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公开(公告)号:CN113308446A
公开(公告)日:2021-08-27
申请号:CN202110573135.7
申请日:2021-05-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种海藻糖转化率提高的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体及其应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体是通过将麦芽寡糖基海藻糖合成酶的氨基酸第47位点进行突变,得到了与亲本麦芽寡糖基海藻糖合成酶海藻糖转化率更高的突变体。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶S47P、S47Q、S47D、S47V、S47L、S47N和S47A的海藻糖转化率得到提高,相对野生型分别提高0.9%、1.0%、1.6%、2.1%、3.3%、6.0%和8.0%。
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公开(公告)号:CN112980762A
公开(公告)日:2021-06-18
申请号:CN202110264847.0
申请日:2021-03-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种黑曲霉二糖磷酸化酶及其在黑曲霉二糖制备中的应用,属于基因工程和酶工程领域。本发明提供了提供一种新型黑曲霉二糖磷酸化酶AmNP及其高效表达方法。由化学法合成编码来源于运动厌氧孢杆菌(Anaerosporobacter mobilis DSM 15930)的黑曲霉二糖磷酸化酶AmNP的核苷酸序列,以穿梭质粒pBSMμL3为表达载体,以Bacillus subtilisWSH11为表达宿主,实现了黑曲霉二糖磷酸化酶AmNP基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达。黑曲霉二糖磷酸化酶AmNP与麦芽糖磷酸化酶LbMP协同反应可催化麦芽糖转化生成黑曲霉二糖,产率达到最高为67.75%,黑曲霉二糖的产量能达到338.75g/L,为目前已报道黑曲霉二糖酶法制备的最高产量。因此此酶适合食品、医药等工业应用的需要,能由于黑曲霉二糖的工业化生产。
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公开(公告)号:CN112094781A
公开(公告)日:2020-12-18
申请号:CN202011031718.9
申请日:2020-09-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株解淀粉芽孢杆菌及其应用,属于生物技术领域。本发明提供了一株产胞外蛋白能力强的解淀粉芽孢杆菌WS;将此菌株接种至发酵培养基中发酵48h,即可使发酵上清中蛋白的表达量高达0.6mg/mL,比现有模式菌株B.amyloliquefaciens DSM7高0.2~0.3mg/mL;将以此菌株为宿主表达编码麦芽三糖淀粉酶的基因构建得到的重组菌接种至发酵培养基中发酵48h,即可使发酵上清中麦芽三糖淀粉酶的酶活高达155.28U/mL;将以此菌株为宿主表达编码普鲁兰酶的基因构建得到的重组菌接种至发酵培养基中发酵72h,即可使发酵上清中普鲁兰酶的酶活高达5.66U/mL。
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公开(公告)号:CN111500479A
公开(公告)日:2020-08-07
申请号:CN202010353981.3
申请日:2020-04-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种非甲醇诱导双启动子毕赤酵母工程菌的构建及其应用,属于基因工程领域。本发明将Streptomyces sp.FA1来源木聚糖酶(XynA)基因的游离型质粒转入到含有整合型表达载体的毕赤酵母中,获得游离型和整合型组合双启动子模式毕赤酵母菌株,使其分泌木聚糖酶,在发酵过程中不需要添加甲醇,生产方法更加安全、无污染。所述工程菌发酵产酶可达3925U/mL,极大提高了木聚糖酶的生产活力,从而适用于工业化木聚糖的生产。
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公开(公告)号:CN119120525A
公开(公告)日:2024-12-13
申请号:CN202411271476.9
