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公开(公告)号:CN1731150B
公开(公告)日:2010-04-28
申请号:CN200510019330.6
申请日:2005-08-23
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种利用生物芯片检测二恶英类化学物质的方法。其步骤是:首先,在玻片上固定末端Cy5荧光标记的含DRE序列的探针,加入从小鼠肝细胞提取的胞液与2,3,7,8-TCDD的混合液,则胞液中含有的AhR/ARNT蛋白可与DRE序列结合,再加入T7核酸外切酶,由于AhR/ARNT蛋白与DRE序列的结合阻碍了T7核酸外切酶对末端Cy5标记的单核苷酸的消化,使得2,3,7,8-TCDD的含量与荧光强度呈正相关,最后检测Cy5荧光分子的荧光值,根据荧光值的多少来确定样品中二恶英类化学物质的含量。本发明能快速准确的检测二恶英,检测成本低。
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公开(公告)号:CN101348794A
公开(公告)日:2009-01-21
申请号:CN200710052783.8
申请日:2007-07-19
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种高活力葡萄糖氧化酶突变体编码基因及制备方法和应用。这种高活力葡萄糖氧化酶突变体的编码基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,其编码的蛋白具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列,其步骤是:首先设计两对诱变引物;第二是获得大肠杆菌菌株DH5α/GOD-D401N/A574V;第三是鉴定重组质粒pPIC9kGOD-D401N/A574V;第四是培养大肠杆菌菌株DH5α/GOD--D401N/A574V;第五是得到含突变基因的线性DNA;第六是获得毕赤酵母菌株GS115/GOD-D401N/A574V;第七是诱导纯化获得目的蛋白。本发明方法易行,成本低廉,高酶活葡萄糖氧化酶突变株蛋白在食品糖类检测和保鲜中的应用,具有很高的实用价值。
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公开(公告)号:CN100386628C
公开(公告)日:2008-05-07
申请号:CN200610018858.6
申请日:2006-04-21
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , C12Q1/02
Abstract: 本发明公开了一种噬菌体免疫PCR检测病原的方法,其步骤是首先把特异识别病原的单克隆抗体包被于酶标板上捕获样品中的病原抗原,然后加入特异识别病原抗原的重组噬菌体,洗涤后结合到样品上的噬菌体作为模板进行PCR反应,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测,通过进行实时定量PCR对样品中的病原进行定量。本方法检测病原简单灵敏且成本低廉,适用于病原感染的实验室诊断和血清流行病学调查。
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公开(公告)号:CN100999759A
公开(公告)日:2007-07-18
申请号:CN200610094930.3
申请日:2006-06-21
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种基于大肠杆菌碱性磷酸酶的蛋白激酶检测的方法。根据大肠杆菌碱性磷酸酶活性中心的结构特征,设计并构建大肠杆菌碱性磷酸酶突变体,屏蔽其催化能力,保留和磷酸化底物结合的能力,使其成为一种磷酸化蛋白(短肽)通用结合物。将磷酸化蛋白通用结合物固定在BIAcore3000传感器芯片上,加入蛋白激酶短肽底物和激酶反应后形成的磷酸化短肽,通过BIAcore3000传感器的响应信号来鉴定激酶的种类和含量。该方法利用磷酸化蛋白(短肽)通用结合物取代抗体发展蛋白激酶检测新方法,可避免荧光抗体检测方法中特异性磷酸化抗体的难获得性等瓶颈问题,具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN1304600C
公开(公告)日:2007-03-14
申请号:CN200510018969.2
申请日:2005-06-23
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种高通量检测环境中二恶英类化学物质的方法。其步骤是:首先是探针的设计;其次是探针的退火;第三是探针的固定;第四是提取含有AhR和ARNT受体蛋白的SD小鼠肝脏胞液;第五是将SD小鼠肝脏细胞液与含有二恶英类化学物质待测样品混合;第六是FITC的荧光检测。根据荧光值增加的多少来确定样品中二恶英类化学物质的含量。本发明能快速准确的检测二恶英类化学物质,检测成本低,应用前景广泛。
