公开(公告)号：CN106546748B

公开(公告)日：2018-08-17

申请号：CN201610944110.2

申请日：2016-11-02

Applicant: 南昌大学

Inventor： 熊勇华 ,  熊颖 ,  黄小林 ,  熊斯诚 ,  江湖 ,  赖卫华

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/58 ,  G01N33/543 ,  G01N33/533

Abstract: 本发明提供了一种以量子点荧光微球为竞争抗原载体的黄曲霉毒素B1检测方法，该方法利用包埋有量子点的荧光微球替代常规的酶载体与黄曲霉毒素B1偶联，以偶联产物作为竞争抗原执行直接竞争ELISA。在技术路线中，本发明首先依据发光特性选择了适宜的量子点，进一步设计了基于荧光微球技术的量子点包埋方法，在此基础上，将量子点荧光微球经BSA包被后与黄曲霉毒素B1偶联，从而得到了性能更好的竞争性抗原。该技术方案中，荧光微球通过高聚物载体包埋了大量的量子点，因而具有更高的发光强度，可有效地提高检测的灵敏度；而且，由于荧光微球具有较大的粒径，因此可在一定程度上降低竞争抗原与包被抗体之间过高的亲和力，从而提升检测的灵敏度。

公开(公告)号：CN105527428B

公开(公告)日：2018-01-16

申请号：CN201610034284.5

申请日：2016-01-19

Applicant: 南昌大学

Inventor： 赖卫华 ,  王景云 ,  刘道峰 ,  邓省亮 ,  山珊 ,  熊勇华 ,  魏华

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/558

Abstract: 本发明提供了一种快速检测大肠杆菌O157：H7的检测方法。方案将Fe3O4/Ru(bqy)32+纳米微球富集细菌，制备试纸条，上样检测。免去了将大肠杆菌O157：H7从免疫磁珠中洗脱下来的步骤，提高了捕获效率；免去了将Ru(bqy)32+纳米微球喷在结合垫上的步骤，免疫学反应更加均一，定量检测时变异系数小；减少了工作量和杂菌污染概率。检测方案灵敏度非常高、稳定性很好。

公开(公告)号：CN105759045B

公开(公告)日：2017-12-15

申请号：CN201610156884.9

申请日：2016-03-18

Applicant: 南昌大学

Inventor： 熊勇华 ,  江湖 ,  黄小林 ,  段宏 ,  郑玲燕 ,  许恒毅

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/535

Abstract: 本发明提供了一种针对黄曲霉毒素B1的检测方法，该方法基于直接竞争ELISA技术，先将单抗包被后，加入待测样品和触酶C100标记的黄曲霉毒素B1，样品中的黄曲霉毒素B1与触酶标记的黄曲霉毒素B1竞争性的与酶标板上固定的单克隆抗体结合，通过触酶催化双氧水分解，降低对巯基丙酸修饰的碲化镉量子点的荧光淬灭，根据荧光强度来判断样品中黄曲霉毒素B1的含量。本发明创新性的引入了新的过氧化氢酶，在降低成本的同时提升了反应精度；与此同时，本发明使用了更为灵敏的新型荧光底物巯基丙酸修饰的碲化镉量子点，较传统的TMB底物发光灵敏性显著提升。

公开(公告)号：CN105785019A

公开(公告)日：2016-07-20

申请号：CN201610156409.1

申请日：2016-03-18

Applicant: 南昌大学

Inventor： 熊勇华 ,  黄小林 ,  许恒毅 ,  陈锐 ,  梁毅 ,  湛胜楠 ,  裴可 ,  熊颖 ,  段宏 ,  郑玲燕 ,  周耀峰

IPC: G01N33/58 ,  G01N33/577 ,  G01N33/574 ,  G01N33/573

CPC classification number: G01N33/581 ,  G01N33/573 ,  G01N33/57434 ,  G01N33/588

Abstract: 本发明提供了一种针对前列腺特异抗原的检测方法，该方法先将前列腺特异抗原与包被的多克隆抗体结合，接着连接生物素化的单克隆抗体，再连接链霉亲和素标记的触酶C100，通过触酶催化双氧水分解，降低对巯基丙酸修饰的碲化镉量子点的荧光淬灭，根据荧光强度的高低来判断样品中前列腺特异抗原的浓度。该方法基于双抗夹心酶联免疫技术，并采用了生物素?亲合素系统用于反应的放大。更为重要的是，由于本发明采用了新的抗体标记酶(触酶C100)和更为灵敏的荧光底物(碲化镉量子点)，并匹配了有效的反应条件，使得检测灵敏性得到显著提升，同时降低成本、提升检测效率，因此具有良好的推广前景。

公开(公告)号：CN105759044A

公开(公告)日：2016-07-13

申请号：CN201610156864.1

申请日：2016-03-18

Applicant: 南昌大学

Inventor： 熊勇华 ,  江湖 ,  黄小林 ,  裴可 ,  熊颖 ,  许恒毅

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/535

CPC classification number: G01N33/577 ,  G01N33/535

Abstract: 本发明提供了一种针对黄曲霉毒素M1的检测方法，该方法基于直接竞争ELISA技术，先将单抗包被后，加入待测样品和触酶C100标记的黄曲霉毒素M1，样品中的黄曲霉毒素M1与触酶标记的黄曲霉毒素M1竞争性的与酶标板上固定的单克隆抗体结合，通过触酶催化双氧水分解，降低对巯基丙酸修饰的碲化镉量子点的荧光淬灭，根据荧光强度来判断样品中黄曲霉毒素M1的含量。本发明创新性的引入了新的过氧化氢酶，在降低成本的同时提升了反应精度；与此同时，本发明使用了更为灵敏的新型荧光底物巯基丙酸修饰的碲化镉量子点，较传统的TMB底物发光灵敏性显著提升。