申请日:2024-09-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种D‑甘露糖2‑差向异构酶在D‑甘露糖制备中的应用,属于基因工程和酶工程领域。本发明将来源于Bacteroidetes bacterium的D‑甘露糖2‑差向异构酶BbME的基因在E.coli BL21(DE3)中表达,并将所述D‑甘露糖2‑差向异构酶应用于以D‑葡萄糖为底物的反应体系中,在pH 8.0,50℃下进行酶反应,反应48h的D‑甘露糖的产量达到141.05g/L。本发明还将所述重组菌进行高密度发酵,并将菌体细胞破壁后的粗酶液加入至1.5L大反应体系中,反应48h后D‑甘露糖的产量可达到125.35g/L,可实现D‑甘露糖的工业化生产。
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公开(公告)号:CN118147028A
公开(公告)日:2024-06-07
申请号:CN202410264581.3
申请日:2024-03-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种中温高活性糖原磷酸化酶及其应用,属于基因工程和酶工程领域。本发明以质粒pET‑20b(+)为表达载体,以Escherichia coli BL21为表达宿主,实现了来源于Thermotoga sp.SG1的α‑1,4‑糖原磷酸化酶在大肠杆菌中的表达。本发明还提供了将α‑1,4‑糖原磷酸化酶ThαGP在中温条件下催化生产α‑D‑葡萄‑1‑磷酸的方法,可获得更高的产量,可用于食品、医药等领域的工业化生产。
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公开(公告)号:CN117821314A
公开(公告)日:2024-04-05
申请号:CN202311836478.3
申请日:2023-12-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了聚乙烯塑料降解菌筛选方法及应用,属于微生物领域。本发明提供了聚乙烯塑料降解菌的筛选方法,并成功筛选获得了2株具有聚乙烯降解能力的菌株。及其分离筛选方法和在聚乙烯塑料生物降解方面的应用。所获菌株具有良好的环境适应性,对聚乙烯塑料,尤其是聚乙烯塑料薄膜的生物降解方面具有很广泛的应用,为聚乙烯塑料的生物降解提供了新资源,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN117660428A
公开(公告)日:2024-03-08
申请号:CN202311587683.0
申请日:2023-11-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了纤维二糖2‑差向异构酶突变体及其在制备甘露糖中的应用,属于酶工程技术领域。本发明通过定点突变构建获得转化率提高的纤维二糖2‑差向异构酶突变体E174A/L187M/R300K,其催化效率较野生型提高了50%(0.0042vs 0.0028L·g‑1·s‑1),在75℃下半衰期是野生型的1.6倍(61.89vs 38.51min)。在目前条件下,制备甘露糖的产率为21.04%,较野生型的15.67%提高了34.27%。
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公开(公告)号:CN117402866A
公开(公告)日:2024-01-16
申请号:CN202311620368.3
申请日:2023-11-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种L‑阿拉伯糖异构酶突变体在制备D‑塔格糖中的应用,属于酶工程技术领域。本发明通过定点突变和叠加组合构建获得对乳糖转化率显著提高的L‑阿拉伯糖异构酶系列单点突变体,然后将它们进行叠加组合突变,获得了催化效率提高的组合突变Y19E/F279I。对其D‑塔格糖的制备条件进行了优化,在55℃,pH 6.0,500g·L‑1乳糖浓度,加酶量1.0mg·mL‑1,并含Mn2+与Co2+的条件下,转化率可达23.01%,较野生型的14.56%大幅提高,具有较好的工业化应用潜力。
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公开(公告)号:CN111500479B
公开(公告)日:2022-12-27
申请号:CN202010353981.3
申请日:2020-04-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种非甲醇诱导双启动子毕赤酵母工程菌的构建及其应用,属于基因工程领域。本发明将Streptomyces sp.FA1来源木聚糖酶(XynA)基因的游离型质粒转入到含有整合型表达载体的毕赤酵母中,获得游离型和整合型组合双启动子模式毕赤酵母菌株,使其分泌木聚糖酶,在发酵过程中不需要添加甲醇,生产方法更加安全、无污染。所述工程菌发酵产酶可达3925U/mL,极大提高了木聚糖酶的生产活力,从而适用于工业化木聚糖的生产。
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