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公开(公告)号:CN114395643A
公开(公告)日:2022-04-26
申请号:CN202210156886.3
申请日:2022-02-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及病毒检测领域,尤其涉及非洲猪瘟病毒的双通道数字PCR检测试剂盒及方法。本发明提供了非洲猪瘟病毒的双通道微滴数字PCR检测试剂盒及方法,可以检测到多种不同类型的毒株,并鉴别其是否为EP402R缺失株。此外,本发明提供的产品具有良好的特异性和灵敏度:在几种常见猪病病毒中仅扩增非洲猪瘟病毒、对pMD18T‑EP402R和pMD18T‑B646L质粒的最低检测限分别低至0.43copies/μL和2.6copies/μL。因此本发明有潜力准确检测非洲猪瘟病毒的隐性感染,可以应用于临床和生产中该猪瘟病毒特别是EP402R基因缺失株快速检测。
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公开(公告)号:CN110184284B
公开(公告)日:2021-02-19
申请号:CN201910429596.X
申请日:2019-05-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种携带NanoLuc基因的重组禽流感病毒及其在活体成像小鼠模型中的应用。本发明提供了一种DNA片段,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,可将其用于构建重组质粒、重组病毒和小鼠模型。本发明中构建一种重组禽流感病毒,其与野生型病毒的复制能力和致病力相近。在SPF鸡胚传代中,收集的4代病毒液都能检测到NanoLuc荧光素酶基因,具有良好的稳定性。本发明中还成功构建了活体成像小鼠模型,具有可视化功能,在不需要剖解小鼠情况下,能够检测流感病毒在小鼠的分布位置。能够实现纵向评估,在同一小鼠上连续时间观察流感病毒的感染动态过程,为流感病毒的研究补充了一种可视化工具。
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公开(公告)号:CN108486108B
公开(公告)日:2020-10-09
申请号:CN201810220691.4
申请日:2018-03-16
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开一种敲除人HMGB1基因的细胞株及其应用,属于分子生物学领域。本发明提供一种靶向敲除人HMGB1基因的gRNA序列,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。利用CRISPR‑Cas9技术首次在人Huh7细胞基因组上敲除HMGB1基因,使得HMGB1蛋白的表达完全丧失,获得HMGB1敲除的Huh7细胞株,且敲除细胞株形态、生长速度等方面均与对照细胞无明显差异,是较为理想的HMGB1敲除的细胞模型;且操作简便,周期短,成本低,改造后细胞株稳定,可用于研究HMGB1蛋白在自噬、凋亡、细胞炎症、病毒感染等方面的具体作用机制。本发明获得的细胞株能够显著增强乙型脑炎病毒毒株的感染。
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公开(公告)号:CN110184284A
公开(公告)日:2019-08-30
申请号:CN201910429596.X
申请日:2019-05-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种携带NanoLuc基因的重组禽流感病毒及其在活体成像小鼠模型中的应用。本发明提供了一种DNA片段,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,可将其用于构建重组质粒、重组病毒和小鼠模型。本发明中构建一种重组禽流感病毒,其与野生型病毒的复制能力和致病力相近。在SPF鸡胚传代中,收集的4代病毒液都能检测到NanoLuc荧光素酶基因,具有良好的稳定性。本发明中还成功构建了活体成像小鼠模型,具有可视化功能,在不需要剖解小鼠情况下,能够检测流感病毒在小鼠的分布位置。能够实现纵向评估,在同一小鼠上连续时间观察流感病毒的感染动态过程,为流感病毒的研究补充了一种可视化工具。
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公开(公告)号:CN115531384B
公开(公告)日:2024-02-02
申请号:CN202211021536.2
申请日:2022-08-24
Applicant: 华南农业大学 , 江西鹏创生物科技有限公司
IPC: A61K31/4725 , A61K31/4748 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于兽药技术领域,具体涉及一种双苄基异喹啉类生物碱在制备抗非洲猪瘟病毒(ASFV)药物中的应用。所述双苄基异喹啉类生物碱:莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱、蝙蝠葛碱、千金藤碱、粉防己碱、防己诺林碱、小檗胺可以显著抑制ASFV的增殖,对ASFV的半数有效抑制浓度为0.31~2.34μM。并且,所述双苄基异喹啉类生物碱对ASFV天然靶细胞猪肺泡巨噬细胞的毒性作用较小,能在无细胞毒性的浓度下对ASFV具有显著的抗病毒活性,安全性高;再加上所述双苄基异喹啉类生物碱来源于常见中药,来源广泛、成本低廉,非常适合开发防治非洲猪瘟的药物。
