人BAFF-R基因启动子活性的测定方法

    公开(公告)号:CN101781679B

    公开(公告)日:2012-05-23

    申请号:CN200910213157.1

    申请日:2009-10-19

    Abstract: 本发明公开了一种人BAFF-R基因启动子活性的测定方法,包括引物设计、BAFF-R基因5’侧翼区的克隆、BAFF-R基因5’侧翼区序列缺失质粒的构建、细胞培养、重组报告基因质粒瞬时转染细胞、荧光素酶活性检测等步骤。本发明易操作、准确,测定了BAFF-R基因5’上游序列在不同细胞中转录活性的差异及其不同区域转录活性的差异,确定了BAFF-R基因的核心启动子所在区域,对于研究BAFF-R基因转录调控元件的作用,及阐明该基因的表达调控机制奠定了基础。

    5’-tiRNA-Lys-CTT作为肝癌血清早期诊断标志物的应用

    公开(公告)号:CN118995935A

    公开(公告)日:2024-11-22

    申请号:CN202411340769.8

    申请日:2024-09-25

    Abstract: 本发明提供5’‑tiRNA‑Lys‑CTT作为肝癌血清早期诊断标志物的应用,涉及生物诊断试剂研发技术领域,其具体技术方案为:5’‑tiRNA‑Lys‑CTT作为检测靶点在制备肝癌早期诊断产品中的应用,本申请中通过具体的验证实验证明了血清5’‑tiRNA‑Lys‑CTT在肝癌早期,尤其是BCLC 0/A期患者血清及肿瘤组织中显著上调,提示5’‑tiRNA‑Lys‑CTT与肝癌密切相关。通过ROC分析显示,血清5’‑tiRNA‑Lys‑CTT对BCLC 0/A期肝癌患者和健康者之间具有较好的区分效力,并且区分效力优于甲胎蛋白和异常凝血酶原(维生素K缺乏或拮抗剂‑II诱导的蛋白质),为肝癌患者的早期诊断提供了一种新的生物标志物。血清样品易获取,疑似病人查血可作为早期筛查指标,以便于早期治疗,提高肝癌5年生存率;相比影像学及有创检查更简便、更能让病人接受。

    一种用于非小细胞肺癌筛查的circRNA标志物

    公开(公告)号:CN118345172A

    公开(公告)日:2024-07-16

    申请号:CN202410608457.4

    申请日:2024-05-16

    Abstract: 本发明提供一种用于非小细胞肺癌筛查的circRNA标志物,涉及生物医学技术领域,所述标志物为hsa_circ_0016601,所述hsa_circ_0016601的序列号如SEQ ID NO:01所示。首先通过高通量测序构建非小细胞肺癌组织和癌旁正常组织的circRNA差异表达谱,RT‑qPCR检测hsa_circ_0016601在非小细胞肺癌中的表达情况,从而首次发现hsa_circ_0016601可作为非小细胞肺癌诊断的生物标志物,并且,与正常人相比,该circRNA生物标志物在临床大样本非小细胞肺癌患者血清中的表达升高。非小细胞肺癌患者血清中高表达的上述circRNA生物标志物与组织学类型,分化程度,肿瘤大小,TNM分期,远端转移,细胞增殖相关抗原Ki‑67表达及胸膜浸润有关。本发明提供的生物标志物,其区分血清中非小细胞肺癌患者和健康正常人的AUC可达0.810,灵敏度和特异度分别为72%和77%,截断值为2.4180。

    转录因子CEBPB结合CPEB1基因启动子区调节CPEB1基因表达的方法

    公开(公告)号:CN112708635B

    公开(公告)日:2023-02-21

    申请号:CN202011620055.4

    申请日:2020-12-30

    Abstract: 本发明提供一种转录因子CEBPB和TFCP2竞争结合CPEB1基因启动子区调节CPEB1基因表达的方法,包括如下步骤:S1、通过实验验证转录因子CEBPB可结合CPEB1基因启动子区,而当CPEB1基因启动子区高甲基化状态,转录因子CEBPB无法结合,影响CPEB1基因的染色质可及性,从而抑制CPEB1基因的表达;S2、通过实验验证CPEB1基因启动子区高甲基化状态时,转录因子TFCP2可结合CPEB1基因启动子区,从而阻止转录因子CEBPB的结合。本发明的实验结果表明CPEB1基因启动子区的高DNA甲基化状态可增加转录因子TFCP2的结合活性,使其启动子区不能结合CEBPB,同时证明转录因子TFCP2是一新的DNA甲基化识别因子。

    一种同位素稀释质谱法测定血清miR-224含量的方法

    公开(公告)号:CN110220994B

    公开(公告)日:2022-02-18

    申请号:CN201910599052.8

    申请日:2019-07-04

    Abstract: 本发明公开了一种同位素稀释质谱法测定血清miR‑224含量的方法,包括如下步骤:(1)合成miR‑224核酸单链并配成溶液,建立标准曲线;(2)合成核酸肽探针并配成溶液,用以捕获miR‑224;(3)合成同位素标记的多肽并配成溶液作为内标;(4)在血清样本中提取miRNA;(5)将提取出的miRNA生物素化;(6)将上述miRNA与链霉素琼脂糖球反应,形成miRNA‑生物素‑链霉亲和素琼脂糖球复合物;(7)加入核酸肽探针捕获miR‑224‑生物素‑链霉亲和素琼脂糖球复合物;(8)将上述复合物清洗干净后加入胰蛋白酶酶解,然后将酶解产物固相萃取,将萃取出的多肽吹干并复溶;(9)将复溶后的多肽和同位素标记的多肽样品进行质谱分析;(10)计算血清样本中miR‑224含量。本发明准确度高,结果可靠。

    循环肿瘤细胞过滤微流控制装置、其制备工艺及工作方法

    公开(公告)号:CN109517728A

    公开(公告)日:2019-03-26

    申请号:CN201811254463.5

    申请日:2018-10-26

    Abstract: 本发明提供一种循环肿瘤细胞过滤微流控制装置,包括负压进样泵和微流控制芯片,微流控制芯片包括上层进样层、塑料微孔过滤膜和下层废液层;塑料微孔过滤膜上均匀布置有若干过滤孔;上层进样层连通样本试管中,下层废液层连接在负压进料泵;本发明还提供一种循环肿瘤细胞过滤微流控制装置的制备工艺,包括以下步骤:上层进样层和下层废液层制备、塑料微孔过滤膜制备、微流控制芯片组装和整体安装;又提供一种循环肿瘤细胞过滤微流控制装置的工作方法,包括以下步骤:制备样本,捕捉肿瘤细胞,加入抗体稀释液,免疫荧光染色观察计数。本发明中将细胞捕获、鉴定集于一体,减少了转移过程中肿瘤细胞细胞的损伤和污染,具有成本低,操作简单等特点。

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