重组柯萨奇病毒A16型病毒样颗粒的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN102533797B

    公开(公告)日:2013-06-19

    申请号:CN201210008528.4

    申请日:2012-01-12

    Abstract: 本发明公开了重组柯萨奇病毒A16型病毒样颗粒的制备方法。本发明所提供的方法包括如下步骤:1)将柯萨奇病毒A16型的P1基因和3CD基因克隆到目的质粒中,得到重组表达载体;2)用步骤1)得到的重组表达载体转化目的酵母细胞,得到表达所述P1基因和所述3CD基因的重组酵母细胞;3)裂解步骤2)得到的重组酵母细胞,分离得到重组的柯萨奇病毒A16型病毒样颗粒。利用本发明所提供的方法能在酵母表达系统中制备得到柯萨奇病毒A16型的病毒样颗粒,同时较野生型P1基因和3CD基因相比,本发明对P1基因和3CD基因的密码子优化大大提高了柯萨奇病毒A16型的病毒样颗粒在酵母表达系统中的产量,可将其进一步用于生产婴幼儿手足口病候选预防性疫苗和药物组合物。

    一种1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖对照品的制备方法

    公开(公告)号:CN103012510A

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN201210511181.5

    申请日:2012-12-03

    Abstract: 一种1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖对照品的制备方法,属于中药及天然产物对照品提取和纯化技术领域。将白芍药材粉碎,回流提取,浓缩,加水稀释,并经两次大孔吸附树脂富集、解吸附,再通过两次凝胶柱层析分离,得到1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖对照品,经高效液相色谱法检测,其含量可达到98%以上,该方法成本较低,步骤简单,专属性强。

    柯萨奇病毒B3型病毒样颗粒的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN102899336A

    公开(公告)日:2013-01-30

    申请号:CN201210349983.0

    申请日:2012-09-19

    Abstract: 本发明公开了柯萨奇病毒B3型病毒样颗粒的制备方法。本发明所提供的方法包括如下步骤:1)将柯萨奇病毒B3型的VP1基因和VP4基因克隆到目的质粒1中,得到重组表达载体1,将VP2基因和VP3基因克隆到目的质粒2中,得到重组表达载体2;2)用步骤1)得到的重组表达载体1和重组表达载体2共转化目的酵母细胞,得到表达所述VP1基因、所述VP2基因、所述VP3基因和所述VP4基因的重组酵母细胞;3)裂解步骤2)得到的重组酵母细胞,分离得到柯萨奇病毒B3型病毒样颗粒。实验证明,利用本发明所提供的方法,在酵母表达系统中成功的制备了柯萨奇病毒B3型的病毒样颗粒,可将其进一步用于病毒性心肌炎与I型糖尿病候选预防性疫苗和药物组合物。

    一种重组脊髓灰质炎病毒Ⅰ型病毒样颗粒的制备方法

    公开(公告)号:CN102876707A

    公开(公告)日:2013-01-16

    申请号:CN201210390829.8

    申请日:2012-10-15

    CPC classification number: Y02A50/466

    Abstract: 本发明公开了重组脊髓灰质炎病毒Ⅰ型病毒样颗粒的制备方法。本发明所提供的方法包括如下步骤:1)将脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的P1基因和3ABC基因克隆到目的质粒中,得到重组表达载体;2)用所述重组表达载体转化目的酵母细胞,得到表达所述P1基因和所述3ABC基因的重组酵母细胞;3)裂解所述重组酵母细胞,分离得到重组的脊髓灰质炎病毒Ⅰ型病毒样颗粒。实验证明,利用本发明所提供方法,在酵母表达系统中制备了脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的病毒样颗粒,同时较野生型P1基因和3ABC基因相比,本发明对P1基因和3ABC基因的密码子优化大大提高了脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的病毒样颗粒在酵母表达系统中的产量,可将其进一步用于生产婴幼儿手足口病候选预防性疫苗和药物组合物。

    1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯对照品的制备方法

    公开(公告)号:CN101863935B

    公开(公告)日:2013-01-02

    申请号:CN201010199208.2

    申请日:2010-06-04

    Abstract: 本发明涉及一种1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯对照品的制备方法。该方法是将白及药材粉碎成粗粉,乙醇提取,回收乙醇,浓缩液加水稀释,经大孔吸附树脂柱富集,乙醇-水解吸附,回收乙醇,得到浓缩液,浓缩液加入硅胶混合均匀,干燥成粉,以氯仿-甲醇洗脱,得到1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯粗品,粗品进行凝胶柱层析,得到1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯精品,再经制备型反相硅胶柱层析,甲醇-水洗脱,得到1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯对照品。经高效液相色谱法检测,1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯的含量可达到98%以上,该方法成本较低,步骤简单,专属性强。

    环乙二胺基竹红菌乙素在光动力抗肿瘤药物中的应用

    公开(公告)号:CN102526055A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201010606363.1

    申请日:2010-12-24

    Abstract: 本发明涉及环乙二胺基竹红菌乙素作为光敏剂在光动力抗肿瘤药物中的应用,包括用于治疗宫颈癌、乳腺癌、肺癌、胃癌以及皮肤癌等恶性肿瘤。本发明检测出环乙二胺基竹红菌乙素在避光时对HeLa、MCF7、MCF7/Adr、A549、A549/DDP、H1299、MGC803及A875等肿瘤细胞的IC50暗毒性均大于160μM;而红光剂量为12J/cm2照射时,对所检测肿瘤细胞的IC50光毒性均小于0.3μM;光增强因子(IC50暗毒性/IC50光毒性)均大于500甚至大于1600。本发明还证明了线粒体是环乙二胺基竹红菌乙素光动力杀死肿瘤细胞的重要作用靶点,而肿瘤细胞主要以细胞凋亡方式死亡。

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