用于双重PCR检测猪Foxp3、IL-10基因的引物、试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN110042166A

    公开(公告)日:2019-07-23

    申请号:CN201910285056.9

    申请日:2019-04-10

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及用于双重PCR检测猪Foxp3、IL-10基因的引物、试剂盒及其应用。用于双重PCR检测猪Foxp3、IL-10基因的引物组,由核苷酸序列如SEQ ID NO.1,2,5和6所示的引物组成。用于猪Foxp3、IL-10基因的TaqMan实时荧光定量PCR检测的试剂,包含所述引物组以及核苷酸序列如SEQ ID NO.7和8所示的荧光探针。本发明的试剂和方法具有检测快速、敏感性高、特异性好、检测结果稳定可靠的优点,可实现对大规模样品的快速定量检测,对于评价猪体的免疫应答水平和免疫稳态具有重要意义。

    一种快速筛选鉴定猪链球菌的方法

    公开(公告)号:CN105063172B

    公开(公告)日:2018-01-26

    申请号:CN201510459749.7

    申请日:2015-07-30

    Abstract: 本发明涉及一种生物化学和分子生物学相结合快速筛选鉴定猪链球菌的方法,该方法分成两部分组装完成。首先利用自然界中链球菌属触酶试验阴性的特点,在30秒内即可快速排除触酶阳性的待测菌株,然后使用设计猪链球菌特异性引物,对待测菌株进行PCR检测。本发明综合利用生物化学和分子生物学相结合的优势,相比于国内外现行的检测方法,开展大规模的临床病原菌筛选鉴定时,能够节约50%以上的人工时,能够满足众多检测领域要求,在未来快速诊断检测领域会有好的应用前景。

    一种大肠杆菌O26、O45、O121血清型三重PCR检测试剂盒及其引物组

    公开(公告)号:CN105821124A

    公开(公告)日:2016-08-03

    申请号:CN201610208130.3

    申请日:2016-04-06

    CPC classification number: C12Q1/689 C12Q2600/16

    Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌O26、O45、O121血清型检测试剂盒及其检测方法。本发明所述试剂盒3对引物组能在同一反应体系能进行有效扩增。实验表明,本发明所述含该引物组的检测试剂盒及其检测方法具有快速、敏感、特异、成本低和操作简单的特点,能较好的弥补当前大肠杆菌O26、O45、O121血清分型检测方法上的不足,可以满足当前大肠杆菌O26、O45 O121血清型分型的检测需求,易于大范围推广应用,适用于食源性致病菌的初筛选,具有广阔的市场前景和较大的经济效益。

    鉴别鸭坦布苏病毒感染动物和灭活苗免疫动物的ELISA检测试剂盒

    公开(公告)号:CN105445458A

    公开(公告)日:2016-03-30

    申请号:CN201510776242.4

    申请日:2015-11-13

    CPC classification number: G01N33/56983

    Abstract: 本发明公开了一种鉴别鸭坦布苏病毒感染动物和灭活苗免疫动物的ELISA检测试剂盒及其检测方法,属于检测试剂盒领域。本发明的试剂盒包括:鸭坦布苏病毒E重组蛋白包被酶标板、NS1重组蛋白包被酶标板、标准阳性对照血清、标准阴性对照血清、兔抗鸭酶标二抗、样品稀释液、浓缩洗液、TMB底物显色液和终止液。可对动物血清中的坦布苏病毒感染情况进行早期诊断,可做到早发现、早防控。同时使用E-ELISA和NS1-ELISA检测方法进行血清学调查,即可区别野毒感染动物和灭活疫苗免疫动物,根据血清学调查结果制定相应的防控策略,通过淘汰或诊治,逐步减少野毒感染动物数量,达到最终净化该病的目的。

    一种牛睾丸细胞系及其建立方法和应用

    公开(公告)号:CN103849602B

    公开(公告)日:2016-02-10

    申请号:CN201310285025.6

    申请日:2013-07-08

    Abstract: 本发明提供了一种牛睾丸细胞系。本发明还提供了该细胞系的建立方法,主要步骤为:(1)原代培养:无菌获取初生犊牛睾丸,清除粘附组织,采用胰酶消化法分离获得高活力的牛睾丸细胞;将分离得到的高活力的牛睾丸细胞培养于DMEM培养基中,置于37℃,5%CO2条件下培养,得原代牛睾丸细胞;(2)转染和筛选:提取纯化含有hTERT基因的真核表达质粒pCI-neo-hTERT,采用脂质体转染法,将提取纯化的真核表达质粒pCI-neo-hTERT导入步骤(1)原代培养的牛睾丸细胞进行转染;(3)筛选和扩大培养。本发明牛睾丸细胞易于培养,生长速度较快,能稳定传代,细胞活率高、纯度高且能很好保藏;本发明方法操作简便,便于推广应用。本细胞系可应用于生产猪瘟疫苗、羊痘、羊口疮疫苗等。

    一种用于病毒分离培养和增殖的细胞株

    公开(公告)号:CN105154387A

    公开(公告)日:2015-12-16

    申请号:CN201410845453.4

    申请日:2014-12-31

    Abstract: 本发明属于畜牧类生物技术领域,更具体的讲是一种用于病毒培养和增殖的细胞株,细胞株为非洲绿猴肾细胞系VeroB10株,其保藏编号为:CGMCC No.9705,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日期为2014年09月24日,本发明的有益效果是:该非洲绿猴肾细胞系VeroB10在接种山羊痘病毒AV 41株等病毒后,细胞分别出现了不同特征的病变,非洲绿猴肾细胞系VeroB10株较之Vero母细胞更有利于四种病毒的复制与增殖,因此,采用该细胞株进行病毒分离增殖培养有利于开展有关病毒的病原研究与疫苗防制,而且细胞株对于多种畜禽病毒敏感且稳定,并能持续稳定增殖,该细胞株无支原体、细菌、真菌、外源病毒的污染,并且不存在致瘤风险,安全性高具有广阔的开发和应用前景。

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