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公开(公告)号：CN115417507B
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202210737434.4
申请日：2022-06-21
Applicant: 江南大学
IPC: C02F3/34 , B09C1/10 , C09K17/14 , C12N9/02 , C02F101/38
Abstract: 本发明公开了一种高效降解兽药抗生素残留的漆酶及其应用，属于环境生物技术领域。本发明筛选到一种来源于Lysinibacillus fusiformis的漆酶，相比现有的技术，本发明筛选到的漆酶能够耐受80℃的高温，具有在更高温度下长时间稳定降解抗生素，良好的耐热性和优异的降解效率等能力。能够在短时间内降解大量抗生素，并且生产成本低，所用设备少，有助于工业上对兽药抗生素残留的控制。
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公开(公告)号：CN116083409A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202310160691.0
申请日：2023-02-23
Applicant: 江南大学 , 中国科学院天津工业生物技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种酮糖3‑差向异构酶固定化酶的制备方法及其应用，属于固定化酶制备技术领域，本发明分为以下步骤：第一步，对阴离子交换树脂进行预处理；第二步，离子交换树脂吸附蛋白酶；第三步，加入戊二醛进行交联。本发明制备的固定化酶制备简单，价格低廉，反应条件简单温和。固定化提高了酶的相对活性和稳定性，制备得到的固定化酶结合牢靠，可进行多次酶催化反应。这一发现对于工业化制备D‑阿洛酮糖具有重要的研究价值。
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公开(公告)号：CN115960879A
公开(公告)日：2023-04-14
申请号：CN202310086878.0
申请日：2023-01-30
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/90 , C12N15/61 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/24 , C12P19/02 , C12Q1/533 , G01N21/35 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体文库的高通量筛选方法及获得的突变体，属于酶工程技术领域。本发明所提供的高通量筛选方法是基于在酸性Si(IV)–Mo(Ⅵ)显色液中，D‑果糖可将黄色钼酸盐Mo(Ⅵ)还原，生成蓝色钼酸盐Mo(V/Ⅵ)，其颜色深浅在一定范围内与D‑果糖的含量成正比，且在相同浓度水平下，D‑阿洛酮糖不会干扰D‑果糖的测定。同时，本发明还提供了D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶四点突变体，与该酶野生型相比，其在60℃下孵育1h后的残余酶活提升69.8％，最适温度提高5℃，在60℃下的半衰期值由0.64h增加到7.30h，因此其工业应用潜力得到明显提升。
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公开(公告)号：CN113308449B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202110701935.2
申请日：2021-06-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了热稳定性提高的玉米赤霉烯酮内酯水解酶的突变体S162P及其应用，属于酶工程技术领域。本发明将来源于微生物GliocladiumroseumMA918的玉米赤霉烯酮内酯水解酶酶作为亲本，利用基因突变技术，将162位的丝氨酸(S)突变为脯氨酸(P)，获得单点突变体S162P。与野生酶相比，在原始催化活力未发生明显变化的基础上，突变体酶的热稳定性显著提升：突变体酶在50℃保温2min后残余酶活提高为野生酶的1.52倍；在48℃分别保温10min和20min后，仍具有约80％和58％的残余酶活，在48℃的半衰期也提高为野生酶的3.6倍。为实现ZEN内酯水解酶的工业化应用打下了一定的基础。
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公开(公告)号：CN113215125B
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202110615300.0
申请日：2021-06-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性和酶活提高的菊糖蔗糖酶突变体，属于酶的基因工程技术领域。本发明将来源于微生物Lactobacillus gasseri DSM 20604的菊糖蔗糖酶的截断酶作为亲本，构建了四点突变体酶A310E/S346A/I478M/A491S(简称M4)，并进一步截断N‑端33个氨基酸的突变体M4N‑33。M4N‑33在55℃的半衰期由原来的不足5min提高到大约10h，熔融温度由原来的55.00℃提高到61.27℃，最适反应温度由原来的55℃提高到60℃，在最适催化条件下的酶活提高了52％。这一发现对于工业化制备微生物菊糖及转糖苷酶的工业化应用有重要的研究价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117965474A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202410022352.0
