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公开(公告)号：CN113174390A
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN202110247234.6
申请日：2021-03-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了香蕉枯萎病菌FoNpp1基因在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用。本发明通过构建基因敲除载体，将FoNpp1基因导入香蕉枯萎病菌原生质体；利用同源重组方法将该基因从香蕉枯萎病菌中敲除，获得敲除突变体；通过构建基因回补载体，利用随机插入的方法将该基因回补到敲除突变体中，获得回补突变体。敲除突变体在生长发育方面不存在缺陷，对高渗胁迫、氧化胁迫等不敏感。致病性测定结果表明，与香蕉枯萎病菌野生型相比，敲除突变体镰刀菌酸含量及对巴西蕉的致病力显著降低。表明FoNpp1基因是香蕉枯萎病菌的致病相关基因，FoNpp1是香蕉枯萎病菌致病性所必需的，在防控香蕉枯萎病中具有较大的应用前景。
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公开(公告)号：CN110183521A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910433251.1
申请日：2019-05-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种稻瘟菌基因MoRMD1在调控稻瘟菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入稻瘟菌原生质体；利用同源重组方法将该基因MoRMD1从稻瘟菌中敲除，获得敲除突变体ΔMoRMD1；所得到的稻瘟菌敲除突变体在附着胞形成方面存在缺陷，并且MoRMD1对维持细胞壁的完整性有重要作用。致病性试验表明，MoRMD1的缺失显著降低了稻瘟菌的毒力，在水稻叶片上不能形成明显病斑。本发明证实MoRMD1是稻瘟菌附着胞形成、维持细胞壁完整性和致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明稻瘟菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN109536432A
公开(公告)日：2019-03-29
申请号：CN201811162769.8
申请日：2018-09-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种稻瘟菌分泌蛋白的提取方法及应用shotgun技术研究其分泌蛋白质组的方法，包括以下步骤：S1.稻瘟菌分生孢子的培养：将稻瘟菌菌丝接种至PDA培养基中进行培养；向培养基中加入无菌水，捣碎菌丝，转至西红柿燕麦培养基中，涂抹均匀，28℃下光照培养2～4d；将培养基表面菌丝打断，再加入无菌水，洗去培养基表面菌丝，28℃下光照培养2～4d进行产孢；加入无菌水进行冲洗，收集分生孢子，过滤后得到浓缩的稻瘟菌分生孢子悬浮液；S2.采用超滤法制备稻瘟菌分生孢子分泌蛋白。本发明通过优化稻瘟菌分生孢子的培养和分泌蛋白的诱导提取步骤，避免了复杂的样品前处理过程；并应用shotgun技术，高通量分析鉴定了稻瘟菌分泌蛋白；本发明对于探究稻瘟菌的致病机理有重要意义。
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公开(公告)号：CN101186917B
公开(公告)日：2012-01-25
申请号：CN200710032051.2
申请日：2007-12-04
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种稻瘟菌激发子CSB I基因及其克隆方法，所述基因编码的核苷酸序列，cDNA全长序列如SEQ ID NO：1，氨基酸序列如SEQ ID NO：2。根据已测的CSB I激发子的肽端编码序列设计引物，以稻瘟病菌ZC13生理小种总RNA为模板，采用RT-PCR方法，合成cDNA第一链，利用cDNA末端快速扩增技术克隆得到了稻瘟病菌ZC13生理小种CSB I激发子的推导cDNA序列。本发明能作为广泛、大量研究激发子诱导水稻产生抗病性的机制的基础，并供研究水稻转基因育种使用。
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公开(公告)号：CN101698828A
公开(公告)日：2010-04-28
申请号：CN200910192921.1
申请日：2009-09-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种铜绿假单胞菌D10，Pseudomonas aeruginosa D10，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 209104。在牛肉膏蛋白胨培养基上菌落呈棕色，圆形，有光泽，湿润，边缘整齐，菌落直径0.2～0.5cm，菌体成短杆状，无芽孢。本发明还公开了上述铜绿假单胞菌D10的制备方法与用途。本发明铜绿假单胞菌D10抑菌谱广，可抑制玉米大、小斑病，对玉米大斑病菌、玉米小斑病菌、玉米弯孢叶斑病菌、棉花黄萎病菌、小麦赤霉病菌、香蕉炭疽病菌和香蕉枯萎病菌也均有较强的拮抗作用，防治效率高，环境安全性好，具有良好的开发应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101186887A
