一种底物特异性提高的胆固醇氧化酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN105274071A

    公开(公告)日:2016-01-27

    申请号:CN201510788289.2

    申请日:2015-11-17

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12N9/0006 A61K38/00 C12Y101/03006

    Abstract: 本发明公开了一种底物特异性提高的胆固醇氧化酶突变体及其应用,属于酶工程技术领域。本发明的突变体,是在Rhodococcus sp.源(以前被分类命名为Brevibacterium sp.DGCDC-82)的胆固醇氧化酶的基础上进行氨基酸删除突变得到的。原始的Rhodococcus sp.源的胆固醇氧化酶对胆固醇,谷甾醇,孕烯酮醇,胆甾烷醇这4种底物的活性差不多,而本发明的突变体CODr-M1的底物特异性有显著变化,对孕烯酮醇的活性最高,是对胆固醇的活性的5.3倍。通过本发明的方法,有效提高了胆固醇氧化酶对底物孕烯酮醇的特异性。

    一种增强铁氧化菌种浸出黄铜矿的方法

    公开(公告)号:CN105256133A

    公开(公告)日:2016-01-20

    申请号:CN201510705297.6

    申请日:2015-10-27

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: Y02P10/234

    Abstract: 本发明公开了一种增强铁氧化菌种浸出黄铜矿的方法,属于生物浸出技术领域。本发明方法,包括在以9K-黄铜矿复合培养基的基础上,培养中后期采用脉冲式补料添加亚铁能源底物,实现对氧化铁硫杆菌的高密度培养;采用离心和9K培养基悬浮洗脱细胞除去黄钾铁矾,并采用这种不含黄钾铁矾的细胞接种,适当提高接种量的同时,补充计入亚铁离子缩短延滞期;在浸出后期逐级式的降低浸出液的pH,减少黄钾铁矾的积累,实现全程改善黄铜矿浸出。本发明方法可以更高效的培养铁氧化菌种、缩短延滞期、减弱黄钾铁矾积累造成的钝化效应,强化铁代谢的同时改善黄铜矿浸出过程,并且操作简单易行,适于大规模推广应用。

    一株硫氧化细菌及用其去除硫化物的方法

    公开(公告)号:CN103667096B

    公开(公告)日:2015-09-23

    申请号:CN201310233918.6

    申请日:2013-06-14

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一株硫氧化细菌及用其去除硫化物的方法,属于生物和环境保护技术领域。本发明公开了一株硫氧化细菌,分类命名为嗜热硫杆菌(Themithiobacillus tepidarius )JNU-2,保藏编号为:CCTCC NO:M2013217。该菌对硫化合物的氧化效率很高而且高效的产生高附加值的副产物单质硫。本发明还涉及一种将该菌株应用于气升式内循环连续操作好氧反应装置去除含硫废液中硫化物的方法,在该反应器中应用JNU-2进行硫化合物去除,在水力停留时间(HRT)为10h时,单质硫产率为0.15g L-1h-1,单质硫生成率为60%左右,硫代硫酸盐氧化率98%以上。本发明的气升式内循环连续操作好氧反应装置表现良好,有望应用于大规模生产含硫废液中硫化物的去除。

    肌氨酸氧化酶亲和介质及其合成和纯化肌氨酸氧化酶的方法

    公开(公告)号:CN103055825B

    公开(公告)日:2014-06-25

    申请号:CN201310022527.X

    申请日:2013-01-21

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 肌氨酸氧化酶亲和介质及其合成和纯化肌氨酸氧化酶的方法,属于生物工程技术领域。本发明所述一种肌氨酸氧化酶亲和介质,由肌氨酸氧化酶亲和配体和层析介质连接而成,较佳地,肌氨酸氧化酶亲和配体是底物类似物4-氨基吡咯-2-羧酸,所述层析介质是Sepharose或聚壳聚糖,还提供了上述肌氨酸氧化酶亲和介质的合成方法,以及利用上述的肌氨酸氧化酶亲和介质大规模纯化肌氨酸氧化酶的方法。利用本发明的肌氨酸氧化酶亲和介质可以大规模快速分离纯化肌氨酸氧化酶,可在仅用一步亲和层析的情况下,得到肌氨酸氧化酶纯品,整个纯化步骤消耗时间短,蛋白和活性回收率较高,适于大规模推广应用。

    一种富含还原型谷胱甘肽的黄酒的生产方法及由其制造的黄酒

    公开(公告)号:CN102492591B

    公开(公告)日:2013-07-31

    申请号:CN201110444064.7

    申请日:2011-12-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种富含还原型谷胱甘肽的黄酒的生产方法,其中在黄酒酿造前发酵阶段采用的发酵用水是矿泉水,在黄酒酿造后发酵阶段中添加还原型谷胱甘肽提取物,提取自黄酒废弃酵母或再发酵的黄酒废弃酵母,较佳地,还原型谷胱甘肽提取物中还原型谷胱甘肽的含量大于95%(重量),还原型谷胱甘肽提取物的添加量为黄酒酿造后发酵阶段的发酵液的0.01-0.1%(重量),添加时间为黄酒酿造后发酵阶段进行一周后。还提供了上述方法制造的富含还原型谷胱甘肽的黄酒。本发明的富含还原型谷胱甘肽的黄酒的生产方法设计巧妙,不仅制得的黄酒口感清爽,富含微量矿物元素和还原型谷胱甘肽,且整个工艺绿色环保,无需增添较多设备,使综合效率得到提高,适于推广应用。