申请日：2024-01-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种呕吐毒素生物降解酶突变体及其应用，属于蛋白质工程技术领域。本发明将真菌毒素DON降解酶的第140位丙氨酸突变为精氨酸，得到了热稳定性提高的突变体。所述突变体45℃孵育6h后残余酶活提高为原始酶的1.58倍，50℃孵育60min后残余酶活较原始酶提高了1.49倍。45℃下的半衰期由野生型的1.926h提高为突变体的4.521h，提高了2.35倍；50℃下半衰期由野生型的17.91min提高为突变体的45.62min，提高了2.55倍。在90min内，可以完全降解100μM DON，具有极大的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN117448298A
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202311331641.0
申请日：2023-10-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的红霉素酯酶突变体D245P及其应用，属于酶工程技术领域。本发明通过将来源于霍氏肠杆菌(Enterobacter hormaechei)的红霉素酯酶进行分子改造，将其第245位天冬氨酸突变为脯氨酸，获得红霉素酯酶突变体。突变体相较于野生酶，比酶活力提升至野生酶的3.03倍、40℃下的半衰期提高至野生酶的10.75倍，30min内对红霉素和克拉红霉素的降解效率分别为100％和22.4％，较野生酶分别提高了13.41％，4.21％。显示出了良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN116376887A
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202310155281.7
申请日：2023-02-22
Applicant: 江南大学 , 中国科学院天津工业生物技术研究所
IPC: C12N9/90 , A23L33/125 , A21D2/18 , A21D13/062 , C12N15/61 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K38/52 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种高酶活D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体及其应用，属于酶的基因工程技术领域。本发明以来源于Thermoclostridium caenicola的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶作为亲本，利用基因突变技术，将第258位的半胱氨酸突变为组氨酸，获得单点突变体C258H，其酶活得到了提高，由野生型酶的242.4U/mg提高到387.8U/mg，增加了60.0％。这一发现对于工业化制备D‑阿洛酮糖具有重要的研究价值。
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公开(公告)号：CN115960875A
公开(公告)日：2023-04-14
申请号：CN202211326490.5
申请日：2022-10-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的褐藻胶裂解酶的突变体酶，属于酶的基因工程技术领域。本发明提供的突变体酶是将来源于Paenibacillussp.YN15的褐藻胶裂解酶的第48位的赖氨酸突变为脯氨酸，第106位的酪氨酸突变为甘氨酸，第172位的丝氨酸突变为缬氨酸，第190位的丝氨酸突变为甘氨酸。突变体酶的热稳定性和结构稳定性得到了提高：55℃下保持8h酶活仍能坚持60％以上。多点突变体的最适温度上升到65‑70℃，与野生型酶相比提高了10℃以上。在最适催化条件下，酶催化底物海藻酸钠生产褐藻寡糖的相对酶活无明显下降，具有重要的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN115369106A
公开(公告)日：2022-11-22
申请号：CN202211141161.3
申请日：2022-09-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种有效提高玉米赤霉烯酮内酯水解酶耐酸稳定性的固定化方法及应用，属于生物技术领域。本发明使用注射凝胶法将ZEN水解酶封装在基于卡拉胶钾的水凝胶珠中，酶的酸稳定性通过与碱性缓冲剂Mg(OH)2的共同封装得以提高。本发明所获得的Mg(OH)2缓冲液在中性条件下是不溶的，但当氢离子扩散到水凝胶珠中时会溶解，从而确保中性的内部pH值。采用含有Mg(OH)2缓冲剂的水凝胶珠共封装体系使得ZEN水解酶在酸性环境中的稳定性得到改善，适用于酸敏感酶的ZEN水解酶食品级递送系统，具有工业应用的潜力。
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