利用马克斯克鲁维酵母制备含类似哺乳动物细胞N-聚糖修饰结的糖蛋白的方法

    公开(公告)号:CN120005960A

    公开(公告)日:2025-05-16

    申请号:CN202510120519.1

    申请日:2025-01-25

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体一种利用马克斯克鲁维酵母制备含类似哺乳动物细胞N‑聚糖修饰结构的糖蛋白的方法。本发明以马克斯克鲁维酵母FIM1作为出发菌株,利用基因组编辑技术删除马克斯克鲁维酵母FIM1基因组上的基因URA3后作为宿主菌株,重组表达N‑聚糖糖蛋白;并进一步在基因MNN1的上游5’‑UTR上插入AT序列,以弱化MNN1的表达,提高类似哺乳动物细胞N‑聚糖糖链结构的合成。所制备的糖蛋白的N‑聚糖的糖链具有类似哺乳动物细胞N‑聚糖的糖链结构,存在杂合型、复合型的糖链,在糖链上可同时存在唾液酸、岩藻糖。本发明可以广泛制备与哺乳动物细胞类似的N‑聚糖的糖蛋白。

    一株马克斯克鲁维酵母菌株及其在发酵食品中的应用

    公开(公告)号:CN117025425A

    公开(公告)日:2023-11-10

    申请号:CN202310670474.6

    申请日:2023-06-07

    Applicant: 复旦大学

    Inventor: 吕红 周峻岗 余垚

    Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体为一种马克斯克鲁维酵母菌株及其在发酵食品中的应用。该菌株是从西藏那曲地区自然发酵酸奶样本中,用乳糖为唯一碳源的培养基所分离获得。18S rDNA鉴定为马克斯克鲁维酵母,命名Kluyveromyces marxianus Fim‑3,保藏编号为CGMCC No.26703。本发明的马克斯克鲁维酵母菌株Fim‑3,具有高表达乳糖酶和高乙醇发酵能力,可用于制备发酵食品,包括发酵乳制品、果蔬汁、水果酒;发酵乳制品可分解代谢99.6%以上的乳糖,或与乳酸菌共发酵,可完全分解代谢乳糖产生乙醇和乳酸;制作的奶酒奶酪味浓郁,酒香酯香丰富。

    一种利用马克斯克鲁维酵母酿造水果西打的方法

    公开(公告)号:CN112251311B

    公开(公告)日:2021-09-17

    申请号:CN202010979266.0

    申请日:2020-09-17

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于酿酒技术领域,具体为一种利用马克斯克鲁维酵母酿造水果西打的方法。本发明采用马克斯克鲁维酵母Fim‑1作为发酵菌种;具体步骤包括:取果汁,调节果汁糖度为13‑16°Bx;加入20‑100ppm的焦亚硫酸钾,搅拌溶解;接入马克斯克鲁维酵母Fim‑1菌种,进行果汁的液态发酵;发酵液过滤澄清,然后充二氧化碳,罐装;巴氏杀菌,得到果西打酒产品。所述水果包括苹果、梨、桃子、李子、木瓜、西瓜等。本发明方法发酵时间较短,绿色天然,无添加剂;产品色泽透亮,澄清度高,口感清爽,经发酵后果汁中果酸和柠檬酸被转化为更柔和的乳酸,氨基酸的含量更高,高级醇的含量更低;是一种营养丰富、果香味浓、入口绵软的水果西打。

    犬细小病毒疫苗组合物及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN108273055A

    公开(公告)日:2018-07-13

    申请号:CN201810004453.X

    申请日:2018-01-03

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明公开了一种犬细小病毒疫苗组合物注射制剂和口服制剂,其包含以下a)和b)、基本上由以下a)和b)组成、或者由以下a)和b)组成:a)、由马克斯克鲁维酵母重组工程菌表达的犬细小病毒VP2蛋白自组装形成的类病毒颗粒;b)、药学上或兽医学上可接受的用于注射/口服制剂的辅料。本发明还公开了上述疫苗组合物的制备方法和应用。本发明提供的犬细小病毒类病毒颗粒疫苗免疫可获得高水平血清IgG抗体,具有良好的免疫原性,能够减少和预防犬细小病毒感染所引起相关性疾病,并具有安全性高、生产成本低并可放大规模生产、操作简单等优点,可应用于预防和减少CPV感染所引起相关性临床症状。

