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公开(公告)号：CN112430652A
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN202011354422.0
申请日：2020-11-27
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种实时荧光绝对定量检测家禽干扰素刺激因子的试剂盒、检测方法及应用。本发明实时荧光绝对定量检测家禽干扰素刺激因子的试剂盒，包含：上游引物、下游引物以及Taq Man探针。本发明提供利用上述的试剂盒检测家禽干扰素刺激因子的方法，包括：将标准品模板和待测样品DNA模板分别置于各自的反应体系中，并同时置入PCR仪进行扩增，扩增完毕后由PCR仪自动得出检测结果；检测结束后，根据噪音情况设定和调整基线及阈值并利用随机软件进行分析，建立标准曲线，根据荧光曲线和Ct值判断结果。本发明检测方法及试剂盒具有高灵敏度及相对的高特异性，而且可以精确定量检测标本中家禽干扰素刺激因子的mRNA表达量。
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公开(公告)号：CN111217916A
公开(公告)日：2020-06-02
申请号：CN202010039900.2
申请日：2020-01-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/866 , C12N7/01 , A61K39/295 , A61K39/215 , A61K39/225 , A61K39/15 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及猪三种致腹泻病毒中和抗原表位融合蛋白重构体及其制备方法和应用。所述猪三种致腹泻病毒PEDV、TGEV、PoRV的中和抗原表位融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。编码该中和抗原表位融合蛋白的基因序列如SEQ ID NO.1所示。本发明分别选取PEDV、TGEV、PoRV的主要中和抗原表位基因并进行拼接，而后通过重组杆状病毒真核表达系统对串联基因进行融合蛋白表达。将表达串联基因融合蛋白的重组病毒通过腹腔注射的方式免疫小鼠，可诱导机体产生免疫应答，具有较强的免疫原性。本发明为预防PEDV、TGEV、PoRV感染提供了一种新的方法，也为猪腹泻病毒新型疫苗的开发奠定了基础。
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公开(公告)号：CN102924577B
公开(公告)日：2014-03-26
申请号：CN201210494560.8
申请日：2012-11-28
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了鸡高迁移率族蛋白B1（chHMGB1）抗原多肽和抗chHMGB1的单克隆抗体。该chHMGB1抗原多肽序列为VDAGKKVVAKAEKSKK。以该抗原多肽为免疫原免疫Balb/c小鼠，筛选得到一株杂交瘤细胞株2G1，保藏编号为CGMCCNo.6708。该细胞株能够持续稳定地分泌抗chHMGB1的单克隆抗体。该单克隆抗体不仅能够与融合蛋白表达的chHMGB1反应，而且能够与禽类巨噬细胞系HD11和CEF、DF1细胞中天然的chHMGB1特异性反应；该抗体还可以用于细胞刺激后培养上清中chHMGB1的分析，因此可用于对chHMGB1分子生物学功能的深入研究。
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公开(公告)号：CN103163299A
公开(公告)日：2013-06-19
申请号：CN201310046928.9
申请日：2013-02-05
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/577
Abstract: 本发明提供了一种禽白血病双抗体夹心ELISA抗原检测试剂盒，其中包括：包被抗ALVp27蛋白单克隆抗体的酶标板、酶标记抗ALVp27蛋白单克隆抗体等。捕获抗体和检测抗体分别针对p27蛋白不同的抗原决定簇；包被在酶标板的抗ALVp27蛋白单克隆抗体由杂交瘤细胞株ALVP27-5D3分泌获得，酶标记抗ALVp27蛋白单克隆抗体由杂交瘤细胞株ALVP27-4F12分泌获得。本发明试剂盒操作简便、快速，可以用于ALV所有亚群病毒的检测，适用于基层各级兽医部门和出入境禽白血病的快速大量筛选检测。该方法所需成本低廉，经济效益显著、应用前景广泛。
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公开(公告)号：CN101957375B
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201010295008.7
申请日：2010-10-15
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/558 , G01N27/02 , G01N27/30
Abstract: 本发明涉及呋喃它酮残留物无标记的阻抗型免疫传感器，及其制备方法和应用，所说的该传感器通过金胶制备、金电极的预处理、1，4-苯二硫醇修饰金电极、单层纳米金胶的自组装和抗体的固定5个步骤而制得。其特征在于是将纳米金通过自组装方法固定于金电极表面，用来固定呋喃它酮残留物的单克隆抗体而构建得到。使用时，先建立阻抗的相对变化率%△Rct与AMOZ浓度的关系，再根据待测样品的阻抗相对变化率%△Rct就可确定其AMOZ浓度。采用本发明的传感器和检测方法具有快速简便的特点，解决当前呋喃它酮残留检测操作费时的缺陷。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1657616A
公开(公告)日：2005-08-24
申请号：CN200510038289.7
申请日：2005-01-25
Applicant: 扬州大学