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公开(公告)号:CN117004652A
公开(公告)日:2023-11-07
申请号:CN202310790001.X
申请日:2023-06-30
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/34 , C07K14/01 , G01N33/569 , G01N33/531
Abstract: 本发明涉及病毒检测技术领域,具体涉及基于非洲猪瘟病毒p30蛋白的间接ELISA检测方法。本发明以pCMV3为真核表达载体,构建pCMV3‑p30重组质粒,在HEK‑293F细胞上进行非洲猪瘟病毒p30蛋白的真核表达,并与HEK‑293T细胞进行对比,结果表明,与HEK‑293T细胞相比,p30蛋白在HEK‑293F细胞上表达量高,可以实现p30蛋白的大规模生产,将其应用于非洲猪瘟病毒间接ELISA检测中,包被的p30蛋白需求浓度低、显著降低检测成本,检测敏感性高、特异性好,且与商品化ELISA检测试剂盒的检测符合率为100%,具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN115813912B
公开(公告)日:2023-09-01
申请号:CN202211511354.3
申请日:2022-11-29
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K31/382 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于兽用药物技术领域,具体涉及海恩酮在制备防治非洲猪瘟药物中的用途。本发明通过实验研究发现,海恩酮在细胞水平可以极显著地抑制非洲猪瘟病毒的DNA增殖,并且对非洲猪瘟病毒的p30蛋白的合成也具有显著的抑制作用,能够达到预防和治疗非洲猪瘟病毒感染所造成的非洲猪瘟疾病的效果;并且,海恩酮安全性良好,非常适合大规模产业化生产使用,可为非洲猪瘟的治疗提供更多的选择。
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公开(公告)号:CN115837025A
公开(公告)日:2023-03-24
申请号:CN202211632397.7
申请日:2022-12-19
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K31/4748 , A61P31/20
Abstract: 本发明涉及生物制药领域,尤其涉及盐酸小檗胺在制备预防或治疗非洲猪瘟的药物中的应用。本发明提供了盐酸小檗胺在制备预防或治疗非洲猪瘟的药物中的应用。现有非洲猪瘟抗病毒药物大多为人工合成小分子化合物,成本较高,且仅在非洲猪瘟中被证明具有抗病毒功能。盐酸小檗胺作为小檗属植物中提纯的一种双苄基异喹啉生物碱,已在日本乙型脑炎病毒中被证明具有抗病毒功能,临床使用中具有作为非洲猪瘟和日本乙型脑炎病毒的双重防治药物的潜质。本发明发现,盐酸小檗胺对ASFV在猪原代巨噬细胞(PAM)上具有显著的抑制作用,对病毒在PAM细胞上的病毒复制、感染性病毒粒子产出和病毒蛋白的表达均有显著抑制作用。
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公开(公告)号:CN111334482B
公开(公告)日:2023-03-14
申请号:CN202010243659.5
申请日:2020-03-31
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种复制性增强的减毒JEV及其制备方法与应用,属于生物医学技术领域。本发明的减毒JEV是日本乙型脑炎病毒NS5蛋白644位天冬氨酸突变为苏氨酸,和3’非编码区248位碱基T突变为C、254位碱基A突变为G、258位点碱基A突变为G,所得的日本乙型脑炎病毒。本发明方法获得的突变毒株在复制能力上有了明显的提升,同时致病性降低,用于疫苗生产中,可提高产量,降低成本。利用本发明方法获得突变毒株的时间周期短,操作简便,可加快弱毒毒株的培育和病毒致病机制研究的进程。
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公开(公告)号:CN114712341A
公开(公告)日:2022-07-08
申请号:CN202210397264.X
申请日:2022-04-15
Applicant: 华南农业大学 , 湖南植之源农牧有限公司
IPC: A61K31/192 , A61P31/16
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,具体涉及鼠尾草酸在制备防治流感药物中的用途。本发明通过大量的实验数据证明,鼠尾草酸在细胞水平对流感病毒有显著的抗病毒效果,并且通过动物实验证明鼠尾草酸对感染流感病毒的小鼠具有显著的保护作用,提高小鼠的存活率。并且鼠尾草酸可以于植物中提取得到,来源广泛、安全性高,非常适于制成防治流感病毒的药物。
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