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公开(公告)号：CN110656116A
公开(公告)日：2020-01-07
申请号：CN201910986242.5
申请日：2019-10-17
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种基因FoCWM在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明采用Split-marker重组技术构建基因敲除载体，将其导入香蕉枯萎病菌原生质体；利用同源重组方法将该基因FoCWM从香蕉枯萎病菌中敲除，获得敲除突变体ΔFocwm；该突变体与其野生型相比，生长速率减慢，气生菌丝变得致密，穿透力减弱，并对细胞壁的完整性有重要作用。致病性试验表明，FoCWM的缺失显著降低了香蕉枯萎病菌的致病力。本发明证实FoCWM是香蕉枯萎病菌生长发育、维持细胞壁完整性和致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN110184199A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910433431.X
申请日：2019-05-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种香蕉枯萎病菌1号小种原生质体的制备与再生方法。该方法包括Foc1分生孢子悬浮液的制备、Foc1菌丝体的收集、菌丝体细胞壁的酶解、Foc1原生质体的收集、Foc1原生质体的再生等步骤。本发明通过所述方法酶解菌丝细胞，所获原生质体的制备数最高达到6.0×108个/mL，所得原生质体大小均一，形态饱满，近似圆形。本发明采用含有200g/L葡萄糖的CM固体培养基作为再生培养基，提高了Foc1原生质体的再生率，最高为28.6％，明显高于现有的香蕉枯萎病菌原生质体的再生方法，为后续原生质体转化技术研究香蕉病菌致病分子机制提供了良好的基础。本发明方法制备过程简单、高效，便于操作。
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公开(公告)号：CN109371044A
公开(公告)日：2019-02-22
申请号：CN201811269864.8
申请日：2018-10-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种稻瘟菌基因Movan及其应用。本发明研究克隆得到稻瘟菌致病相关基因，并实验证明，将该基因从稻瘟菌中成功敲除后，所得到的稻瘟菌敲除突变体的菌落生长速度缓慢，气生菌丝较稀疏，菌落颜色呈现灰白色，黑色素沉积明显低于野生型稻瘟菌；此外，突变体的产孢量明显低于野生型稻瘟菌。致病性实验表明，稻瘟菌敲除突变体在水稻叶片上不能形成明显病斑；基因Movan的缺失可导致稻瘟菌对水稻侵染能力的下降。本发明所提供的方法和应用在稻瘟病的防控方面具有重要意义。
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公开(公告)号：CN107641599A
公开(公告)日：2018-01-30
申请号：CN201710903818.8
申请日：2017-09-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种香蕉枯萎病菌培养基及其应用，所述培养基含有以下组分：葡萄糖的终浓度为10 g/L，天冬氨酸的终浓度为2～8 g/L，20×硝酸盐、200×铁盐、1000×维生素、1000×微量元素的体积分数分别为5%、0.5%、0.1%、0.1%；所述培养基的pH值为6.2～6.5。本发明提供的培养基既能促进香蕉枯萎病菌分生孢子的萌发，又能避免外源大分子蛋白质的干扰，有利于香蕉枯萎病菌分泌蛋白质的分析。
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公开(公告)号：CN106435019A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201610826246.3
申请日：2016-09-18
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6804 , C12Q2531/119 , C12Q2563/131 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种免疫捕捉-反转录环介导等温扩增反应检测香蕉黄瓜花叶病毒的方法，还包括一组LAMP引物组，所述检测引物组包含内引物对和外引物对；所述外引物对CMV-F3/CMV-B3，序列如SEQ ID NO.1～2所示，内引物对CMV-FIP/CMV-BIP，序列如SEQ ID NO.3～4所示。本发明将血清学与RT-LAMP法相结合，首先用特异性的CMV抗体捕获病毒粒子，并以该病毒粒子为模板，利用上述引物组进行RT-LAMP扩增检测CMV。该方法操作简便，灵敏度高，特异性强，可作为香蕉植株、吸芽及组培苗中香蕉黄瓜花叶病毒特异性检测的有效手段，以便及时采取措施，减少病害带来的经济损失。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118895345A
公开(公告)日：2024-11-05
