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公开(公告)号:CN117778629A
公开(公告)日:2024-03-29
申请号:CN202410052803.5
申请日:2024-01-12
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种利用三重RT‑qPCR检测蜱传脑炎、乙型脑炎和山羊关节炎脑炎的方法及试剂盒,属于分子生物学和核酸检测领域。该方法通过设置针对蜱传脑炎的C基因、乙型脑炎病毒的NS2A基因和山羊关节炎脑炎病毒基因组的gag基因的三组引物对和探针,通过RT‑qPCR方式测定达到荧光值的Ct值,依据判定规则确定是否感染病毒以及种类,该检测方法具有检测灵敏度高,特异性好、操作简便、快速的特点,适合在实际检测中推广应用。
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公开(公告)号:CN113135997B
公开(公告)日:2022-08-19
申请号:CN202110336260.6
申请日:2021-03-29
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/81 , C12N15/66 , C12N15/64 , C12P21/02 , A23B4/20 , A23C3/08 , C12R1/865
Abstract: 本发明提供了一种用于食品保鲜的杂合肽及其在酿酒酵母表达系统的基因表达方法,属于功能多肽筛选技术领域。为了克服现有技术的不足,本发明提供一种用于食品保鲜的杂合肽及其在酿酒酵母表达系统的基因表达方法,该杂合肽融合了猪源抗菌肽cecropin P1的活性区域和牛源抗菌肽的活性区域的优势获得新型的杂合肽,通过人工合成杂合肽基因并将目的基因连接在质粒pYES2‑ɑ上获得新型杂合肽重组酵母菌株,使用半乳糖诱导其表达,上清液进一步纯化后即可用于食品保鲜,尤其对于新鲜猪肉保鲜和牛奶保鲜具有很好的效果。
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公开(公告)号:CN114181953A
公开(公告)日:2022-03-15
申请号:CN202111572371.3
申请日:2021-12-21
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明涉及一种携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆的制备方法及其应用,属于分子生物学领域。为了克服黄病毒NS2A研究过程中缺乏针对NS2A的特异性抗体的技术不足,本发明提供一种携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆的制备方法,并公开了其应用。本发明通过在NS1与NS2A之间插入HA标签,通过HA标签来指示NS2A,同时为避免影响NS2A荧光信号的观察,对NS2A第30个氨基酸进行点突变,以干扰NS2A的茎环结构,消除病毒复制过程的‑1核糖体移码。本发明所述的携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆对于黄病毒的研究具有重要的价值。
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公开(公告)号:CN110396502A
公开(公告)日:2019-11-01
申请号:CN201910736306.6
申请日:2019-08-09
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/65
Abstract: 本发明公开了一种对JEV易感的猪扁桃体细胞系的构建方法,该方法包含:获得原代猪扁桃体细胞,并进行培养;以pHY-sv40-Puro作为慢病毒载体,以psPAX2和pCMV-VSV-G作为辅助包装载体,共同转染进入293T细胞中,获得慢病毒颗粒;将慢病毒颗粒感染经培养后的原代猪扁桃体细胞系;经过感染后,将猪扁桃体细胞在含血清的DMEM/F12培养液中添加嘌呤霉素进行细胞筛选,获得阳性细胞;将阳性细胞用不含嘌呤霉素的培养液扩大培养,得到扁桃体上皮细胞传代细胞系。本发明的方法以猪扁桃体细胞作为宿主细胞,通过感染的方法得到JEV易感的猪扁桃体细胞系,该细胞系对JEV敏感,可以用于相关研究。
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公开(公告)号:CN110129485A
公开(公告)日:2019-08-16
申请号:CN201910496763.2
申请日:2019-06-10
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种快速鉴别非洲猪瘟病毒核酸的检测试剂盒及其检测方法,属生物技术领域,本发明筛选出1对特异性高、敏感性强的RPA引物和能强烈激活CRISPR-Cas12a切割酶活性的cr RNA靶点序列,通过RPA技术联合CRISPR-Cas12a特异性切割方法建立了一种即时快速的准确鉴别非洲猪瘟病毒核酸的方法,该方法对实验条件和检测仪器设备要求不高,室温条件即可完成检测过程,另外该方法检测速度快,温育半小时内即可以靶向切割分子探针释放荧光信号,检测结果更加精准可靠,适合进一步推广应用。
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公开(公告)号:CN119242595A
公开(公告)日:2025-01-03
申请号:CN202411435986.5
申请日:2024-10-14
