公开(公告)号：CN114395643A

公开(公告)日：2022-04-26

申请号：CN202210156886.3

申请日：2022-02-21

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 亓文宝 ,  简伟俊 ,  朱君海 ,  陈画菡 ,  张桂红 ,  廖明 ,  黄一凡 ,  高琦 ,  高飞

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及病毒检测领域，尤其涉及非洲猪瘟病毒的双通道数字PCR检测试剂盒及方法。本发明提供了非洲猪瘟病毒的双通道微滴数字PCR检测试剂盒及方法，可以检测到多种不同类型的毒株，并鉴别其是否为EP402R缺失株。此外，本发明提供的产品具有良好的特异性和灵敏度：在几种常见猪病病毒中仅扩增非洲猪瘟病毒、对pMD18T‑EP402R和pMD18T‑B646L质粒的最低检测限分别低至0.43copies/μL和2.6copies/μL。因此本发明有潜力准确检测非洲猪瘟病毒的隐性感染，可以应用于临床和生产中该猪瘟病毒特别是EP402R基因缺失株快速检测。

公开(公告)号：CN115770245A

公开(公告)日：2023-03-10

申请号：CN202211694508.7

申请日：2022-12-28

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 黄丽红 ,  朱君海 ,  亓文宝 ,  高飞 ,  陈画菡 ,  简伟俊

IPC: A61K31/4748 ,  A61K31/4741 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明涉及生物医药技术领域，特别涉及双苄基异喹啉生物碱在制备防治非洲猪瘟病毒药物中的应用。本发明提供了具有双苄基异喹啉结构的生物碱在制备预防和/或治疗非洲猪瘟的药物中的应用。现有非洲猪瘟抗病毒药物大多为人工合成小分子化合物，成本较高。本发明双苄基异喹啉生物碱(异粉防己碱、汉防己甲素、千金藤素、防己诺林碱)药效较好，安全浓度高，可抑制非洲猪瘟病毒基因复制、蛋白表达、病毒粒子产出。

公开(公告)号：CN113215110A

公开(公告)日：2021-08-06

申请号：CN202110521697.7

申请日：2021-05-13

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 亓文宝 ,  黄一凡 ,  朱君海 ,  简伟俊 ,  廖明 ,  张桂红 ,  高琦

IPC: C12N7/00 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种提高非洲猪瘟病毒增殖能力的方法，属于微生物应用领域。本发明方法包括如下步骤：S1、将猪原代肺泡巨噬细胞的细胞悬液接种于细胞培养板中，静置3～5h待其贴壁；S2、将非洲猪瘟病毒液和洁酸键稀释液均匀混合，24～26℃条件下孵育0～4h，加入培养基，得到混合液；用所得混合液替换细胞培养板中的培养液，培养1.5～2.5h；S3、用含10％胎牛血清的培养基再次替换细胞培养板中的培养液，培养4～6d。该方法不仅能够增强非洲猪瘟病毒的感染效率，节约实验室猪原代肺泡巨噬细胞的制备时间和成本，还能为高效地进行非洲猪瘟病毒的分离、疫情监测、疫苗的研发和生产提供基础数据支持。

公开(公告)号：CN117004652A

公开(公告)日：2023-11-07

申请号：CN202310790001.X

申请日：2023-06-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 亓文宝 ,  陈画菡 ,  朱君海 ,  牛学锋 ,  程元艺 ,  黄丽红 ,  高飞 ,  简伟俊

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/34 ,  C07K14/01 ,  G01N33/569 ,  G01N33/531

Abstract: 本发明涉及病毒检测技术领域，具体涉及基于非洲猪瘟病毒p30蛋白的间接ELISA检测方法。本发明以pCMV3为真核表达载体，构建pCMV3‑p30重组质粒，在HEK‑293F细胞上进行非洲猪瘟病毒p30蛋白的真核表达，并与HEK‑293T细胞进行对比，结果表明，与HEK‑293T细胞相比，p30蛋白在HEK‑293F细胞上表达量高，可以实现p30蛋白的大规模生产，将其应用于非洲猪瘟病毒间接ELISA检测中，包被的p30蛋白需求浓度低、显著降低检测成本，检测敏感性高、特异性好，且与商品化ELISA检测试剂盒的检测符合率为100％，具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN115837025A

公开(公告)日：2023-03-24

申请号：CN202211632397.7

申请日：2022-12-19

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 亓文宝 ,  朱君海 ,  黄丽红 ,  简伟俊 ,  陈画菡 ,  高飞

IPC: A61K31/4748 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明涉及生物制药领域，尤其涉及盐酸小檗胺在制备预防或治疗非洲猪瘟的药物中的应用。本发明提供了盐酸小檗胺在制备预防或治疗非洲猪瘟的药物中的应用。现有非洲猪瘟抗病毒药物大多为人工合成小分子化合物，成本较高，且仅在非洲猪瘟中被证明具有抗病毒功能。盐酸小檗胺作为小檗属植物中提纯的一种双苄基异喹啉生物碱，已在日本乙型脑炎病毒中被证明具有抗病毒功能，临床使用中具有作为非洲猪瘟和日本乙型脑炎病毒的双重防治药物的潜质。本发明发现，盐酸小檗胺对ASFV在猪原代巨噬细胞(PAM)上具有显著的抑制作用，对病毒在PAM细胞上的病毒复制、感染性病毒粒子产出和病毒蛋白的表达均有显著抑制作用。