一株含突变纳豆激酶重组基因的工程菌及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN113005045B

    公开(公告)日:2023-06-16

    申请号:CN202110269600.8

    申请日:2021-03-12

    Applicant: 辽宁大学

    Abstract: 本发明涉及一株含突变纳豆激酶重组基因的工程菌及其构建方法和应用。以枯草芽孢杆菌基因为模板,PCR扩增得纳豆激酶前导肽‑成熟肽基因片段NKt;以NKt基因片段为模板,扩增NKt194突变片段;将NKt194突变片段按毕赤酵母X33密码子偏好性进行优化和合成得NKt2;构建PGAPZα‑A‑NKt2,将PGAPZα‑A‑NKt2转化毕赤酵母X33构建真核表达系统的纳豆激酶重组基因工程菌株;培养纳豆激酶重组基因工程菌株,诱导纳豆激酶表达。本发明成功构建一株突变纳豆激酶重组基因工程菌LNF012及在真核系统中表达,使原核生物的纳豆激酶基因在真核生物体系中成功表达,为今后纳豆激酶大规模的应用奠定了基础。

    一种杀虫脒检测试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN109917127A

    公开(公告)日:2019-06-21

    申请号:CN201910203633.5

    申请日:2019-03-18

    Applicant: 辽宁大学

    Abstract: 本发明公开了一种杀虫脒检测试剂盒及其应用。所述试剂盒包括:含有包被了杀虫脒-OVA偶联物的微量测试孔的酶标板、系列杀虫脒标准溶液、杀虫脒-BSA多克隆抗体、清洗缓冲液、抗体稀释液、HRP标记的山羊抗兔二抗、底物溶液A、底物溶液B和反应终止液。本发明还公开了使用上述试剂盒检测杀虫脒的方法。本发明的杀虫脒检测试剂盒,可用于检测水产品及饲养水产品的水样。该试剂盒简化了样品处理方式,使用简便,整个操作过程一个小时左右,回收率和灵敏度较高。

    一种小鼠截短IL-36α蛋白的生产方法

    公开(公告)号:CN109576277A

    公开(公告)日:2019-04-05

    申请号:CN201910043737.4

    申请日:2019-01-17

    Applicant: 辽宁大学

    Abstract: 本发明涉及一种小鼠截短IL-36α蛋白的生产方法。包括以下步骤:小鼠截短IL-36α蛋白基因密码子优化与合成;PCR扩增获得小鼠截短IL-36α片段;构建pET28a-mIL-36α重组载体;将pET28a-mIL-36α转化大肠杆菌BL21,构建重组工程菌;诱导小鼠截短IL-36α蛋白表达,该工程菌表达的重组小鼠截短IL-36α主要为可溶蛋白;用Ni-NAT对表达的小鼠截短IL-36α蛋白进行纯化即可得到较高纯度的小鼠截短IL-36α蛋白。本发明小鼠截短IL-36α蛋白的成功制备,为探究IL-36α在各种小鼠炎症疾病模型中的作用及其分子机制奠定了基础。

    一种嗜水气单胞菌特异性引物及其在大菱鲆养殖过程中的应用

    公开(公告)号:CN105969850A

    公开(公告)日:2016-09-28

    申请号:CN201610311630.X

    申请日:2016-05-11

    Applicant: 辽宁大学

    CPC classification number: C12Q1/689 C12Q1/686 C12Q2565/125 C12Q2527/101

    Abstract: 本发明涉及一种嗜水气单胞菌特异性引物及其在大菱鲆养殖过程中的应用。本发明所设计的嗜水气单胞菌特异性引物由上游引物F:CGACGTGTTTGGCGATATTTTTG和下游引物R:GTCTTGGTCTTCTGGTAGCGA构成。本发明设计的嗜水气单胞菌特异性引物,能有效从各常见致病菌株中区分出嗜水气单胞菌,表现出很强的特异性和灵敏性。本发明所提供的在大菱鲆养殖过程中嗜水气单胞菌的PCR检测方法,使得养殖过程中嗜水气单胞菌的检测更为简便。本发明方法的确立为今后大菱鲆养殖过程中高发致病菌的检测和分析提供了必要的理论依据和完善的方法体系,同时为促进我国养殖产业的规模化健康发展奠定了基础。

    一种从“太岁”中提取基因组的方法

    公开(公告)号:CN101705224A

    公开(公告)日:2010-05-12

    申请号:CN200910220112.7

    申请日:2009-11-24

    Applicant: 辽宁大学

    Abstract: 本发明涉及一种从“太岁”中提取基因组的方法。采用的技术方案是:a)将“太岁”组织经裂解液研磨,得研成碎末的“太岁”组织液;b)向研成碎末的“太岁”组织液中加入氯仿-异戊醇,摇匀,离心,取上清液;c)在约72℃水浴中停留约3min,置于冰浴中,取出自然升温至室温;d)加入2~7mol/L的除蛋白溶剂,使除蛋白溶剂终浓度为约1mol/L;e)重复b)至d)步骤,直至加入氯仿-异戊醇,离心后,两层界面看不到蛋白物质,取上清液;f)加入经-20℃预冷的95%乙醇,混匀,有絮状沉淀析出,离心收集沉淀。应用本发明,成功的从“太岁”中获得了基因组,为“太岁”的分子生物学研究打下了基础。

Patent Agency Ranking