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公开(公告)号:CN117286146A
公开(公告)日:2023-12-26
申请号:CN202311216897.7
申请日:2023-09-19
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种犬α干扰素生物学活性检测方法。包括以下步骤:(1)将犬ISRE基因片段插入含有荧光素酶的质粒中,构建重组质粒pGL3‑ISRE;(2)将步骤(1)所述重组质粒线性化,连接EGFP片段,构建重组表达质粒pGL3‑ISRE‑EGFP;(3)将步骤(2)所述重组表达质粒转染细胞,将待检测犬α干扰素样品加入转染后的细胞,孵育,观察荧光蛋白的表达,判断待检测犬α干扰素样品的生物学活性。本发明的检测方法通过绿色荧光蛋白表达反映犬α干扰素抗病毒活性,提高了检测准确性和重复性。
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公开(公告)号:CN113121680B
公开(公告)日:2022-03-29
申请号:CN202110390340.X
申请日:2021-04-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/569 , G01N33/68 , A61K39/42 , A61K39/44 , A61P31/16 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物药物技术领域,具体涉及一种抗H5亚型禽流感纳米抗体蛋白及其编码基因与应用。所述的抗H5亚型禽流感病毒纳米抗体蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该纳米抗体蛋白特异性针对甲型H5亚型禽流感病毒可以解决现有H5亚型禽流感诊断试剂研发过程中抗体亲和力低、生产过程中纯度低、检测过程中灵敏度低的问题。本发明进一步将抗H5亚型禽流感病毒纳米抗体蛋白在大肠杆菌体内和麦芽糖结合蛋白标签融合表达,可实现快速检测抗原,并应用于甲型H5亚型禽流感快速检测试剂盒的开发,且该融合蛋白可用于防治甲型H5亚型禽流感产品的开发。
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公开(公告)号:CN113527476B
公开(公告)日:2023-01-17
申请号:CN202110714355.7
申请日:2021-06-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种抗H5亚型禽流感病毒新纳米抗体及其应用,所述抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。并将抗体基因通过连接肽与麦芽糖结合蛋白(MBP)基因连接,构建表达载体,诱导融合蛋白表达,来促进抗H5禽流感病毒纳米抗体融合蛋白在表达系统中的可溶表达,从而解决了抗H5禽流感纳米抗体蛋白在原核系统呈不可溶的难题,提高了准确性和重复性。可用于探测、诊断、预防或治疗禽流感病毒,特别是H5亚型禽流感病毒。对鸡H5禽流感的监测具有重大的意义。
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公开(公告)号:CN113009156B
公开(公告)日:2022-08-12
申请号:CN202110300708.9
申请日:2021-03-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用绿色荧光蛋白报告基因检测犬IFN‑α生物学活性的方法,属于蛋白活性检测技术领域。本发明将犬ISRE启动子片段插入带有绿色荧光蛋白的质粒中,构建表达绿色荧光蛋白的重组质粒,通过检测绿色荧光蛋白的表达情况来判断ISRE启动子的激活情况,从而检测犬α‑IFN生物学活性。本发明利用绿色荧光蛋白报告基因检测犬α‑IFN生物学活性的方法与传统检测方法MDCK‑VSV相比,避免了VSV病毒感染人的风险,提高了生物安全性。本发明操作简单,可重复性高,成本低,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN113121680A
公开(公告)日:2021-07-16
申请号:CN202110390340.X
申请日:2021-04-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/569 , G01N33/68 , A61K39/42 , A61K39/44 , A61P31/16 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物药物技术领域,具体涉及一种抗H5亚型禽流感纳米抗体蛋白及其编码基因与应用。所述的抗H5亚型禽流感病毒纳米抗体蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该纳米抗体蛋白特异性针对甲型H5亚型禽流感病毒可以解决现有H5亚型禽流感诊断试剂研发过程中抗体亲和力低、生产过程中纯度低、检测过程中灵敏度低的问题。本发明进一步将抗H5亚型禽流感病毒纳米抗体蛋白在大肠杆菌体内和麦芽糖结合蛋白标签融合表达,可实现快速检测抗原,并应用于甲型H5亚型禽流感快速检测试剂盒的开发,且该融合蛋白可用于防治甲型H5亚型禽流感产品的开发。
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公开(公告)号:CN113527476A
公开(公告)日:2021-10-22
申请号:CN202110714355.7
申请日:2021-06-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种抗H5亚型禽流感病毒新纳米抗体及其应用,所述抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。并将抗体基因通过连接肽与麦芽糖结合蛋白(MBP)基因连接,构建表达载体,诱导融合蛋白表达,来促进抗H5禽流感病毒纳米抗体融合蛋白在表达系统中的可溶表达,从而解决了抗H5禽流感纳米抗体蛋白在原核系统呈不可溶的难题,提高了准确性和重复性。可用于探测、诊断、预防或治疗禽流感病毒,特别是H5亚型禽流感病毒。对鸡H5禽流感的监测具有重大的意义。
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公开(公告)号:CN113009156A
公开(公告)日:2021-06-22
申请号:CN202110300708.9
申请日:2021-03-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用绿色荧光蛋白报告基因检测犬IFN‑α生物学活性的方法,属于蛋白活性检测技术领域。本发明将犬ISRE启动子片段插入带有绿色荧光蛋白的质粒中,构建表达绿色荧光蛋白的重组质粒,通过检测绿色荧光蛋白的表达情况来判断ISRE启动子的激活情况,从而检测犬α‑IFN生物学活性。本发明利用绿色荧光蛋白报告基因检测犬α‑IFN生物学活性的方法与传统检测方法MDCK‑VSV相比,避免了VSV病毒感染人的风险,提高了生物安全性。本发明操作简单,可重复性高,成本低,具有良好的应用前景。
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