    一种自养产油微藻的高密度培养工艺

    公开(公告)号:CN102443542B

    公开(公告)日:2013-07-17

    申请号:CN201010509643.0

    申请日:2010-10-15

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: Y02A50/2358 Y02P20/59

    Abstract: 本发明涉及一种自养产油微藻的高密度培养工艺,采用分割法与二步法相耦合的发酵方法,以火电厂排放的CO2废气为碳源,以过滤除杂菌或杂藻后的市政污水作为培养基,高密度培养所述自养产油微藻进行生长,较佳地,在市政污水中添加海盐模拟海水,使其渗透压增大防止杂菌或杂藻的污染,自养产油微藻选自自养小球藻、微拟球藻、布朗葡萄藻、纤细角毛藻、海绿球藻、球等鞭金藻、新月菱形藻、三角褐指藻、杜氏藻和棱形藻的一种或几种,采用本发明,能实现氮、磷及CO2高去除效率,并且藻浓度、油脂及蛋白质的含量高,达到保护环境和生产生物资源的双重效果,操作简便快速、成本低、无污染、社会和经济综合效益高,适于大规模推广应用。

    一株嗜酸硫杆菌属及其在黄铜矿浸出中的应用

    公开(公告)号:CN103131650A

    公开(公告)日:2013-06-05

    申请号:CN201310023949.9

    申请日:2013-01-23

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: Y02P10/234

    Abstract: 本发明公开了一种极端嗜酸硫杆菌,命名为Acidithiobacillus sp.ZJJN,保藏编号为:CCTCC NO:M2012104。该菌对多种抗生素体现较强的敏感性以及对几种在生物浸出过程中常见金属体现较高的耐受性。另外,将该菌协同氧化亚铁硫杆菌进行极端pH下浸出黄铜矿实验,发现相比于对照体系,铜的回收率大大提高。采用扫描电镜观察浸出的黄铜矿表面发现添加了菌种ZJJN体系中的黄铜矿表面黄钾铁矾大量减少,浸出效率大大提高。本发明的极端嗜酸硫杆菌可以耐受极低的pH环境,非常适于浸出黄铜矿浸出体系,有望于应用于工业浸出黄铜矿。

    一种提取纯化小麦胚芽脂肪酶的方法

    公开(公告)号:CN103013951A

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN201210577803.4

    申请日:2012-12-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种提取纯化小麦胚芽脂肪酶的方法,属于生物工程技术领域。本发明包括以下步骤:(1)高效提取粗酶:确定从麦胚中提取粗酶的最佳方法;(2)硫酸铵沉淀和浓缩:将提取的粗酶液通过硫酸胺沉淀,并选用超滤膜对酶的盐析液进行浓缩,获得超滤液;(3)离子交换层析:采用离子交换层析纯化超滤液中的脂肪酶,得到较纯的小麦胚芽脂肪酶;(4)制备小麦胚芽脂肪酶的亲和介质;(5)吸附和洗脱:得到纯酶,纯度达到95%。本发明所提供的小麦胚芽脂肪酶高效提取方法,回收率高,纯度高。

    一种黄素酶亲和介质及其合成和应用

    公开(公告)号:CN102513065A

    公开(公告)日:2012-06-27

    申请号:CN201110425508.2

    申请日:2011-12-16

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种黄素酶亲和介质,由黄素酶亲和配体和层析介质连接而成。较佳地,黄素酶亲和配体是黄素辅酶核心构件异咯嗪环的结构类似物,层析介质是Sepharose、壳聚糖、硅胶或陶瓷颗粒;黄素酶亲和配体和层析介质通过环氧氯丙烷和乙二胺、1,3-丙二胺、2-羟基-1,3丙二胺或1,4-丁二胺作为间隔臂进行连接。还提供了一种上述的黄素酶亲和介质的合成方法及使用方法,利用该黄素酶亲和介质可以大规模快速分离纯化黄素酶,可在仅用一步亲和层析的情况下,得到黄素酶纯品,蛋白和活性回收率较高,适于大规模推广应用。

    一种富含还原型谷胱甘肽的黄酒的生产方法及由其制造的黄酒

    公开(公告)号:CN102492591A

    公开(公告)日:2012-06-13

    申请号:CN201110444064.7

    申请日:2011-12-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种富含还原型谷胱甘肽的黄酒的生产方法,其中在黄酒酿造前发酵阶段采用的发酵用水是矿泉水,在黄酒酿造后发酵阶段中添加还原型谷胱甘肽提取物,提取自黄酒废弃酵母或再发酵的黄酒废弃酵母,较佳地,还原型谷胱甘肽提取物中还原型谷胱甘肽的含量大于95%(重量),还原型谷胱甘肽提取物的添加量为黄酒酿造后发酵阶段的发酵液的0.01-0.1%(重量),添加时间为黄酒酿造后发酵阶段进行一周后。还提供了上述方法制造的富含还原型谷胱甘肽的黄酒。本发明的富含还原型谷胱甘肽的黄酒的生产方法设计巧妙,不仅制得的黄酒口感清爽,富含微量矿物元素和还原型谷胱甘肽,且整个工艺绿色环保,无需增添较多设备,使综合效率得到提高,适于推广应用。

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