申请号：CN202410988712.2
申请日：2024-07-23
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/70 , C12N15/11 , C12R1/94
Abstract: 本发明公开一种基于实时荧光定量PCR评估香蕉内源性BSV激活积累量的方法，属于香蕉病毒检测技术领域。通过该方法可以准确评估内源性BSV(如BSOLV)的激活积累量。该方法适用于生物胁迫和非生物胁迫情况下，评估B基因组香蕉中内源性BSV(如BSOLV)的激活积累量，为利用内源性BSV(如BSOLV)的激活积累量来预测香蕉线条病的发生和流行提供科学依据，以采取防控措施阻断香蕉线条病的流行。该方法的优点在于，不局限于香蕉中B基因的倍数评估内源性BSV(如BSOLV)的激活积累量，为准确预测内源性BSV(如BSOLV)激活引起的香蕉线条病的流行奠定了基础。
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公开(公告)号：CN113956337B
公开(公告)日：2023-05-12
申请号：CN202111131982.4
申请日：2021-09-26
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了基因FoUPE3在防治香蕉枯萎病中的应用。本发明通过敲除并回补基因FoUPE3，获得了Foc4敲除突变体△FoUPE3和回补突变体△FoUPE3‑com。致病性测定表明，敲除突变体△FoUPE3的致病性显著降低，回补突变体△FoUPE3‑com的致病性则恢复到Foc4野生型水平。此外，敲除突变体△FoUPE3中5个镰刀菌酸合成关键基因的表达量显著下降，表明敲除FoUPE3基因影响了Foc4中镰刀菌酸的合成。本发明不仅有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制，还为开发香蕉枯萎病菌的有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN114773440A
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202210542266.3
申请日：2022-05-18
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种蛋白FoUpe2在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入Foc4原生质体；利用同源重组方法将该基因从Foc4中敲除，获得敲除突变体ΔFoUpe2；通过构建基因回补载体，将其导入ΔFoUpe2原生质体；利用随机插入的方法将该基因回补到敲除突变体中，获得回补突变体ΔFoUpe2‑com。与Foc4相比，ΔFoUpe2对SDS胁迫的敏感性显著升高；致病性试验表明，FoUpe2的缺失使Foc4的致病力显著升高；将该基因回补后，其致病力得到恢复。我们的研究有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN113278055B
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202110556363.3
申请日：2021-05-21
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种分泌蛋白MoUPE2在调控稻瘟菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入稻瘟菌原生质体；利用同源重组方法将该基因从稻瘟菌中敲除，获得敲除突变体ΔMoupe2；试验证明，相比稻瘟菌野生型，敲除突变体ΔMoupe2的分生孢子萌发和附着胞发育减缓，对细胞壁胁迫和渗透胁迫等更加敏感；致病性试验表明，MoUPE2的缺失显著降低了稻瘟菌的致病力；将该基因回补后，其致病力则恢复到野生型水平。本发明证实MoUPE2是稻瘟菌分生孢子萌发、附着胞发育，以及致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明稻瘟菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN109536432B
公开(公告)日：2022-05-31
申请号：CN201811162769.8
申请日：2018-09-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种稻瘟菌分泌蛋白的提取方法及应用shotgun技术研究其分泌蛋白质组的方法，包括以下步骤：S1.稻瘟菌分生孢子的培养：将稻瘟菌菌丝接种至PDA培养基中进行培养；向培养基中加入无菌水，捣碎菌丝，转至西红柿燕麦培养基中，涂抹均匀，28℃下光照培养2～4d；将培养基表面菌丝打断，再加入无菌水，洗去培养基表面菌丝，28℃下光照培养2～4d进行产孢；加入无菌水进行冲洗，收集分生孢子，过滤后得到浓缩的稻瘟菌分生孢子悬浮液；S2.采用超滤法制备稻瘟菌分生孢子分泌蛋白。本发明通过优化稻瘟菌分生孢子的培养和分泌蛋白的诱导提取步骤，避免了复杂的样品前处理过程；并应用shotgun技术，高通量分析鉴定了稻瘟菌分泌蛋白；本发明对于探究稻瘟菌的致病机理有重要意义。
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