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公开(公告)号:CN119639711A
公开(公告)日:2025-03-18
申请号:CN202311196220.1
申请日:2023-09-15
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体提供了热稳定性提高的逆转录酶UCRT vL突变体,该逆转录酶UCRT vL突变体包括4种单点突变体、6种双突变体、4种三突变体,与野生型逆转录酶UCRT vL相比,突变体在65℃下半衰期更长;三突变体效果更好,其半衰期大约是野生型逆转录酶UCRT的3倍。本发明还提供了包含该突变体的基因工程菌。通过本发明所提供的构建方法得到的逆转录酶UCRT vL突变体热稳定性更好,在较高温度下用于RNA逆转录为cDNA时,表现出较高的热稳定性,具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN119639710A
公开(公告)日:2025-03-18
申请号:CN202311195991.9
申请日:2023-09-15
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体提供了热稳定性提高的UCRT VI耐热型逆转录酶突变体,这种突变体包括4种单点突变体、6种双突变体、4种三突变体,与野生型UCRT VI耐热型逆转录酶相比,突变体在65℃下半衰期更长;双突变体效果更好,其半衰期大约是野生型DNA聚合酶的3倍。本发明还提供了包含该突变体的基因工程菌。通过本发明所提供的构建方法得到的UCRT耐热型逆转录酶突变体热稳定性更好,在较高温度下逆转录合成DNA时,表现出较高的热稳定性,具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN118064400A
公开(公告)日:2024-05-24
申请号:CN202410469408.7
申请日:2024-04-18
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 , 济南国科医工科技发展有限公司
Abstract: 本发明公开了一种高催化活性的S选择性ω‑转氨酶突变体及其构建方法和应用,该S选择性ω‑转氨酶突变体是通过将如SEQ ID NO.1所示的野生型ω‑转氨酶TbTA氨基酸序列的第263位异亮氨酸突变为丙氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或组氨酸得到的。本发明获得的突变体TbTA‑I263A、TbTA‑I263G催化苯乙酮的酶活相较于野生型提升67.83倍和61.26倍,热稳定性与野生型接近或更好;突变体TbTA‑I263C、TbTA‑I263M、TbTA‑I263V、TbTA‑I263F和TbTA‑I263H酶活分别提升11.85倍、8.76倍、3.56倍、3.49倍和2.55倍。
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公开(公告)号:CN114990082A
公开(公告)日:2022-09-02
申请号:CN202210738890.0
申请日:2020-12-30
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明提供了一种突变体,其氨基酸序列为SEQ ID NO.1上发生下列位点的突变:Q332K;Q332K、G34D;Q332K、S38R;Q332K、Y128R;Q332K、G34D、S38R;Q332K、G34D、Y128R;Q332K、S38R、Y128R;Q332K、G34D、S38R、Y128R。本发明提供的精氨酸氧化酶突变体与野生型精氨酸氧化酶相比,突变体热稳定性更好。通过本发明所提供的构建方法得到的精氨酸氧化酶突变体热稳定性更好,在较高的温度下氧化L‑精氨酸时,仍然表现出优良的催化活性,在L‑精氨酸生物传感器检测及生物化工等领域具有较高的应用潜力。
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公开(公告)号:CN112626044B
公开(公告)日:2022-08-19
申请号:CN202011624067.4
申请日:2020-12-30
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明提供了一种突变体,其氨基酸序列为如下(a)或(b):(a)至少取代、缺失或添加天然的精氨酸氧化酶的氨基酸序列的一个氨基酸,且与该序列具有90%以上同源性;或(b)至少取代、缺失或添加天然的精氨酸氧化酶的氨基酸序列的一个氨基酸,且与该序列具有相同的功能。本发明提供的精氨酸氧化酶突变体与野生型精氨酸氧化酶相比,突变体热稳定性更好。通过本发明所提供的构建方法得到的精氨酸氧化酶突变体热稳定性更好,在较高的温度下氧化L‑精氨酸时,仍然表现出优良的的催化活性,在L‑精氨酸生物传感器检测及生物化工等领域具有较高的应用潜力。
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公开(公告)号:CN112359032A
公开(公告)日:2021-02-12
申请号:CN202011250781.1
申请日:2020-11-11
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明涉及一种突变型酯酶及其应用、重组载体及其制备方法和应用、重组工程菌及其应用。该突变型酯酶包括:(a)、由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列缺失、替代或增加一个或多个氨基酸得到的多肽;或(b)、与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少90%同源性的多肽。上述突变型酯酶的热稳定性较好。
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公开(公告)号:CN110951705B
公开(公告)日:2020-09-25
申请号:CN201911327073.0
申请日:2019-12-20
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明涉及一种胺脱氢酶突变体、酶制剂、重组载体、重组细胞及其制备方法和应用。该胺脱氢酶突变体,由野生型胺脱氢酶的第104位的谷氨酸突变为丙氨酸后得到;或者,由野生型胺脱氢酶的第137位的天冬酰胺突变为脯氨酸后得到;或者,由野生型胺脱氢酶的第174位的缬氨酸突变为半胱氨酸后得到;或者,由野生型胺脱氢酶的第197位的缬氨酸突变为天冬氨酸后得到。上述胺脱氢酶的催化效率较高。
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公开(公告)号:CN111117979B
公开(公告)日:2020-08-21
申请号:CN202010036428.7
申请日:2020-01-14
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明涉及一种转氨酶突变体、酶制剂、重组载体、重组细胞及其制备方法和应用。该转氨酶突变体的氨基酸序列由野生型转氨酶的氨基酸序列发生突变得到,野生型转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,发生突变的氨基酸位点包括第226位氨基酸位点、第281位氨基酸位点、第312位氨基酸位点及第406位氨基酸位点中的至少一个。上述转氨酶突变体的酶活较高。
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公开(公告)号:CN119639709A
公开(公告)日:2025-03-18
申请号:CN202311195956.7
申请日:2023-09-15
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体提供了热稳定性提高的逆转录酶UCRT v6突变体,该逆转录酶UCRT v6突变体包括4种单点突变体、6种双突变体、4种三突变体,与野生型逆转录酶UCRT v6相比,突变体在65℃下半衰期更长;三突变体效果更好,其半衰期大约是野生型逆转录酶UCRT v6的5倍。本发明还提供了包含该突变体的基因工程菌。通过本发明所提供的构建方法得到的逆转录酶UCRT v6突变体热稳定性更好,在较高温度下用于RNA逆转录为cDNA时,表现出较高的热稳定性,具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN119193763A
公开(公告)日:2024-12-27
申请号:CN202411334801.1
申请日:2024-09-24
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种测定Bst DNA聚合酶绝对活性的方法,该方法为:以环状单链DNA为模板,在含有扩增引物和dATP的反应体系中,以待测Bst DNA聚合酶引发延伸复制反应,消耗反应体系中的dNTPs;然后根据预先构建的表征dATP的浓度与萤光值之间关系的标准曲线f1计算dATP的消耗量,再通过预先构建的表征Bst DNA聚合酶浓度与dATP消耗量之间关系的标准曲线f2计算得到Bst DNA聚合酶浓度,最后根据Bst DNA聚合酶的绝对活性定义计算得到待测Bst DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染,具有测定Bst DNA聚合酶聚合活性、绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点。
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