公开(公告)号：CN113186252A

公开(公告)日：2021-07-30

申请号：CN202110313792.8

申请日：2021-03-24

Applicant: 北京化工大学

Inventor： 苏昕 ,  李俊洁 ,  喻长远 ,  陈婧 ,  张凌昊

IPC: C12Q1/6816 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种常温下双链核酸特异性检测探针，以及使用上述探针的检测方法。本发明的检测方法利用λexo驱动靶标双链核酸与设计的探针发生链置换反应，形成酶的最适底物后消化探针以产生检测信号，λexo识别并消化核酸5’磷酸末端，引发酶的消化反应，产生荧光信号，这种信号与目标核酸序列严格对应，高度可信地区分目标序列与非目标序列，可以在室温下直接检测双链核酸靶标，大幅简化双链核酸目标物检测的程序，降低其临场应用难度，将在基于核酸检测分子诊断中广泛应用。

公开(公告)号：CN112921120A

公开(公告)日：2021-06-08

申请号：CN202110223658.9

申请日：2021-03-01

Applicant: 北京化工大学

Inventor： 苏昕 ,  李娜 ,  喻长远 ,  刘宇 ,  张凌昊

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6816 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种可重复利用的核酸荧光探针，包含荧光探针、淬灭探针以及含有与目标物结合区域的DNA。核酸荧光探针荧光基团初始为未激活状态，目标物能通过链置换结合到核酸荧光探针的目标物结合的区域将其变构为与核酸外切酶有较高亲和性的底物复合物，此时荧光基团被激活；核酸外切酶切割底物复合物后导致目标物降解，核酸荧光探针通过重新杂交回到初始未激活状态，实现自动重置，从而达到可重复使用的效果。本发明的探针系统可以重复使用至少5次，可以在均质溶液中运行，有效节约试剂成本，为短时间内需应对大量临床样本的核酸检测场景提供解决方案。本发明中的方法将在核酸检测和其他类型的液体活检中广泛应用。

公开(公告)号：CN110229870A

公开(公告)日：2019-09-13

申请号：CN201910270772.X

申请日：2019-04-04

Applicant: 北京化工大学

Inventor： 苏昕 ,  李丽娜 ,  邓莹楠 ,  王丛珊 ,  付胜男

IPC: C12Q1/68 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种细胞内miRNA定量方法。所述方法包括如下步骤：(1)离体的细胞经固定后进行细胞核染色；(2)向细胞中加入含有荧光探针的缓冲液，荧光探针与细胞内待检测miRNA发生可逆结合；(3)将细胞置于TIRF显微镜的载物台上进行检测，在明场下记录细胞形态，在宽场荧光记录细胞核位置，在HILO模式下记录单分子荧光强度-时间轨迹；(4)通过信号过滤，获得单分子荧光强度-时间轨迹呈现ON-OFF交替变化的单分子成像图，即为所述细胞内miRNA单分子成像图，经计数即得到细胞内miRNA的数量。本发明提供了一种“原位定量成像”的方式，利用高辨识度的单分子动力学指纹信号，对细胞内miRNA进行单分子定位与精准计数，突破胞内miRNA定量依赖于RNA提取的技术瓶颈。

公开(公告)号：CN107723341A

公开(公告)日：2018-02-23

申请号：CN201711045243.7

申请日：2017-10-31

Applicant: 北京化工大学

Inventor： 苏昕 ,  郝丹丹 ,  喻长远 ,  蔡爽 ,  张怡

IPC: C12Q1/6827

CPC classification number: C12Q1/6827 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2521/319

Abstract: 本发明涉及基因突变检测领域的一种检测单碱基突变的方法。该方法其包括以下步骤：S1，根据目标基因设计荧光信号探针；所述荧光信号探针与目标基因的突变型基因完全互补，与目标基因的野生型基因形成单碱基错配；S2，在含荧光信号探针的溶液中加入目标基因的待测样本和λ核酸外切酶，形成反应体系；S3，获取反应体系在反应过程中的实时荧光曲线，判断目标基因的待测样本中是否存在单碱基突变。本发明所述方法可以快速准确地对单碱基突变基因序列进行检测，且对单碱基突变基因序列具有高度的选择性，可用于低丰度突变检测。另外，所述方法的检测成本低廉、易于制备，操作简便，重复性高，易于推广到非专业人员操作。