一种磁性纳米线制备方法
    42.
    发明公开

    公开(公告)号:CN112957371A

    公开(公告)日:2021-06-15

    申请号:CN202110193638.1

    申请日:2021-02-20

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种磁性纳米线制备方法,属于神经系统修复及纳米结构制备领域。一种磁性纳米线制备方法,包括:步骤1:合成具有四氧化三铁内核及二氧化硅涂层的磁性纳米颗粒;步骤2:构建静态磁场,并使静态磁场方向能够在二维平面以任意角度调控;步骤3:将含有Matrigel基质胶的磁性纳米颗粒单分散液滴加于位于静态磁场中的玻片上,通过静态磁场组装磁性纳米颗粒成为磁性纳米线,并通过Matrigel基质胶固定磁性纳米线线性结构。

    Rassf2调控内耳干细胞增殖分化方法及在毛细胞再生中的应用

    公开(公告)号:CN112877413A

    公开(公告)日:2021-06-01

    申请号:CN202110194497.5

    申请日:2021-02-20

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明涉及内耳干细胞领域,具体的是Rassf2调控内耳干细胞增殖分化方法及在毛细胞再生中的应用。调控方法,包括以下步骤:一、在野生型小鼠中检测Shh或Hippo和Rassf2在耳蜗中的表达情况;二、在离体实验中研究Shh或Hippo和Rassf2对流式分选出的内耳干细胞增殖分化的作用;三、在活体毛细胞新霉素损伤模型上,研究Shh或Hippo和Rassf2的作用。本发明使用Lgr5‑EGFP‑CreERT2工具鼠可使得内耳干细胞(Lgr5阳性细胞)的分离准确且大量,可达到较好的研究前提:分选出的小鼠Lgr5阳性内耳干细胞。此外,在离体实验中研究Shh、Hippo和Rassf2对分选出的内耳干细胞进行成球和分化实验后,可以深入探究Shh、Hippo和Rassf2在调控内耳干细胞增殖分化及毛细胞再生中的具体作用机制。

    Gpm6b调控内耳干细胞增殖分化方法及在毛细胞再生中的应用

    公开(公告)号:CN112877367A

    公开(公告)日:2021-06-01

    申请号:CN202110194117.8

    申请日:2021-02-20

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体的是Gpm6b调控内耳干细胞增殖分化方法及在毛细胞再生中的应用。分化方法的步骤:OC‑1细胞培养;siRNA敲低Gpm6b基因,采用N1301、N885、N1082三种不同的siRNA敲减OC‑1细胞中的Gpm6b基因;Lgr5+祖细胞的分离培养及Gpm6b基因敲低,Lgr5+祖细胞消化成单细胞后,采用流式细胞分选技术进行分选,经培养后再Gpm6b基因敲低;Gpm6b基因敲低对Lgr5+祖细胞增殖/分化的影响,采用细胞成球实验、EdU染色实验和免疫荧光实验研究Gpm6b基因敲减对Lgr5+细胞增殖/分化的影响,再评估Lgr5+细胞增殖、分化为毛细胞的能力;数据分析,采用GraphPadPrism 6进行数据统计分析。本发明敲低Gpm6b基因后对于Lgr5+细胞成球有抑制作用,即Gpm6b敲低抑制Lgr5+细胞增殖。而Gpm6b基因敲减对Lgr5+细胞分化再生毛细胞无调控作用。

    Pcolce2调控内耳干细胞增殖分化方法及在毛细胞再生中的应用

    公开(公告)号:CN112852815A

    公开(公告)日:2021-05-28

    申请号:CN202110193785.9

    申请日:2021-02-20

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明涉及内耳干细胞领域,具体的是Pcolce2调控内耳干细胞增殖分化方法及在毛细胞再生中的应用。Pcolce2调控内耳干细胞增殖分化方法,包括以下步骤:一、siRNA的选择;二、Lgr5+祖细胞的分离培养及Pcolce2基因敲除;三、Pcolce2基因敲除对Lgr5+祖细胞增殖/分化的影响;四、数据分析。本发明将从Pcolce2这个基因调控方面着手研究其对内耳毛细胞再生的作用。通过OC‑1细胞利用不同siRNA敲除Pcolce2基因,RT‑qPCR检测转染效果;分离培养Lgr5+内耳干细胞转染后检测增殖及分化,通过Lgr5+干细胞上进行成球分化实验表明Pcolce2基因敲低后,Lgr5+内耳干细胞的增殖显著降低,说明Pcolce2基因有促进内耳干细胞增殖的作用。

    一种Serpine2基因小鼠模型构建方法与应用

    公开(公告)号:CN112813026A

    公开(公告)日:2021-05-18

    申请号:CN202110198446.X

    申请日:2021-02-20

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种Serpine2基因小鼠模型构建方法与应用,属于生物技术领域。一种Serpine2基因小鼠模型构建方法,包括以下步骤:培养初代OC细胞;通过siRNA敲减所述OC细胞中的Serpine2基因;取新生Lgr5‑EGFP小鼠耳蜗,放入培养液中培养,并消化成单细胞;从含有Lgr5‑EGFP细胞的单细胞悬液中分选出Lgr5+细胞;用所述siRNA敲除Lgr5+细胞中的Serpine2基因;培养Serpine2基因敲减的Lgr5+细胞,扫描电子显微镜观察并记录成球细胞的数量和直径;培养第一代所述成球细胞,用EdU染色以及DAPI、Myo7a抗体标记染色,观察毛细胞分化的情况。

    一种生物因子及其在促进内耳毛细胞再生上的应用

    公开(公告)号:CN112175923A

    公开(公告)日:2021-01-05

    申请号:CN202011060861.0

    申请日:2020-09-30

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明属于生物学内耳研究领域,具体公开了一种生物因子及其在促进内耳毛细胞再生上的应用。所述生物因子为单倍剂量状态下的组蛋白去泛素化酶USP16,所述生物因子具有促进内耳干细胞增殖分化为毛细胞的活性,氨基酸序列如SEQ NO.1所示。本发明人首次在内耳中发现USP16在小鼠内耳中的时空表达模式;后续发现该基因在小鼠毛细胞中敲低之后会导致毛细胞凋亡进而影响正常的听觉功能;最后发现在内耳Lgr5阳性内耳干细胞中敲低USP16基因后促进了内耳干细胞的增殖,导致了毛细胞的增生情况。本发明所述USP16基因为后续小鼠毛细胞再生的研究中奠定了重要基础。

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