防治油菜菌核病的枯草芽胞杆菌及抗菌物质分离

    公开(公告)号:CN101270344B

    公开(公告)日:2010-08-04

    申请号:CN200810047655.9

    申请日:2008-05-12

    Abstract: 本发明属于农业微生物学技术领域,具体涉及一株对油菜菌核病有抑制作用的拮抗菌X-01菌株的分离筛选,抗菌活性物质的分离与应用。本发明的X-01菌株已经保藏在中国典型培养物保藏中心(保减号为CCTCC NO:M 208067)。通过形态学观察、生理生化分析和16S rDNA同源性分析,鉴定X-01菌株为枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)。该菌株能够分泌一种脂肽类抗生素iturinA,其分子量为1042.9Da。本发明还公开了利用X-01菌株制备脂肽类抗生素iturinA的方法。离体生防试验表明,本发明制备的脂肽类抗生素iturinA对油菜菌核病菌具有明显的抑制效果,脂肽类抗生素iturin A浓度为100μg/ml时防治油菜菌核病的效果达100%,浓度为10μg/ml时的防治效果达到40.7%。

    显性抑制突变体F427N作为炭疽毒素抑制剂及疫苗的应用

    公开(公告)号:CN101445789A

    公开(公告)日:2009-06-03

    申请号:CN200810197554.X

    申请日:2008-11-07

    Abstract: 本发明涉及动物细菌学与人畜共患传染病学技术领域。具体涉及一种显性抑制突变体F427N作为炭疽芽孢杆菌毒素抑制剂及疫苗的应用。本发明通过炭疽芽孢杆菌致死毒素基因的克隆,蛋白表达与纯化,基因定点饱和突变等方法,得到炭疽芽孢杆菌保护性抗原蛋白(即显性抑制突变体F427N),该突变体已成功地克隆到原核表达载体pGEX-KG中,构建了重组质粒pGEX-KG-PA(F427N)。包含该重组质粒的大肠杆菌被命名为Escherichia coli DH5α/pGEX-KG-PA(F427N),保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC-M208159。本发明还公开了制备该抗原蛋白的方法,利用该抗原蛋白制备炭疽毒素抑制剂和亚单位疫苗及其应用。

    一种突变型草甘膦降解酶及其克隆、表达与应用

    公开(公告)号:CN110272880A

    公开(公告)日:2019-09-24

    申请号:CN201910428622.7

    申请日:2019-05-22

    Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及一种通过定点突变技术获得的对草甘膦催化活性和底物特异性提高的草甘膦降解酶突变体。本发明所述的草甘膦降解酶突变体B4S7-F63X,在现有草甘膦降解酶B4S7的基础上,改造后的草甘膦降解酶在其第63位的苯丙氨酸进行突变为丙氨酸或组氨酸。对比现有的文献报道和专利数据,B4S7-F63A对草甘膦具有最高的催化效率,B4S7-F63H对草甘膦具有最高的底物特异性,所述草甘膦降解酶编码基因导入植物后,有望赋予植物抗草甘膦的同时,实现草甘膦的高效分解,解决草甘膦在植物中的残留问题,在培育新型耐草甘膦作物及培育能够降解草甘膦的新型抗除草剂植物领域具有极大的应用潜力。

    一种大头金蝇幼虫的收卵方法及应用

    公开(公告)号:CN105831017B

    公开(公告)日:2018-09-11

    申请号:CN201610194635.9

    申请日:2016-03-31

    Abstract: 本发明属于人工养殖昆虫技术领域,具体涉及一种大头金蝇幼虫的收卵方法及应用。本发明包括以猪粪为基质的收卵料及收卵方法,其特征在于:(1)收卵基质选自当天排泄的猪粪,使其含水量至75%,厌氧发酵6‑12h,得收卵基质;(2)在收卵盘四角及边沿加厚放置收卵基质;(3)每天8‑18h将收卵基质放入蝇笼,每2h收一次蝇卵,将当天的卵块4℃保存,30℃下集中孵化;(4)收取卵块后适时添加收卵基质并保持基质湿润;(5)在卵块表面覆盖65%含水量的麸皮用薄膜覆盖保湿,30℃环境中孵化。本发明解决了大头金蝇同时孵化问题,收卵基质优于常规方法,成本低,收卵效果好和卵的成活率高。

    一种降解除草剂草甘膦的抗性基因及其编码蛋白

    公开(公告)号:CN104450750B

    公开(公告)日:2017-05-17

    申请号:CN201410738357.X

    申请日:2014-12-05

    Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及一种降解除草剂草甘膦的抗性基因及其编码蛋白。该基因和蛋白是从能够高效降解除草剂草甘膦的抗性的基因中筛选得到,该基因被命名为草甘膦氧化酶B4S7基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,该基因编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所示。通过对蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)甘氨酸氧化酶突变体B3S1的编码基因进行DNA改组,并结合基于T7噬菌体裂解‑辣根过氧物酶/邻联茴香胺酶偶联活性筛选,最终获得草甘膦氧化酶突变体B4S7。本发明初步验证了草甘膦氧化酶B4S7基因的功能及其在草甘膦抗性作物中的应用潜能。

    一种对秀丽隐杆线虫高毒力的几丁质酶及其编码基因

    公开(公告)号:CN104894149A

    公开(公告)日:2015-09-09

    申请号:CN201510124341.4

    申请日:2015-03-20

    Abstract: 本发明属于农业微生物基因工程技术领域,具体涉及一种对秀丽隐杆线虫高毒力的几丁质酶及其编码基因。本发明克隆的基因来源于假单胞菌。本发明包含几丁质酶基因的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列。包含该基因质粒的大肠杆菌(Escherichia?coli)DH5α/6p-pachi保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏编号为CCTCC?NO:M2015139。经过生物学功能验证,证明该杀虫几丁质酶对秀丽隐杆线虫具有毒性,可以通过降解秀丽隐杆线虫的虫卵和角质层来达到毒杀效果。本发明公开了所述几丁质酶在生防线虫方面的应用。

    降解除草剂草甘膦的抗性基因及其编码蛋白

    公开(公告)号:CN103421824B

    公开(公告)日:2014-12-31

    申请号:CN201310320412.9

    申请日:2013-08-28

    Abstract: 本发明属于基因工程领域,涉及一种高效降解除草剂草甘膦的抗性基因的分离、体外定向进化及功能鉴定,本发明还涉及草甘膦的抗性基因在植物除草剂草甘膦,B3S1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,其编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。通过扩增来自海洋细菌蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)的甘氨酸氧化酶编码基因(thiO),对其进行连续两轮随机突变和一轮DNA改组试验,并结合基于T7噬菌体裂解-辣根过氧物酶/邻联茴香胺酶偶联活性筛选技术,获得最终草甘膦氧化酶突变体B3S1。本发明证实了该基因的功能及在降解除草剂草甘膦抗性中应用途径。

    5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因的分离

    公开(公告)号:CN103194465B

    公开(公告)日:2014-06-18

    申请号:CN201210006891.2

    申请日:2012-01-10

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种抗草甘膦基因5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因的分离鉴定,所述的5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所述,该基因编码的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所述。5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因是从深海细菌Janibacter?limosus菌株的基因组文库中克隆得到,包含该基因质粒的重组大肠杆菌LZD001保藏在中国典型培养物保藏中心,其保藏编号为CCTCC?No:M2011493。经过生物学实验验证,证明该基因对草甘膦具有一定的耐受性。

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