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公开(公告)号:CN1834655A
公开(公告)日:2006-09-20
申请号:CN200610018858.6
申请日:2006-04-21
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , C12Q1/02
Abstract: 本发明公开了一种噬菌体免疫PCR检测病原的方法,其步骤是首先把特异识别病原的单克隆抗体包被于酶标板上捕获样品中的病原抗原,然后加入特异识别病原抗原的重组噬菌体,洗涤后结合到样品上的噬菌体作为模板进行PCR反应,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测,通过进行实时定量PCR对样品中的病原进行定量。本方法检测病原简单灵敏且成本低廉,适用于病原感染的实验室诊断和血清流行病学调查。
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公开(公告)号:CN1800402A
公开(公告)日:2006-07-12
申请号:CN200510020017.4
申请日:2005-12-16
Applicant: 中国科学院水生生物研究所 , 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种识别对虾白斑杆状病毒单链抗体Al-甲基对硫磷水解酶融合蛋白及其制备方法,涉及水产养殖生物病毒抗体。单链抗体基因与甲基对硫磷水解酶基因通过与一编码[-(Gly-Ser)5-]小肽的寡核苷酸片段互补链连接,形成MPH-L-A1E的融合基因,然后再克隆到一大肠杆菌的表达载体上,融合蛋白以可分泌的形式表达。用该融合蛋白可直接与病毒结合,并产生颜色反应,由此可以省去用识别对虾白斑综合症病毒的单链抗体Al检测病毒时必须的二抗操作步骤,简化了操作程序,并降低了检测成本。
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公开(公告)号:CN1141381C
公开(公告)日:2004-03-10
申请号:CN01128319.X
申请日:2001-08-07
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种有机磷农药降解菌及其制备方法。该微生物是假单胞菌WBC-3菌株,CCTCC NO.M201027,该菌的16S rDNA序列号为GenBank编号No.AY040872。制备该菌株的步骤是首先将含有有机磷农药污染土样配制成菌悬液,悬液接种含甲基对硫磷的无机盐培养基;其次是将上述菌悬液接入培养基中,培养至对数生长期;第三是上述培养菌液用平板稀释法进行分离纯化;第四是经生理生化鉴定,确定上述菌株是假单胞菌,保存于LB斜面,使用前外加甲基对硫磷的培养基进行驯化。本发明筛选的菌株降解性能稳定,降解酶系丰富,降解底物范围广,能完全降解对硫磷等有机磷农药,适合在果蔬农药去毒。
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公开(公告)号:CN1118705C
公开(公告)日:2003-08-20
申请号:CN00116096.6
申请日:2000-10-25
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种在线监测废水BOD的方法与装置,利用废水中筛选出的微生物,构成测定废水BOD的微生物传感器,在经标准GGA溶液标定后,可以定量测定持续流经的废水BOD值,通过使用本发明的方法和装置,就可得到所测废水的BOD变化曲线,进而获知废水的性质变化。该发明测定方便、快速、响应稳定可靠,适用于水质的快速检测与评估。
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公开(公告)号:CN1348993A
公开(公告)日:2002-05-15
申请号:CN01133630.7
申请日:2001-11-02
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种固相载体上校读PCR检测基因突变的方法,设计引物,经二硫化物和磷酸修饰处理后,固定于普通载玻片,进行固相PCR反应;在PCR过程中,利用DNA多聚酶的3’-5’外切酶活性,实现突变基因的固相有效扩增,PCR过程中掺入生物素,扩增产物用酶标方法进行原位检测。本发明可对同一基因多个突变发生位点进行同步检测,对多个不同基因的基因突变情况进行检查,检测速度快,灵敏度高,操作简便,成本低,可用于细菌耐药性、遗传病等的临床检测。
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