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明属于分子生物学领域,涉及一种GI型日本脑炎病毒弱毒疫苗株SD12‑F120株及其感染性克隆的构建与应用。为了克服现有的GIII型的JEV疫苗难以对GI型JEV提供完全的保护,且目前实际应用中缺少GIII型的JEV疫苗的技术不足,本发明提供一种GI型日本脑炎病毒弱毒疫苗株SD12‑F120及其感染性克隆构建方法,所述弱毒疫苗株SD12‑F120的cDNA序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述弱毒疫苗株SD12‑F120对GI型日本脑炎病毒具有良好的免疫原性和保护效果,为预防GI型日本脑炎病毒病疫苗的开发和疫苗株的筛选提供了新的选择。
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公开(公告)号:CN119193918A
公开(公告)日:2024-12-27
申请号:CN202410712828.3
申请日:2024-06-04
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: WNV基因检测靶序列及其引物组合、试剂盒、检测方法,通过WNV全基因组覆盖筛选共筛选出11组靶序列,并选取其中相对其他位置更加稳定的五段序列中的至少一组作为微量WNV基因检测的靶序列,五段序列为SEQ ID No.1~SEQ ID No.5所示的核苷酸序列。本发明通过将候鸟粪便中提取的核酸样本利用本发明特殊设计的引物组合进行PCR/qPCR扩增,快速判断出候鸟中WNV病原体的携带情况,为疾病的预防、控制及治疗提供可靠的检测数据;本发明能实现在鸟粪便样品中对WNV的微量检测,检测方法操作简便,且结果可靠。
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公开(公告)号:CN119192399A
公开(公告)日:2024-12-27
申请号:CN202411367573.8
申请日:2024-09-29
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K19/00 , C07K1/22 , C12N15/62 , C12N15/866 , A61K39/295 , A61K39/12 , A61K39/23 , A61P31/14 , A61P31/20
Abstract: 本发明涉及疫苗制备技术领域,尤其涉及一种日本脑炎病毒与猪细小病毒的二联病毒样颗粒疫苗的制备方法及其应用。本发明提供了一种日本脑炎病毒与猪细小病毒的融合蛋白,氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的融合蛋白是通过杆状病毒系统表达得到的,本发明的EMP‑VP2重组融合蛋白具有良好的免疫反应性,能够被anti‑His单克隆抗体以及JEV和PPV的阳性血清特异性识别,且对小鼠和豚鼠也具有良好的免疫反应,能够分别在小鼠和豚鼠体内激活JEV和PPV特异性体液免疫反应。为JEV和PPV的防控与二联亚单位疫苗的研发奠定了坚实的基础。
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公开(公告)号:CN118383391A
公开(公告)日:2024-07-26
申请号:CN202410518558.2
申请日:2024-04-26
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了一种灭幼蚊驱成蚊的复方植物精油及其制备方法和应用,属于驱蚊精油技术领域,本发明所述复方植物精油包括肉桂精油、香茅精油、留兰香油和荆芥油;所述肉桂精油、香茅精油、留兰香油和荆芥油的体积比为(0.5~3):(0.5~3):1:(0.5~3);本发明还提供了所述的复方植物精油在制备驱蚊产品中的应用。将所述复方植物精油用水稀释后获得驱蚊产品;所述驱蚊产品中复方植物精油的浓度为50~150mL/m3。本发明所述复方植物精油对幼蚊的杀灭和成蚊的驱避具有良好效果,可应用于灭幼蚊驱成蚊的药物。
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公开(公告)号:CN117925544A
公开(公告)日:2024-04-26
申请号:CN202310553364.1
申请日:2023-05-17
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供一种猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒株及其制备方法和应用。一种猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒株,所述弱毒株是将猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV的非结构蛋白NSP4进行突变获得的,所述NSP4蛋白的氨基酸序列与SEQ ID NO:2~7中任意一种具有至少95%、或至少98%、或至少99%的序列一致性,所述突变是在SEQ ID NO:2~7中任意一种所示氨基酸序列的第76位、第111位、第115位、第155位、第173位、第186位进行单位点突变或多位点突变。本发明提供的猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒株促进β2M分子和SLA‑1分子的表达,不仅能够诱导更好的细胞免疫,而且能够使其毒力进一步降至到更低的水平。
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