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公开(公告)号：CN110684754B
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN201911024030.5
申请日：2019-10-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种真菌毒素ZEN降解酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明公开了来源于Gliocladium roseum MA918的玉米赤霉烯酮降解酶(简称ZENG酶)作为亲本，利用基因突变技术，第134位的组氨酸His和136位的丝氨酸Ser同时替换成苯丙氨酸Phe，得到双突变体H134F/S136F。最适催化条件下，酶在53℃保温2min后残余酶活提高了36％；保温5min后的残余酶活提高了33％；保温7min后残余酶活提高了12％。在58℃保温2min后残余酶活提高了34％，保温5min后的残余酶活提高了13％。
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公开(公告)号：CN110669745B
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN201911023315.7
申请日：2019-10-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的玉米赤霉烯酮降解酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明以氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的玉米赤霉烯酮降解酶为亲本酶，将第134位的组氨酸His和136位的丝氨酸Ser同时替换成亮氨酸Leu，得到双突变体H134L/S136L。H134L/S136L在53℃保温2min后残余酶活提高了45％；保温5min后的残余酶活分别提高了38％；保温7min后残余酶活提高了38％。在58℃保温2min后残余酶活提高了41％，保温5min后的残余酶活提高了32％。这一发现对于制备高热稳定性的工业化玉米赤酶烯酮降解酶具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN113308449A
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN202110701935.2
申请日：2021-06-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了热稳定性提高的玉米赤霉烯酮内酯水解酶的突变体S162P及其应用，属于酶工程技术领域。本发明将来源于微生物GliocladiumroseumMA918的玉米赤霉烯酮内酯水解酶酶作为亲本，利用基因突变技术，将162位的丝氨酸(S)突变为脯氨酸(P)，获得单点突变体S162P。与野生酶相比，在原始催化活力未发生明显变化的基础上，突变体酶的热稳定性显著提升：突变体酶在50℃保温2min后残余酶活提高为野生酶的1.52倍；在48℃分别保温10min和20min后，仍具有约80％和58％的残余酶活，在48℃的半衰期也提高为野生酶的3.6倍。为实现ZEN内酯水解酶的工业化应用打下了一定的基础。
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公开(公告)号：CN113201512A
公开(公告)日：2021-08-03
申请号：CN202110613892.2
申请日：2021-06-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产蔗果三糖的菊糖蔗糖酶突变体，属于酶的基因工程技术领域。本发明将来源于微生物Lactobacillus reuteri 121的部分序列截断的菊糖蔗糖酶作为亲本，构建了单点突变体酶R425W。R425W显著改变了产物链长，使菊糖蔗糖酶失去合成多糖的能力，大量积累低聚果糖，尤其是蔗果三糖。经反应条件优化，R425W生产蔗果三糖的产量最高可达206g/L。生产条件为pH 6.5的磷酸盐缓冲液，45℃，700g/L的蔗糖，15μg/mL的加酶量，反应时间为36h。这一发现对于工业化制备蔗果三糖，以及菊糖蔗糖酶的工业化应用有重要的研究价值。
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公开(公告)号：CN108018269B
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN201810060609.6
申请日：2018-01-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的果聚糖蔗糖酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明将来源于微生物Brenneria sp.EniD312的果聚糖蔗糖酶作为亲本，利用基因突变技术，将其404位的谷氨酸Glu替换成色氨酸Trp，获得单突变体酶E404W；在最适催化条件下，酶催化底物蔗糖合成β‑(2,1)果聚糖levan的总酶活在35℃的半衰期由原来的4h提高到52h，45℃的半衰期由原来的2.1h提高到12.5h，55℃的半衰期由原来的42min提高到104min，这一发现对于工业化制备果聚糖levan具有重要的研究价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118792274A
