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公开(公告)号:CN110408727B
公开(公告)日:2023-06-20
申请号:CN201910758890.5
申请日:2019-08-16
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开一种用于检测J亚群禽白血病病毒的CPA引物组、CPA核酸试纸条试剂盒及其应用,属于生物技术领域。本发明的CPA引物组不需要通过温度循环变化来扩增,在60℃的单一温度扩增30~60min就能将靶基因大量扩增,操作简单,反应时间短。本发明还提供包括上述CPA引物组和核酸检测试纸条的试剂盒。本发明的恒温反应所得产物用一次性核酸检测试纸条检测后直接判读结果;出现检测线和质控线两条红色条带判读为阳性结果;试剂盒操作简单、成本低廉、反应结果易于观察、特异性好、灵敏度高,尤其适用于户外以及基层医疗单位的检验分析,易于推广应用。
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公开(公告)号:CN110438261B
公开(公告)日:2022-08-12
申请号:CN201910690093.8
申请日:2019-07-29
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于检测F亚群禽白血病病毒的分子标记、引物、试剂盒及应用,属于分子生物学技术领域。该分子标记的序列如如SEQ ID NO.1所示。采用本申请所述荧光定量PCR方法进行灵敏性检测时,其灵敏度可达1.16×102拷贝/uL;同时,经荧光定量PCR稳定性实验发现,组内和组间实验变异系数均小于4.9%,具有较好的重复性;而且通过本申请所述荧光定量PCR方法仅对ALV‑F有良好的扩增作用,具有较好的特异性。利用本申请提供的特异性引物进行ALV‑F荧光定量PCR检测,特异性好、准确性高、重复性好,可快速、简便、高效地鉴定ALV‑F,能够应用于临床标本的检测,适合大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN105861445B
公开(公告)日:2019-08-06
申请号:CN201610219276.8
申请日:2016-04-08
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一株抗K亚群禽白血病病毒(ALV‑K)的细胞系及其应用。将ALV‑K env基因插入表达载体,将构建的转移载体在鸡胚成纤维细胞系DF‑1中表达,通过Zeocin药物筛选获得有Zeocin抗性、稳定表达ALV‑K env基因的鸡胚成纤维细胞系DF‑1/K,该细胞系保藏编号为CCTCC No.C201610。对DF‑1/K细胞系进行检测和抗病毒感染分析,发现DF‑1细胞系中表达的ALV‑K env蛋白对ALV‑K病毒具有超感染抗性,能抵抗滴度为104TCID50的病毒感染复制量,本发明的DF‑1/K细胞系可用于不同亚群禽白血病病毒感染的鉴别诊断,临床诊断价值显著,应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN105861444A
公开(公告)日:2016-08-17
申请号:CN201610219254.1
申请日:2016-04-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N5/10 , G01N33/569 , C07K16/10 , A61K39/21 , A61P31/14 , C12Q1/70 , C12Q1/68 , C12N15/11 , C12R1/93
CPC classification number: C12N5/0603 , A61K39/00 , C07K16/1036 , C12N2510/00 , C12Q1/702 , G01N33/56983 , G01N2469/20
Abstract: 本发明提供一株抗B亚群禽白血病病毒(ALV?B)的细胞系及其应用。将ALV?B env基因插入表达载体,将构建的转移载体在鸡胚成纤维细胞系DF?1中表达,通过Zeocin药物筛选获得有Zeocin抗性、稳定表达ALV?B env基因的鸡胚成纤维细胞系DF?1/B,该细胞系保藏编号为CCTCC No.C201609。对DF?1/B细胞系进行检测和抗病毒感染分析,发现DF?1细胞系中表达的ALV?B env蛋白对ALV?B病毒具有超感染抗性,能抵抗滴度为104TCID50的病毒感染复制量,本发明的DF?1/B细胞系可用于不同亚群禽白血病病毒感染的鉴别诊断,临床诊断价值显著,应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN103243173A
公开(公告)日:2013-08-14
申请号:CN201310079067.4
申请日:2013-03-12
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于检测火鸡出血性肠炎病毒的LAMP引物。该LAMP引物由一对外围引物和一对内引物组成,其核苷酸序列如SEQ NO.1~4所示。该引物特异性强,能严格识别靶核苷酸序列上的6个独立区域,从而避免反应混合物中存在的非靶序列的影响;扩增模板量低至10拷贝,灵敏性高。本发明的LAMP不需通过温度循环变化来扩增,反应在30~60min就能将几个拷贝的靶基因高效扩增,反应时间短;而且设备简单,检测结果可肉眼直接观察,易于判定。
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公开(公告)号:CN101899465A
公开(公告)日:2010-12-01
