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公开(公告)号：CN112442474B
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN202011449726.5
申请日：2020-12-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种(‑)γ‑内酰胺的制备方法，属于生物工程技术领域。本发明的(+)γ‑内酰胺酶来源于尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)，可作为催化剂用于制备光学纯(‑)γ‑内酰胺。其稳定性好、立体选择性强、适用的反应条件温和、对环境友好，并且全细胞催化避免了破碎离心等繁琐步骤，操作更简单，具有很好的应用开发前景。
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公开(公告)号：CN110982799B
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN201911175255.0
申请日：2019-11-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种醇脱氢酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的醇脱氢酶突变体热稳定性高且不对称还原潜手性双芳基酮生产手性双芳基醇的催化效率和转化效率(即时空产率)高，因此，本发明的醇脱氢酶突变体在生产如(S)‑(4‑氯苯基)‑(吡啶‑2‑基)‑甲醇、(R)‑(4‑氯苯基)‑(吡啶‑2‑基)‑甲醇等的手性双芳基醇中具有极高的应用前景。
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公开(公告)号：CN112410312A
公开(公告)日：2021-02-26
申请号：CN202011353623.9
申请日：2020-11-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种环己酮单加氧酶及其应用，属于生物工程技术领域。本发明的环己酮单加氧酶来源于嗜甲基拟无枝酸菌(Amycolatopsismethanolica)，可作为催化剂用于硫醚的高效合成。能够给以环酮、线性酮等硫醚为底物，能耐受高浓度底物、催化活性高、立体选择性强、适用的反应条件温和、对环境友好，具有很好的应用开发前景。
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公开(公告)号：CN110982799A
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201911175255.0
申请日：2019-11-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种醇脱氢酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的醇脱氢酶突变体热稳定性高且不对称还原潜手性双芳基酮生产手性双芳基醇的催化效率和转化效率(即时空产率)高，因此，本发明的醇脱氢酶突变体在生产如(S)-(4-氯苯基)-(吡啶-2-基)-甲醇、(R)-(4-氯苯基)-(吡啶-2-基)-甲醇等的手性双芳基醇中具有极高的应用前景。
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公开(公告)号：CN110777125A
公开(公告)日：2020-02-11
申请号：CN201911120248.0
申请日：2019-11-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种杂环类药物中间体的高效制备方法。本发明以醇脱氢酶突变体和葡萄糖脱氢酶偶联催化杂环类底物生成杂环类药物中间体，所述的醇脱氢酶突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的醇脱氢酶母本的127位的酪氨酸突变为色氨酸。本发明的突变体Y127W在不加任何助溶剂的单水相体系可以减轻产物抑制效应使转化率在12h内达到99％以上。将突变体Y127W与葡萄糖脱氢酶(BmGDH)偶联，在不添加任何外源辅酶和有机助溶剂的单水相体系，实现了50mL规模，底物浓度高达600g·L-1的克级制备，催化剂载量为3.3％。终产物(S)-NBHP的e.e.值高达到99.4％，时空产率约为1400g·L-1·d-1，产品纯度为99.58％。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109402076A
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201811277370.4
申请日：2018-10-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种醇脱氢酶突变体及其在辅酶再生中的应用，属于酶工程以及生物工程技术领域。本发明的醇脱氢酶突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的醇脱氢酶的第84位缬氨酸和/或第127位酪氨酸进行突变得到的；此醇脱氢酶突变体对多种醇类辅底物(如1,4-丁二醇、1,5-戊二醇、1,6-己二醇)均具有较高的活力，可以催化这些醇类辅底物进行辅酶NADPH再生；且与野生型醇脱氢酶KpADH相比，其活性、催化效率更高，对辅底物1,4-丁二醇的kcat值最高可达75.9min-1，是野生型KpADH的7.3倍，kcat/Km值可达2009min–1·M–1，是野生型KpADH的14.7倍，Km值最低可为11.3mM，较野生型醇脱氢酶KpADH有了显著的降低，因此，本发明的醇脱氢酶突变体具有更高的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN108504641A
公开(公告)日：2018-09-07
申请号：CN201810146463.7
申请日：2018-02-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了醇脱氢酶突变体及其在双芳基手性醇合成中的应用，属于生物工程技术领域。本发明的醇脱氢酶突变体具有优良的催化活性和立体选择性，可高效催化制备一系列R-和S-构型的手性双芳基醇。将本发明的所述的醇脱氢酶与葡萄糖脱氢酶或甲酸脱氢酶进行偶联，可用于多种抗组胺药物手性双芳基醇中间体的合成。与现有报道相比，本发明的醇脱氢酶不对称催化还原制备双芳基手性醇的方法具有操作简便、底物浓度高、反应完全、产品纯度高的优势，具有很强的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN108384765A
公开(公告)日：2018-08-10
申请号：CN201810145970.9
申请日：2018-02-12
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/0006 , C12P17/12
Abstract: 本发明公开了醇脱氢酶突变体及其在双芳基手性醇合成中的应用，属于生物工程技术领域。本发明的醇脱氢酶突变体具有优良的催化活性和立体选择性，可高效催化制备一系列R-和S-构型的手性双芳基醇。将本发明的所述的醇脱氢酶与葡萄糖脱氢酶或甲酸脱氢酶进行偶联，可用于多种抗组胺药物手性双芳基醇中间体的合成。与现有报道相比，本发明的醇脱氢酶不对称催化还原制备双芳基手性醇的方法具有操作简便、底物浓度高、反应完全、产品纯度高的优势，具有很强的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN106047985A
公开(公告)日：2016-10-26
申请号：CN201610374447.4
申请日：2016-05-31
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12Q1/32 , C12Q1/02 , C12Q2304/00 , C12Q2326/00
Abstract: 本发明涉及一种醇脱氢酶的高通量筛选方法。提供了一种利用脂肪族或芳基取代的酮与2,4‑二硝基苯肼在碱性条件下进行显色反应，并在96孔板中建立了针对脂肪族或芳基取代的酮醇脱氢酶的高通量筛选方法。本发明使用深孔板进行微型化细胞培养，不需要对细胞进行破壁处理，突破了传统通过检测额外添加的昂贵辅酶NAD(P)H吸光度变化的筛选方式，具有成本低廉，操作简便，反应灵敏，检测准确，对设备要求低，通用性强的特点，能够快速对检测整细胞样品中醇脱氢酶的活性和反应转化率进行测定。
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公开(公告)号：CN118207262A
公开(公告)日：2024-06-18
申请号：CN202410062638.1
申请日：2024-01-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种醛脱氢酶及其在制备芳香羧酸中的应用，具体地，采用含有醛脱氢酶的催化体系催化芳香醛底物转化为芳香羧酸，醛脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该酶底物谱较广，对多种芳香醛的转化率高达99％以上，且热稳定性良好，进一步对催化体系进行优化，发现以NAD+为辅酶、以pH 6.5柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲液为反应介质构成反应体系时，向体系中添加适量钾离子后酶活进一步提高，采用丁香醛为底物测定酶活为5.68U/mg，达到未添加钾离子时酶活的6倍左右。本发明为芳香羧酸的生物制备提供了一种催化活性高、区域选择性强、环境友好的方法，适用于工业生产。
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