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公开(公告)号：CN114539379B
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202210214020.3
申请日：2022-03-03
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
IPC: C07K14/465 , C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/113 , A61K39/12
Abstract: 本发明公开了鸡AQP1突变型基因，突变型蛋白、该基因突变细胞系及其在细胞悬浮培养中的应用。本发明还公开了AQP1突变型细胞系的制备方法。本发明通过敲除了鸡胚成纤维细胞系DF‑1细胞AQP1蛋白第一个跨膜区后间隔序列，获得的AQP1突变型细胞系更易于悬浮驯化，且遗传性状稳定，不具有致瘤性，增殖病毒能力不受影响，应用到家禽病毒疫苗生产中，替代固相培养的疫苗生产工艺，可大幅度提高生产效率。
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公开(公告)号：CN105154387A
公开(公告)日：2015-12-16
申请号：CN201410845453.4
申请日：2014-12-31
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明属于畜牧类生物技术领域，更具体的讲是一种用于病毒培养和增殖的细胞株，细胞株为非洲绿猴肾细胞系VeroB10株,其保藏编号为:CGMCC No.9705,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2014年09月24日，本发明的有益效果是：该非洲绿猴肾细胞系VeroB10在接种山羊痘病毒AV 41株等病毒后，细胞分别出现了不同特征的病变，非洲绿猴肾细胞系VeroB10株较之Vero母细胞更有利于四种病毒的复制与增殖，因此，采用该细胞株进行病毒分离增殖培养有利于开展有关病毒的病原研究与疫苗防制，而且细胞株对于多种畜禽病毒敏感且稳定，并能持续稳定增殖，该细胞株无支原体、细菌、真菌、外源病毒的污染，并且不存在致瘤风险，安全性高具有广阔的开发和应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111849990B
公开(公告)日：2022-06-21
申请号：CN202010770696.1
申请日：2020-08-03
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/63 , C12N15/90 , C12N15/39 , C12N7/01 , C07K14/065 , C12Q1/70 , C12Q1/686 , G01N33/569 , A61K39/275 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种gRNA，所述gRNA序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示，本发明还公开了重组质粒、ORF016基因缺失型山羊痘病毒株及其制备方法和应用。本发明首次通过基因敲除方法获得了ORF016基因缺失型山羊痘病毒株，该方法是首次将CRISPR技术在山羊痘病毒中进行应用，同时本发明采用了反向转染方法对ORF016基因进行了敲除，该方法的敲除效率达到了31.6%，远远高于现有技术中的敲除效率。同时，本发明所获得的SDLVDUORF016毒株是一株仅缺失ORF016的毒株，基因的缺失对其生长特性没有影响，该毒株可用于山羊痘疫苗、检测试剂、山羊痘病毒鉴定等用途。
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公开(公告)号：CN114539379A
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202210214020.3
申请日：2022-03-03
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
IPC: C07K14/465 , C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/113 , A61K39/12
Abstract: 本发明公开了鸡AQP1突变型基因，突变型蛋白、该基因突变细胞系及其在细胞悬浮培养中的应用。本发明还公开了AQP1突变型细胞系的制备方法。本发明通过敲除了鸡胚成纤维细胞系DF‑1细胞AQP1蛋白第一个跨膜区后间隔序列，获得的AQP1突变型细胞系更易于悬浮驯化，且遗传性状稳定，不具有致瘤性，增殖病毒能力不受影响，应用到家禽病毒疫苗生产中，替代固相培养的疫苗生产工艺，可大幅度提高生产效率。
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公开(公告)号：CN111848772B
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202010770180.7
申请日：2020-08-03
Applicant: 山东绿都生物科技有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明公开了SAMD9突变型蛋白，所述SAMD9突变型蛋白的氨基酸序列缺少第61~448位氨基酸。本发明还公开了编码该蛋白的基因、细胞系及其在制备山羊痘病毒疫苗中的应用。本发明还公开了SAMD9突变型蛋白的Vero细胞系的制备方法。本发明通过基因编辑技术敲除了Vero细胞SAMD9基因的AlbA_2结构域及其两侧序列，以降低Vero细胞的病毒抑制功能，获得的SAMD9突变型蛋白Vero细胞对山羊痘病毒具有更高的易感性，且遗传性状稳定，能够应用到山羊痘病毒等病毒疫苗生产中，替代原代细胞疫苗生产工艺，大幅度降低生产成本，并提高疫苗的安全性。
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公开(公告)号：CN111849990A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010770696.1
申请日：2020-08-03
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/63 , C12N15/90 , C12N15/39 , C12N7/01 , C07K14/065 , C12Q1/70 , C12Q1/686 , G01N33/569 , A61K39/275 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种gRNA，所述gRNA序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示，本发明还公开了重组质粒、ORF016基因缺失型山羊痘病毒株及其制备方法和应用。本发明首次通过基因敲除方法获得了ORF016基因缺失型山羊痘病毒株，该方法是首次将CRISPR技术在山羊痘病毒中进行应用，同时本发明采用了反向转染方法对ORF016基因进行了敲除，该方法的敲除效率达到了31.6%，远远高于现有技术中的敲除效率。同时，本发明所获得的SDLVDUORF016毒株是一株仅缺失ORF016的毒株，基因的缺失对其生长特性没有影响，该毒株可用于山羊痘疫苗、检测试剂、山羊痘病毒鉴定等用途。
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公开(公告)号：CN111848772A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010770180.7
申请日：2020-08-03
Applicant: 山东绿都生物科技有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明公开了SAMD9突变型蛋白，所述SAMD9突变型蛋白的氨基酸序列缺少第61~448位氨基酸。本发明还公开了编码该蛋白的基因、细胞系及其在制备山羊痘病毒疫苗中的应用。本发明还公开了SAMD9突变型蛋白的Vero细胞系的制备方法。本发明通过基因编辑技术敲除了Vero细胞SAMD9基因的AlbA_2结构域及其两侧序列，以降低Vero细胞的病毒抑制功能，获得的SAMD9突变型蛋白Vero细胞对山羊痘病毒具有更高的易感性，且遗传性状稳定，能够应用到山羊痘病毒等病毒疫苗生产中，替代原代细胞疫苗生产工艺，大幅度降低生产成本，并提高疫苗的安全性。
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