公开(公告)号：CN105274071A

公开(公告)日：2016-01-27

申请号：CN201510788289.2

申请日：2015-11-17

Applicant: 江南大学

Inventor： 张玲 ,  杨海麟 ,  辛瑜 ,  王武 ,  袁晔

IPC: C12N9/04 ,  C12N15/53 ,  C12N1/21 ,  A23L33/18 ,  A61K38/44

CPC classification number: C12N9/0006 ,  A61K38/00 ,  C12Y101/03006

Abstract: 本发明公开了一种底物特异性提高的胆固醇氧化酶突变体及其应用，属于酶工程技术领域。本发明的突变体，是在Rhodococcus sp.源(以前被分类命名为Brevibacterium sp.DGCDC-82)的胆固醇氧化酶的基础上进行氨基酸删除突变得到的。原始的Rhodococcus sp.源的胆固醇氧化酶对胆固醇，谷甾醇，孕烯酮醇，胆甾烷醇这4种底物的活性差不多，而本发明的突变体CODr-M1的底物特异性有显著变化，对孕烯酮醇的活性最高，是对胆固醇的活性的5.3倍。通过本发明的方法，有效提高了胆固醇氧化酶对底物孕烯酮醇的特异性。

公开(公告)号：CN105274071B

公开(公告)日：2018-04-06

申请号：CN201510788289.2

申请日：2015-11-17

Applicant: 江南大学

Inventor： 张玲 ,  杨海麟 ,  辛瑜 ,  王武 ,  袁晔

IPC: C12N9/04 ,  C12N15/53 ,  C12N1/21 ,  A23L33/18 ,  A61K38/44

Abstract: 本发明公开了一种底物特异性提高的胆固醇氧化酶突变体及其应用，属于酶工程技术领域。本发明的突变体，是在Rhodococcus sp.源(以前被分类命名为Brevibacterium sp.DGCDC‑82)的胆固醇氧化酶的基础上进行氨基酸删除突变得到的。原始的Rhodococcus sp.源的胆固醇氧化酶对胆固醇，谷甾醇，孕烯酮醇，胆甾烷醇这4种底物的活性差不多，而本发明的突变体CODr‑M1的底物特异性有显著变化，对孕烯酮醇的活性最高，是对胆固醇的活性的5.3倍。通过本发明的方法，有效提高了胆固醇氧化酶对底物孕烯酮醇的特异性。