公开(公告)号：CN105759032A

公开(公告)日：2016-07-13

申请号：CN201610156913.1

申请日：2016-03-18

Applicant: 南昌大学

Inventor： 许恒毅 ,  熊勇华 ,  黄小林 ,  赖卫华 ,  陈锐 ,  湛胜楠

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/535

CPC classification number: G01N33/56916 ,  G01N33/535 ,  G01N2333/245

Abstract: 本发明提供了一种针对大肠杆菌O157：H7的检测方法，该方法先将大肠杆菌O157：H7与包被的多克隆抗体结合，接着连接生物素化的单克隆抗体，再连接链霉亲和素标记的触酶C100，通过触酶催化双氧水分解，降低对巯基丙酸修饰的碲化镉量子点的荧光淬灭，根据荧光强度的高低来判断样品中大肠杆菌O157：H7的浓度。该方法基于双抗夹心酶联免疫技术，并采用了生物素?亲合素系统用于反应的放大。更为重要的是，由于本发明采用了新的抗体标记酶(触酶C100)和更为灵敏的荧光底物(碲化镉量子点)，并匹配了有效的反应条件，使得检测灵敏性得到显著提升，同时降低成本、提升检测效率，因此具有良好的推广前景。

公开(公告)号：CN105651993A

公开(公告)日：2016-06-08

申请号：CN201610031644.6

申请日：2016-01-19

Applicant: 南昌大学

Inventor： 赖卫华 ,  王景云 ,  刘道峰 ,  邓省亮 ,  山珊 ,  熊勇华 ,  魏华

IPC: G01N33/558 ,  G01N33/577

CPC classification number: G01N33/558 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明提供了一种快速检测金黄色葡萄球菌的检测方法。方案将Fe3O4/Ru(bqy)32+纳米微球富集细菌，制备试纸条，上样检测。免去了将金黄色葡萄球菌从免疫磁珠中洗脱下来的步骤，提高了捕获效率；免去了将Ru(bqy)32+纳米微球喷在结合垫上的步骤，免疫学反应更加均一，定量检测时变异系数小；减少了工作量和杂菌污染概率。检测方案灵敏度非常高、稳定性很好。

公开(公告)号：CN105651991A

公开(公告)日：2016-06-08

申请号：CN201610034173.4

申请日：2016-01-19

Applicant: 南昌大学

Inventor： 赖卫华 ,  王景云 ,  刘道峰 ,  邓省亮 ,  山珊 ,  熊勇华 ,  魏华

IPC: G01N33/543 ,  G01N33/569

CPC classification number: G01N33/54326 ,  G01N33/56916

Abstract: 本发明提供了一种快速检测阪崎肠杆菌的检测方法。方案将Fe3O4/Ru(bqy)32+纳米微球富集细菌，制备试纸条，上样检测。免去了将阪崎肠杆菌从免疫磁珠中洗脱下来的步骤，提高了捕获效率；免去了将Ru(bqy)32+纳米微球喷在结合垫上的步骤，免疫学反应更加均一，定量检测时变异系数小；减少了工作量和杂菌污染概率。检测方案灵敏度非常高、稳定性很好。

公开(公告)号：CN105548551A

公开(公告)日：2016-05-04

申请号：CN201610032264.4

申请日：2016-01-19

Applicant: 南昌大学

Inventor： 赖卫华 ,  王景云 ,  刘道峰 ,  邓省亮 ,  山珊 ,  熊勇华 ,  魏华

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/558 ,  G01N33/543

CPC classification number: G01N33/577 ,  G01N33/54346 ,  G01N33/558 ,  G01N33/56911

Abstract: 本发明提供了一种快速检测副溶血性弧菌的检测方法。方案将Fe3O4/ Ru(bqy)32+纳米微球富集细菌，制备试纸条，上样检测。免去了将副溶血性弧菌从免疫磁珠中洗脱下来的步骤，提高了捕获效率；免去了将Ru(bqy)32+纳米微球喷在结合垫上的步骤，免疫学反应更加均一，定量检测时变异系数小；减少了工作量和杂菌污染概率。检测方案灵敏度非常高、稳定性很好。

公开(公告)号：CN103665160B

公开(公告)日：2016-04-13

申请号：CN201310637575.X

申请日：2013-12-03

Applicant: 南昌大学

Inventor： 熊勇华 ,  许恒毅 ,  罗薇 ,  魏华 ,  赖卫华 ,  黄小林

IPC: C07K16/14 ,  C07K16/44 ,  C07K16/12 ,  C07K1/13

Abstract: 本发明公开了适合规模化高效纯化水溶性氧化铁纳米粒子与IgG类单克隆抗体偶联物的方法，属生物技术领域。针对目前氧化铁纳米粒子抗体偶联物纯化工艺复杂，回收率低，难以规模化生产，本发明通过采用单端氨基化聚乙二醇封闭氧化铁纳米粒子与抗体偶联物的残留羧基，降低偶联产物的表面ζ电位，调整溶液pH值至4.5～5.0，进一步降低偶联产物在溶液中的净电荷含量、实现普通高速离心法规模化高效纯化氧化铁纳米粒子与抗体偶联物。本发明简化了氧化铁纳米粒子与抗体偶联物的实验操作流程，降低了对分离设备的要求，适合大批量纯化氧化铁纳米粒子IgG类单克隆抗体偶联物，得率在90%以上，且偶联产物的光特性以及生物活性未见明显变化。