能抑制和杀灭革兰氏阴性菌的抗菌肽HV2及制备方法

    公开(公告)号:CN108276485A

    公开(公告)日:2018-07-13

    申请号:CN201810238434.3

    申请日:2018-03-22

    Abstract: 本发明涉及一种能抑制和杀灭革兰氏阴性菌的抗菌肽HV2及制备方法。抗菌肽HV2的序列如序列表SEQ ID No.1所示。制备方法:1)根据β-发卡结构对称性末端肽模板:(XY)2X DP G X(YX)2,X=V;Y是带正电荷氨基酸残基H,设计获得HV2。2)固相合成法合成肽树脂;经TFA切割后得到该肽,反相高效液相色谱纯化,及该抗菌肽在制备治疗革兰氏阴性菌感染性疾病药物中的应用。本发明所得到的抗菌肽HV2对革兰氏阴性菌具有较强的抑菌活性和较弱的溶血活性,治疗指数较高,具有很大的发展潜力。是一种具有高细胞选择性、专杀革兰氏阴性菌的对称末端β-发卡抗菌肽。

    猪凝血酶碳末端衍生抗菌肽及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN104498465B

    公开(公告)日:2018-04-10

    申请号:CN201410855264.5

    申请日:2014-12-25

    Abstract: 本发明公开一种猪凝血酶碳末端衍生抗菌肽及其制备方法和应用,其抗菌肽氨基酸序列如SEQ No.1所示。本发明首先分析猪凝血酶的氨基酸组成特点,发现碳末端富含有疏水性和正电荷的氨基酸残基,从而通过截取碳末端的方式获得不同长度的衍生肽;然后使用多肽合成仪,进行固相合成法合成多肽粗品;最后使用高效液相色谱对多肽粗品进行纯化,并用电喷雾质谱法进行鉴定。通过最小抑菌浓度和溶血试验测定衍生抗菌肽的抑菌活性,筛选出具有较高活性的多肽PT17。本发明的优点:该多肽衍生自猪凝血酶的碳末端,属于天然衍生物,安全性较好,具有广谱抗菌活性和低毒性;肽链较短,制备方法和技术成熟,合成成本低。

    一种末端对称抗菌肽PP及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN107746429A

    公开(公告)日:2018-03-02

    申请号:CN201711098665.0

    申请日:2017-11-09

    CPC classification number: C07K7/08 A61K38/00

    Abstract: 本发明提供一种末端对称抗菌肽PP及其制备方法和应用。抗菌肽PP的序列如序列表SEQ ID No.1所示。制备方法:采用两个对称的α螺旋单位并在其中嵌入PG-1的β-转角部位氨基酸序列CRRRFC使其形成末端对称抗菌肽,设计出一种末端对称抗菌肽PP。抗菌肽PP在制备治疗革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌感染性疾病的药物中的应用,抗菌肽PP具有较高的抑菌活性,低毒性,其治疗指数是PG-1的80倍,因此具有较高的细胞选择性。能更加有目的性地杀死生物体内的病原菌,提高了抗菌肽的发展潜力与生物学价值。

    一种抗菌肽RW‑P及其制作方法和应用

    公开(公告)号:CN107141338A

    公开(公告)日:2017-09-08

    申请号:CN201710300080.6

    申请日:2017-05-02

    CPC classification number: C07K7/08 A61K38/00

    Abstract: 本发明提供了一种抗菌肽RW‑P及其制作方法和应用,抗菌肽RW‑P的序列如SEQ ID No.2所示。制作方法如下:以简单的两种氨基酸为基本的氨基酸组成,以XXYY的序列形式重复三次得到α‑螺旋型抗菌肽RW,其中,X为精氨酸,Y为色氨酸。将RW抗菌肽第5位的精氨酸和第8位的色氨酸进行定点的氨基酸残基替代,引入脯氨酸,得到抗菌肽RW‑P。计算机结构预测和圆二色谱结构测定表明,RW为α‑螺旋结构,引入脯氨酸,RW‑P的螺旋含量降低。研究发现,RW‑P保持了RW的高抗菌活性,同时降低了细胞毒性,提高了细胞选择性。此方法为设计高效低度的抗菌肽应用于动物生产提供了理论依据。

    色氨酸拉链β‑发卡抗菌肽及其制备方法和与应用

    公开(公告)号:CN106749531A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201611052878.5

    申请日:2016-11-25

    CPC classification number: C07K7/08 A61K38/00 C07K7/06

    Abstract: 本发明提供一种色氨酸拉链β‑发卡抗菌肽及其制备方法与应用。其序列如序列表SEQ ID No.1所示,制备方法以色氨酸拉链结构为模板,结合抗菌肽的氨基酸组成及结构特点,利用跨链的W‑W相互作用作为结构稳定因子,并将带电荷氨基酸赖氨酸和疏水性氨基酸色氨酸作为重复二元序列单元对称循环排列于β‑发卡的两臂,获得抗菌肽WK3,具有较高的抑菌活性与细胞选择性,治疗指数高达161.27。通过该方法设计的抗菌肽不需要二硫键绑定却具有极高的结构稳定性,提高了抗菌肽在细菌细胞和哺乳动物细胞之间的选择性,具备成为抗生素替代物的应用潜质,该抗菌肽活性较高而细胞毒性相对较低。

    一种利用枯草芽孢杆菌表达的菌丝霉素及表达方法

    公开(公告)号:CN106554396A

    公开(公告)日:2017-04-05

    申请号:CN201611052836.1

    申请日:2016-11-25

    Inventor: 单安山 张丽聪

    CPC classification number: Y02A50/473 C07K14/37 A61K38/00 C12N15/66 C12N15/75

    Abstract: 本发明提供一种利用枯草芽孢杆菌表达的菌丝霉素及表达方法。菌丝霉素,其序列如序列表SEQ ID No.1所示,方法是将带有信号肽SacB、蛋白标签6×His‑SUMO的菌丝霉素基因plectasin连接到表达载体pGJ148上,电转至大肠感受态细胞DH5α中,将鉴定正确的重组质粒转化至枯草芽孢杆菌WB800N中,在诱导剂麦芽糖的作用下,实现融合蛋白的表达,经纯化获得到菌丝霉素蛋白。该蛋白对革兰氏阳性细菌具有高效杀伤作用,并对人血红细胞无溶血性,降低了生产成本,进一步推动了菌丝霉素作为抗感染类药物的应用,同时为菌丝霉素的应用提供了理论基础。

    一种重组猪源抗菌肽及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN105622744A

    公开(公告)日:2016-06-01

    申请号:CN201610177901.7

    申请日:2016-03-25

    Inventor: 单安山 王珏

    CPC classification number: C07K14/47 A61K38/00

    Abstract: 本发明公开一种重组猪源抗菌肽及其制备方法和应用。重组猪源抗菌肽PR39,其序列如序列表Seq No.1所示。制备方法是:利用基因工程方法人工合成PR39融合基因片段,并在枯草芽孢杆菌中成功表达了重组抗菌肽PR39。进一步研究表明,重组抗菌肽PR39明显抑制革兰氏阴性菌的生长。本抗菌肽是一种具有广谱抗菌活性的小分子多肽,同时还具有许多生物活性例如促进伤口愈合、促进血管生成和降低炎症反应等作用。

Patent Agency Ranking