2024-03-01
申请号:CN202211020042.2
申请日:2022-08-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种多杀性巴氏杆菌无抗性标记基因整合菌株的构建方法及其应用。本发明将点突变基因pheSm与温度敏感复制子Ts‑ori、卡那霉素抗性基因kan及大肠杆菌ColE1复制子构建得到温度敏感质粒pHYF01;接着通过无痕重组将质粒pHYF01与靶基因hptC的上、下同源臂片段连接构建得到重组质粒pHYF02;然后将重组质粒pHYF02电击转化禽多杀性巴氏杆菌,经卡那霉素筛选获得hptC重组菌株;再利用卡那霉素抗性筛选获得单交换菌株,利用四氯苯丙氨酸抗性筛选得到双交换菌株,即所述多杀性巴氏杆菌无抗性标记基因整合菌株。该整合菌株毒力显著降低,可用于开发禽多杀性巴氏杆菌疫苗。
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公开(公告)号:CN117286146A
公开(公告)日:2023-12-26
申请号:CN202311216897.7
申请日:2023-09-19
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种犬α干扰素生物学活性检测方法。包括以下步骤:(1)将犬ISRE基因片段插入含有荧光素酶的质粒中,构建重组质粒pGL3‑ISRE;(2)将步骤(1)所述重组质粒线性化,连接EGFP片段,构建重组表达质粒pGL3‑ISRE‑EGFP;(3)将步骤(2)所述重组表达质粒转染细胞,将待检测犬α干扰素样品加入转染后的细胞,孵育,观察荧光蛋白的表达,判断待检测犬α干扰素样品的生物学活性。本发明的检测方法通过绿色荧光蛋白表达反映犬α干扰素抗病毒活性,提高了检测准确性和重复性。
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公开(公告)号:CN117164705A
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN202311121402.2
申请日:2023-08-31
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种靶向H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的纳米抗体;所述纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示;该纳米抗体具有良好的生物活性且具有良好的特异性;为建立H5亚型禽流感快速诊断方法奠定基础,解决了以往检测过程中灵敏度低,效率低的问题;而且将抗体基因通过连接肽与麦芽糖结合蛋白基因连接构建表达载体,诱导融合蛋白表达,抗H5禽流感病毒纳米抗体融合蛋白为可溶性蛋白,该融合蛋白可实现规模化生产,对H5禽流感的监测具有重大的意义。
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公开(公告)号:CN114634945B
公开(公告)日:2023-08-04
申请号:CN202210452692.8
申请日:2022-04-27
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/70 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N1/21 , C07K14/255 , C12N15/31 , A61K38/16 , A61K35/74 , A61P31/04 , A23K20/147 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种MccY重组整合工程菌及其构建方法与应用。该MccY重组整合工程菌的构建方法包括如下步骤:(1)将sgRNA片段(SEQ ID NO.2)与T载体连接,得到pHsgRNA质粒;(2)将pCas9质粒转化大肠杆菌,并制成感受态细胞;然后将优化后的MccY的修复片段(SEQ ID NO.1)和pHsgRNA质粒转入感受态细胞中,经鉴定、培养、连续传代筛选消除双质粒的菌株,得到所述的MccY重组整合工程菌。本发明中构建得到的MccY重组整合工程菌无质粒无抗性基因,无需诱导剂,能够持续高效地分泌表达MccY,对鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌、宋内志贺氏菌、痢疾志贺氏菌等有明显的抑制效果。
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公开(公告)号:CN115873104B
公开(公告)日:2023-07-14
申请号:CN202210952258.6
申请日:2022-08-09
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N15/81 , C12N1/19 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/68 , C12R1/84
Abstract: 本发明涉及针对H7亚型禽流感病毒的纳米抗体M124及其应用,属于分子生物学领域,本发明利用酵母双杂交技术成功筛选出针对H7亚型禽流感病毒的纳米抗体,构建真核表达系统,并验证所筛选出的纳米抗体对H7亚型禽流感病毒的结合能力,为该病毒的中和抗体的研究及快速诊断方法的开发提供技术支持和抗体材料。
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