公开(公告)号：CN110468107A

公开(公告)日：2019-11-19

申请号：CN201910735386.3

申请日：2019-08-09

Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)

Inventor： 马志永 ,  刘珂 ,  郗淑敏 ,  邵东华 ,  魏建超 ,  李蓓蓓 ,  邱亚峰

IPC: C12N5/10 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种对JEV易感的猪扁桃体细胞系，该细胞系通过慢病毒颗粒感染原代猪扁桃体细胞系，并在添加嘌呤霉素的含血清的DMEM/F12培养液中进行细胞筛选，再将阳性细胞用不含嘌呤霉素的培养液扩大培养获得的；该慢病毒颗粒是通过以pHY-sv40-Puro作为慢病毒载体，以psPAX2和pCMV-VSV-G作为辅助包装载体，共同转染进入293T细胞中获得的。本发明的细胞系具有无限传代的功能，对JEV敏感，可以用于相关研究。

公开(公告)号：CN110396502A

公开(公告)日：2019-11-01

申请号：CN201910736306.6

申请日：2019-08-09

Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)

Inventor： 马志永 ,  郗淑敏 ,  刘珂 ,  邵东华 ,  魏建超 ,  李蓓蓓 ,  邱亚峰

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  C12N15/65

Abstract: 本发明公开了一种对JEV易感的猪扁桃体细胞系的构建方法，该方法包含：获得原代猪扁桃体细胞，并进行培养；以pHY-sv40-Puro作为慢病毒载体，以psPAX2和pCMV-VSV-G作为辅助包装载体，共同转染进入293T细胞中，获得慢病毒颗粒；将慢病毒颗粒感染经培养后的原代猪扁桃体细胞系；经过感染后，将猪扁桃体细胞在含血清的DMEM/F12培养液中添加嘌呤霉素进行细胞筛选，获得阳性细胞；将阳性细胞用不含嘌呤霉素的培养液扩大培养，得到扁桃体上皮细胞传代细胞系。本发明的方法以猪扁桃体细胞作为宿主细胞，通过感染的方法得到JEV易感的猪扁桃体细胞系，该细胞系对JEV敏感，可以用于相关研究。