Abstract: 高抗病毒活性重组鸡γ－干扰素的制取方法及用途，涉及一种广谱高效抗病毒基因工程产品的制取方法。将ChIFN－γ基因从真核质粒中经双酶切后克隆到转移载体中，获得重组转移质粒pFASTBAC1－ChIFN－γ；取DH10Bac感受态细胞，加入1ng pFASTBAC1－ChIFN－γ，转座后，用SOC培养基稀释培养物，涂布Luria平板，培养后，挑取白色菌落，Luria平板进行纯化，阳性质粒命名为Bacmid－ChIFN－γ，提取阳性质粒DNA；取上述重组DNA质粒转染Sf9细胞，制得高抗病毒活性重组鸡γ－干扰素。本发明还在于将该干扰素用于抑制MDV GA对CEF的致病变作用、抑制NDV F48E8在细胞上的增殖、抗AIV(H5N1)病毒对细胞的致病作用。
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公开(公告)号：CN1437023A
公开(公告)日：2003-08-20
申请号：CN03113002.X
申请日：2003-03-20
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/53 , G01N33/535 , G01N33/573 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于禽病毒检测诊断技术领域。J亚群禽白血病病毒(ALV－J)是90年代鉴定出的一个新的禽白血病病毒亚群，是肉鸡髓细胞瘤(ML)的病原。本发明用PCR方法扩增出ALV－J囊膜蛋白env基因，并进行克隆，然后用昆虫杆状病毒表达系统表达ALV－J env基因产物，以此重组基因产物作为免疫源免疫BALB/C小鼠，研制出特异性单克隆抗体。再以单克隆抗体研制出了独特酶联免疫试验检测试剂盒，以其检测感染鸡血清、脏器及羽囊中抗原抗体复合物，判定是否感染ALV－J。
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公开(公告)号：CN112760320B
公开(公告)日：2023-11-28
申请号：CN202011394290.4
申请日：2020-12-02
Applicant: 扬州大学
Inventor： 金文杰 , 朱亭帆 , 钱金涵 , 沈子君 , 秦爱建 , 邵红霞 , 钱琨 , 叶建强 , 刘金彪 , 王倩倩 , 王建 , 王姣 , 柴文娴 , 周小兵 , 邓建中 , 郑建高
IPC: C12N15/113 , C12N5/10 , A61K31/713 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于基因工程和生物制品研究领域，具体涉及有效抑制猪流行性腹泻病毒(PEDV)复制的外源性人工miRNA，所述外源性人工miRNA是下述1)或2)的双链核苷酸：1)正义链和反义链的序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；2)正义链和反义链的序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。与针对PEDV蛋白编码基因的siRNA相比，本发明筛选的针对病毒N基因保守序列的人工miRNA能抑制PEDV复制，不仅可作为抗PEDV的新型生物制剂进行开发，而且可用于抗病猪品系培育。
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公开(公告)号：CN116359496A
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202211601049.3
申请日：2022-12-12
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/535 , G01N33/58 , C12N15/70 , C12N15/34 , C07K16/08 , C12N5/20
Abstract: 一种基于Fiber‑2蛋白检测鸭3型腺病毒的双抗体夹心ELISA，包括:1)包被抗体：鸭3型腺病毒Fiber‑2蛋白的单克隆抗体，即捕获抗原的抗体；2)酶标二抗：酶标的鸭3型腺病毒Fiber‑2蛋白的单克隆抗体，即检测抗体；其中，包被抗体与酶标二抗是针对鸭3型腺病毒Fiber‑2蛋白的同一株单克隆抗体，由杂交瘤细胞株DAdV‑3‑Fiber‑2‑3D9分泌获得。通过本发明，建立的鸭3型腺病毒夹心ELISA检测方法快速、稳定、特异性高，使用本发明只需采集泄殖腔分泌物或其它含有鸭3型腺病毒的样品，即可快速准确地检测样品中是否含有鸭3型腺病毒。本发明适合应用于鸭群是否感染鸭3型腺病毒的大批量检测。
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公开(公告)号：CN110456051B
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN201910788083.8
申请日：2019-08-26
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N27/327 , G01N27/02 , C01G39/06 , C01B32/184 , B82Y30/00 , B82Y15/00 , B22F9/24 , B22F1/054
Abstract: 本发明涉及猪流行性腹泻病毒无标记的阻抗型免疫传感器及其制备方法。所述猪流行性腹泻病毒无标记的阻抗型免疫传感器，是将猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体PEDV‑2C11固定于纳米金/二硫化钼/还原石墨烯复合纳米材料修饰的电极表面而构建制得。本发明通过合成纳米金/二硫化钼/还原石墨烯(AuNPs/MoS2/rGO)复合材料来制备免疫传感器，该传感器制备过程更加简便，同时通过事先将纳米金与二硫化钼/还原石墨烯构建复合材料，可维持纳米金在复合材料中的含量保持稳定，同时由于复合纳米材料中可能增加了吸附的的纳米金从而有效地增大了抗体在电极表面的固定量，可提高免疫传感器检测的灵敏度。
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