    一种马克斯克鲁维酵母的应用

    公开(公告)号:CN105707436A

    公开(公告)日:2016-06-29

    申请号:CN201610058751.8

    申请日:2016-01-28

    Applicant: 复旦大学

    CPC classification number: A23V2002/00 A23V2250/76

    Abstract: 本发明提供了一种马克斯克鲁维酵母的应用,尤其是在饲料添加剂或饲料发酵中的应用,以及一种饲料和饲料添加剂。本发明所述马克斯克鲁维酵母优选为用作动物饲料添加剂和/或动物饲料发酵菌剂,能够提高动物免疫力,和/或提高动物消化能力,和/或保护动物不受自由基损伤,和/或生产更多营养成分;更优选为,相比于现有酵母具有更优的提高动物免疫力、和/或提高动物消化能力、和/或保护动物不受自由基损伤、和/或生产更多营养成分的能力。

    马克思克鲁维酵母营养缺陷型菌株及无痕基因组改造方法

    公开(公告)号:CN105112313A

    公开(公告)日:2015-12-02

    申请号:CN201510540029.3

    申请日:2015-08-28

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明提供了一种基因改造的马克思克鲁维酵母营养缺陷型菌株以及用于菌株改造的无痕基因改造方法,所述马克思克鲁维酵母营养缺陷型菌株是马克思克鲁维酵母菌株CGMCC No.10621敲除全部或部分营养基因之后的菌株;所述无痕基因改造方法包括:敲除马克思克鲁维酵母菌CGMCC No.10621至少部分营养缺陷型基因,使其形成营养缺陷型菌株。CGMCC No.10621具有高的分泌蛋白的能力和高的生物量、以及发酵时间短等特征;本发明方法所构建的营养缺陷型马克思克鲁维酵母菌株,可以用于马克思克鲁维酵母表达系统的宿主菌,用于重组制备外源蛋白(酶)。另外,本发明提供的优选的第二基因敲除方法,标签基因序列能够回收利用。

    结核分枝杆菌Wag31基因的免疫功能用途

    公开(公告)号:CN104940919A

    公开(公告)日:2015-09-30

    申请号:CN201410113296.8

    申请日:2014-03-25

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及结核分枝杆菌Wag31基因及其免疫用途。本发明提供了结核分枝杆菌Wag31蛋白在制备重组BCG疫苗中的应用。Wag31是结核分枝杆菌抗原,利用过表达Wag31的重组BCG疫苗免疫小鼠,第11周时,重组BCG疫苗免疫组的脾淋巴细胞分泌IFN-gamma,IL-2的水平优于BCG对照,这表明wag31可以作为优化BCG疫苗的一种另类的候选抗原,着眼于增强BCG后期的免疫效果。本发明还提供了相应的重组BCG疫苗、DNA疫苗以及重组BCG疫苗的制备方法。

    一种I型普鲁兰酶的编码基因及其重组表达和应用

    公开(公告)号:CN102676557B

    公开(公告)日:2014-03-05

    申请号:CN201210145521.7

    申请日:2012-05-11

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于基因工程和蛋白质工程技术领域,具体为一种I型普鲁兰酶的编码基因,及其重组表达和应用。本发明提供了来源于气单胞菌属的普鲁兰酶新基因,其核苷酸序列如SEQIDNO1所示,记为pluAs。该普鲁兰酶为I型普鲁兰酶,能够降解普鲁兰多糖或淀粉中的α-1,6葡萄糖糖苷键。重组表达该基因的三种具有I型普鲁兰酶活性的DNA片段,该重组普鲁兰酶片段最适pH均为8.0,最适反应温度为60℃;在55℃处理1h,该普鲁兰酶的残余活性达90%左右;在pH7~10的条件下非常稳定。使用重组普鲁兰酶与淀粉糖化酶协同糖化淀粉,能够制备具有更高葡萄糖含量的产物。本发明提供的重组普鲁兰酶可应用于淀粉加工、环保、食品、医疗保健等行业。

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