公开(公告)日：2008-05-28
申请号：CN200710032054.6
申请日：2007-12-04
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高效防治香蕉枯萎病的枯草芽孢杆菌203，所述枯草芽孢杆菌203，Bacillus subtils 203，保藏号为CCTCCM207094；同时公开了其制备方法以及应用，所述枯草芽孢杆菌203菌株经平板对峙、盆栽试验筛选获得，能够有效抑制香蕉枯萎病菌的生长，抑菌谱广，对棉花枯萎病菌、棉花黄萎病菌、西瓜枯萎病菌、番茄枯萎病菌、弯孢叶斑病菌或香蕉炭疽病菌等多种病原真菌都有拮抗作用，环境安全性好，具有良好的开发应用前景。
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公开(公告)号：CN101186885A
公开(公告)日：2008-05-28
申请号：CN200710032049.5
申请日：2007-12-04
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢杆菌201，Bacillus licheniformis 201，保藏号CCTCCM207092，在牛肉膏蛋白胨培养基上菌落呈灰白色，圆形，平展，无光泽，边缘整齐，菌落直径一般2～3mm，菌体直杆状，大小为2.06×0.70μm，芽孢呈椭圆形；同时公开了其制备方法和应用，地衣芽孢杆菌201的对香蕉枯萎病菌抑制作用强，抑菌谱广，对香蕉枯萎病菌，西瓜枯萎病菌，番茄枯萎病菌，香蕉炭疽病菌，胶胞炭疽菌，玉米弯孢叶斑病菌，棉花黄萎病菌，小麦赤霉病菌等多种病原真菌都具有拮抗作用，防效高，环境安全性好，具有良好的开发应用前景。
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公开(公告)号：CN100368432C
公开(公告)日：2008-02-13
申请号：CN200510034092.6
申请日：2005-04-15
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/195 , C07K1/34
Abstract: 本发明以稻瘟病菌菌丝为材料，经培养冻融、匀浆离心，PM-10膜超滤，获得粗激发子。粗激发子冻融后，经系列层析纯化获得一种新的稻瘟病菌糖蛋白激发子，其分子量是49.08kDa，等电点为6.01，达到银染电泳纯。质谱鉴定该激发子是稻瘟病菌MG05155.4开放阅读框推测编码的hypothetical protein MG05155.4。该激发子性质稳定，诱导非亲和性互作水稻品系中苯丙氨酸解氨酶酶活的升高明显高于对亲和性互作品系的诱导，诱导水稻过氧化物酶酶海升高的最低有效浓度是1.5nmol/L。本研究在稻瘟病生物防治中具有良好的应用前景，能够为开发广谱抗病的工程菌株及无公害农药提供新依据。
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公开(公告)号：CN1307310C
公开(公告)日：2007-03-28
申请号：CN200510033296.8
申请日：2005-02-28
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种香蕉枯萎病菌致病性多聚半乳糖醛酸酶基因，本发明还公开了一种香蕉枯萎病菌致病性多聚半乳糖醛酸酶基因克隆，根据已测的PGC1蛋白N末端编码序列设计引物，以香蕉枯萎病菌4号生理小种菌株总RNA为模板，采用RT-PCR方法，合成cDNA的第一条链，5’RACE和3’RACE的方法克隆PGC1cDNA的全长序列，推测出PGC1的氨基酸序列。本发明获得的PGC1基因cDNA序列，可以作为区分FOC1号和4号小种的依据；将PGC1基因转化到真核微生物中，所表达的PGC1可以作为免疫蛋白抗原制作动物血清，作病原菌检测使用；真核微生物表达产物可以代替病原菌作耙标物，广泛筛选对PGC1有效的抗病基因，供香蕉抗枯萎病转基因育种使用。
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公开(公告)号：CN1673366A
公开(公告)日：2005-09-28
申请号：CN200510033297.2
申请日：2005-02-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N9/24
Abstract: 本发明公开了一种香蕉枯萎病菌多聚半乳糖醛酸酶的提取纯化方法，将粗酶液上样于Sephacry S－10016/10凝胶层析柱，用柱平衡缓冲液洗脱，收集混合酶活性大于粗酶活性25％的洗脱液，浓缩脱盐，浓缩液上样于Sepharose SP XL16/10强阳离子交换层析柱，进行线性梯度洗脱，收集梯度洗脱部分，将酶活性大于上样液酶活性25％的洗脱液混合，浓缩脱盐，浓缩液上样于Sepharose FF CM弱阳离子交换层析柱，进行线性梯度洗脱，收集梯度洗脱峰，浓缩脱盐。本发明提取纯化方法从香蕉枯萎病菌中提取致病性内切半乳糖醛酸酶，可以作为该病菌的检疫检测的新的指标，并能应用致病性内切半乳糖醛酸酶，制备香蕉枯萎病菌抗血清及在筛选和培育新的香蕉抗病品种。
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