一种耐盐的内切纤维素酶及其编码基因

    公开(公告)号:CN101418307A

    公开(公告)日:2009-04-29

    申请号:CN200810197797.3

    申请日:2008-11-24

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域。具体涉及一种新的耐盐内切纤维素酶及其编码基因。本发明公开了所述基因的序列及其编码区,该基因的序列如SEQ ID NO:1所示,序列全长为1053bp,编码350个氨基酸。包含该基因质粒的大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α/S664/6p/cel8h,保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏编号为CCTCC NO:M208233。生物学验证表明,该内切纤维素酶对高盐浓度具有极强耐性。该酶能够广泛应用于高盐催化、纤维素发酵等工业领域。

    一种耐碱、高活性的碱性木聚糖酶及其编码基因

    公开(公告)号:CN101402964A

    公开(公告)日:2009-04-08

    申请号:CN200810197564.3

    申请日:2008-11-10

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域。具体涉及一种新的碱性木聚糖酶及其编码基因。本发明公开所述基因的序列及其编码区。包含该基因质粒的大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α/Mn22/6p/Kxyn,保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏编号为CCTCC NO:M208201。经过生物学验证,证明该木聚糖酶Kxyn具有强耐碱性和热稳定性,可专门降解木聚糖。本发明的木聚糖酶Kxyn可用于造纸等相关领域。

    一种大头金蝇幼虫的收卵方法及应用

    公开(公告)号:CN105831017A

    公开(公告)日:2016-08-10

    申请号:CN201610194635.9

    申请日:2016-03-31

    Abstract: 本发明属于人工养殖昆虫技术领域,具体涉及一种大头金蝇幼虫的收卵方法及应用。本发明包括以猪粪为基质的收卵料及收卵方法,其特征在于:(1)收卵基质选自当天排泄的猪粪,使其含水量至75%,厌氧发酵6?12h,得收卵基质;(2)在收卵盘四角及边沿加厚放置收卵基质;(3)每天8?18h将收卵基质放入蝇笼,每2h收一次蝇卵,将当天的卵块4℃保存,30℃下集中孵化;(4)收取卵块后适时添加收卵基质并保持基质湿润;(5)在卵块表面覆盖65%含水量的麸皮用薄膜覆盖保湿,30℃环境中孵化。本发明解决了大头金蝇同时孵化问题,收卵基质优于常规方法,成本低,收卵效果好和卵的成活率高。

    一种耐盐的内切纤维素酶及其编码基因

    公开(公告)号:CN101418307B

    公开(公告)日:2010-12-08

    申请号:CN200810197797.3

    申请日:2008-11-24

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域。具体涉及一种新的耐盐内切纤维素酶及其编码基因。本发明公开了所述基因的序列及其编码区,该基因的序列如SEQ ID NO:1所示,序列全长为1053bp,编码350个氨基酸。包含该基因质粒的大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α/S664/6p/cel8h,保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏编号为CCTCC NO:M208233。生物学验证表明,该内切纤维素酶对高盐浓度具有极强耐性。该酶能够广泛应用于高盐催化、纤维素发酵等工业领域。

    一种降解除草剂草甘膦的抗性基因及其编码蛋白

    公开(公告)号:CN104450750A

    公开(公告)日:2015-03-25

    申请号:CN201410738357.X

    申请日:2014-12-05

    Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及一种降解除草剂草甘膦的抗性基因及其编码蛋白。该基因和蛋白是从能够高效降解除草剂草甘膦的抗性的基因中筛选得到,该基因被命名为草甘膦氧化酶B4S7基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,该基因编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所示。通过对蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)甘氨酸氧化酶突变体B3S1的编码基因进行DNA改组,并结合基于T7噬菌体裂解-辣根过氧物酶/邻联茴香胺酶偶联活性筛选,最终获得草甘膦氧化酶突变体B4S7。本发明初步验证了草甘膦氧化酶B4S7基因的功能及其在草甘膦抗性作物中的应用潜能。

    一种频率可控的GC特异性DNA诱变方法

    公开(公告)号:CN101402953A

    公开(公告)日:2009-04-08

    申请号:CN200810197565.8

    申请日:2008-11-10

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域。具体涉及一种频率可控的GC特异性DNA诱变方法。先用氢氧化钠将待诱变基因变性为单链,再用对苯二酚和亚硫酸氢钠处理,使DNA链中的C脱氨基成为U;以修饰过的DNA为模板,PCR扩增使U跟A配对,后续扩增中,A继续与T配对,从而使原始DNA链中的GC向AT方向转换,获得突变DNA分子;将突变的DNA分子装载到表达载体,即可构建成DNA分子突变文库。随着亚硫酸氢钠处理时间的延长,DNA的最终突变频率也逐渐增大,最终可得突变频率达5%左右的DNA,从而克服一些常规随机诱变方法中诱变频率过低的问题。本发明是针对DNA分子中的GC碱基,GC突变占总突变率的90%以上,尤其适用于富含GC基因的诱变。本发明可用于DNA分子体外改良。

    一种AT选择性高频率诱变的方法

    公开(公告)号:CN1807618A

    公开(公告)日:2006-07-26

    申请号:CN200610018256.0

    申请日:2006-01-19

    Abstract: 本发明公开了一种AT选择性高频率诱变方法。其步骤包括以dUTP为媒介进行第一轮PCR扩增,得到含dUMP的杂合DNA分子;以该DNA分子为模板,进行第二轮PCR扩增;通过部分U与G配对,获得AT碱基分别被GC替换的突变DNA分子或者在第一轮PCR扩增后,以含有dUMP的杂合DNA分子为模板,在0.5mM Mgcl2存在下进行在第二轮PCR扩增,获得高突变频率的DNA分子。本发明的AT选择性诱变方法突变频率为0.86%.其中AT转换为其它碱基数占总突变碱基数的96.5%;高频率诱变方法的突变率为 4.0%。其中AT转换为其它碱基数占总突变碱基的90.4%。本发明的方法可用于DNA分子的体外改良。

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