公开(公告)日：2024-10-18
申请号：CN202411060047.7
申请日：2024-08-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种酶活和热稳定性提高的菊糖蔗糖酶突变体及其应用，其菊糖蔗糖酶突变体是以来源于微生物Lactobacillus.mulieris UMB7800的菊糖蔗糖酶作为亲本，利用基因突变技术，将其250位的丙氨酸Ala替换成缬氨酸Val、将344位的丝氨酸Ser替换成天冬氨酸Asp、将434位的组氨酸替换成脯氨酸、将526位的谷氨酸替换成天冬氨酸、将531位的甘氨酸替换成脯氨酸而获得的，其氨基酸序列如SEQ ID No:1所示；本发明获得的菊糖蔗糖酶突变体在最适催化条件下催化底物蔗糖合成菊糖过程中，相对总酶活相较于未突变前提升了66％，55℃下半衰期约提高了4倍。
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公开(公告)号：CN118652866A
公开(公告)日：2024-09-17
申请号：CN202410913164.7
申请日：2024-07-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种脱氧雪腐镰刀烯醇降解酶突变体及其应用，所述脱氧雪腐镰刀烯醇降解酶突变体，是将来源于西藏祝有海氏菌(Youhaiellatibetensis)的脱氧雪腐镰刀烯醇毒素降解酶的第465位苏氨酸Thr替换为亮氨酸Leu获得的；其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明所获得脱氧雪腐镰刀烯醇降解酶突变体在热稳定性和对底物脱氧雪腐镰刀烯醇毒素的降解效率上表现显著，较野生型酶均有较大的提高。
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公开(公告)号：CN115417507B
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202210737434.4
申请日：2022-06-21
Applicant: 江南大学
IPC: C02F3/34 , B09C1/10 , C09K17/14 , C12N9/02 , C02F101/38
Abstract: 本发明公开了一种高效降解兽药抗生素残留的漆酶及其应用，属于环境生物技术领域。本发明筛选到一种来源于Lysinibacillus fusiformis的漆酶，相比现有的技术，本发明筛选到的漆酶能够耐受80℃的高温，具有在更高温度下长时间稳定降解抗生素，良好的耐热性和优异的降解效率等能力。能够在短时间内降解大量抗生素，并且生产成本低，所用设备少，有助于工业上对兽药抗生素残留的控制。
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公开(公告)号：CN116083409A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202310160691.0
申请日：2023-02-23
Applicant: 江南大学 , 中国科学院天津工业生物技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种酮糖3‑差向异构酶固定化酶的制备方法及其应用，属于固定化酶制备技术领域，本发明分为以下步骤：第一步，对阴离子交换树脂进行预处理；第二步，离子交换树脂吸附蛋白酶；第三步，加入戊二醛进行交联。本发明制备的固定化酶制备简单，价格低廉，反应条件简单温和。固定化提高了酶的相对活性和稳定性，制备得到的固定化酶结合牢靠，可进行多次酶催化反应。这一发现对于工业化制备D‑阿洛酮糖具有重要的研究价值。
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公开(公告)号：CN115960879A
公开(公告)日：2023-04-14
申请号：CN202310086878.0
申请日：2023-01-30
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/90 , C12N15/61 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/24 , C12P19/02 , C12Q1/533 , G01N21/35 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体文库的高通量筛选方法及获得的突变体，属于酶工程技术领域。本发明所提供的高通量筛选方法是基于在酸性Si(IV)–Mo(Ⅵ)显色液中，D‑果糖可将黄色钼酸盐Mo(Ⅵ)还原，生成蓝色钼酸盐Mo(V/Ⅵ)，其颜色深浅在一定范围内与D‑果糖的含量成正比，且在相同浓度水平下，D‑阿洛酮糖不会干扰D‑果糖的测定。同时，本发明还提供了D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶四点突变体，与该酶野生型相比，其在60℃下孵育1h后的残余酶活提升69.8％，最适温度提高5℃，在60℃下的半衰期值由0.64h增加到7.30h，因此其工业应用潜力得到明显提升。
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