申请号:CN200910213800.0
申请日:2009-12-15
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组J亚群禽白血病病毒感染性克隆质粒及其制备方法和应用。本发明是将J亚群禽白血病病毒前病毒基因两端的长末端重复序列替换为E亚群禽白血病病毒前病毒基因两端的长末端重复序列,将其插入载体中,以此构建了重组J亚群禽白血病病毒感染性克隆质粒,得到序列如SEQ ID NO:1所示。本发明重组J亚群禽白血病病毒克隆质粒经转染得到的重组病毒株的复制能力和致病性明显弱于自然的J亚群禽白血病病毒,但可表达J亚群禽白血病病毒的结构蛋白,具备J亚群禽白血病病毒的抗原性,可被J亚群禽白血病病毒特异性单克隆抗体JE9所识别。本发明病毒克隆质粒为制备J亚群禽白血病病毒弱毒性活疫苗提供了材料和方法借鉴。
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公开(公告)号:CN119955699A
公开(公告)日:2025-05-09
申请号:CN202411970967.2
申请日:2024-12-30
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/90 , C12N15/31 , C12N15/55 , C12N15/113 , A61K35/741 , A61K38/16 , A61K48/00 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了三种微菌素重组整合的工程益生菌,这三种重组整合的工程益生菌分别为微菌素MccJ25重组整合的工程益生菌、微菌素MccY重组整合的工程益生菌以及微菌素MccJ25、MccY重组整合的工程益生菌,本发明的三种工程益生菌共同具有无抗性标记基因、具有良好生长活性、遗传稳定性、抗菌活性的特点。同时,本发明还提供了该工程益生菌的制备方法以及用途。
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公开(公告)号:CN118006807A
公开(公告)日:2024-05-10
申请号:CN202410030045.7
申请日:2024-01-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/35
Abstract: 本发明属于生物检测领域,具体涉及一种用于同时检测鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的试剂盒。本发明公开了一种同时检测鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的引物组和应用,将该序列应用于以上两种病原的检测,具有操作简便、检测效率高、灵敏度高和准确率高等特点,可广泛应用于相关疾病流行病学调查、相关药物和疫苗实验动物和动物模型临床应用效果评价等研究中鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的检测和鉴别,检测结果可靠。
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公开(公告)号:CN112876543A
公开(公告)日:2021-06-01
申请号:CN202110087972.9
申请日:2021-01-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/195 , C12N15/31 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K38/16 , A61P31/04 , A23K20/147 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种小菌素MccY及其制备方法与应用,该小菌素MccY的氨基酸序列为GGRGHIAEYFSGPITQVSFYG。相较于MccJ25仅对肠炎等小部分血清型沙门菌有杀菌活性,该小菌素MccY对鸡白痢沙门菌、鼠伤寒沙门菌、肯塔基沙门菌、婴儿沙门菌、伦敦沙门菌、宋内志贺氏菌具有抑菌/杀菌作用,可杀灭MccJ25不能杀灭的其他沙门菌血清型,尤其是对畜禽生产中常见的鼠伤寒沙门菌、鸡白痢沙门菌具有显著杀菌效果,同时,对宋内志贺氏菌也有抑菌/杀菌作用,克服了小菌素窄谱性的短板,具有突破性的意义,具有作为抗生素替代物的潜力。
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公开(公告)号:CN101586168B
公开(公告)日:2012-02-22
申请号:CN200910040395.7
申请日:2009-06-19
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种J亚群禽白血病病毒基因检测用引物组、检测方法和快速检测试剂盒,该引物组由外引物F3、外引物B3、内引物FIP和内引物BIP这四条引物组成,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1~4所示,其中,R为G或A,Y为T、U或C。本发明采用上述引物组,在优化的最佳体系下对待测样品DNA进行环介导等温扩增反应,阳性反应在琼脂糖凝胶电泳中显示梯状带,同时在反应产物中加入显色剂,阳性反应会发生明显的颜色变化。本发明的引物组和试剂盒均可高效高特异性地检测J亚群禽白血病病毒基因,在不足1h即可完成扩增反应,检测成本低、耗时短、产率高,特异性高,且阴阳性结果显色差异显著,验证率高,更加明显可靠。
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