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公开(公告)号：CN101452000A
公开(公告)日：2009-06-10
申请号：CN200810242893.5
申请日：2008-12-30
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/558 , G01N33/52
Abstract: 本发明提供了一种快速检测牛γ干扰素的试纸条及其制备方法。所说的试纸条由标记好对照线和检测线的NC膜、免疫金垫、样品垫、吸水滤纸和PVC底板构成。其中所说的对照线的成分是抗鼠IgG，检测线的成分是抗牛r－IFN单克隆抗体；所说的免疫金垫是载有胶体金标记的单克隆抗体的玻璃棉。上述试纸条包括胶体金标记抗体、喷金、制作硝酸纤维素膜和组装的步骤。本发明的试纸条用于检测样本中的牛γ干扰素，从而可以用于牛结核病等疫病检测和诊断。该方法简便、快速，可以用肉眼直接观察，5－10分钟即出结果，适用于基层各级兽医部门和出入境牛结核的快速大量筛选检测。该方法所需成本低廉，经济效益显著、应用前景广泛。
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公开(公告)号：CN1295330C
公开(公告)日：2007-01-17
申请号：CN200510038289.7
申请日：2005-01-25
Applicant: 扬州大学
Abstract: 抗病毒活性重组鸡γ-干扰素的制取方法及用途，涉及一种广谱高效抗病毒基因工程产品的制取方法。将ChIFN-γ基因从真核质粒中经双酶切后克隆到转移载体中，获得重组转移质粒pFASTBACl-ChIFN-γ；取DH10Bac感受态细胞，加入1ng pFASTBACl-ChIFN-γ，转座后，用SOC培养基稀释培养物，涂布Luria平板，培养后，挑取白色菌落，Luria平板进行纯化，阳性质粒命名为Bacmid-ChIFN-γ，提取阳性质粒DNA；取上述阳性质粒DNA转染Sf9细胞，制得高抗病毒活性重组鸡γ-干扰素。本发明还在于将该干扰素用于抑制MDV GA对CEF的致病变作用、抑制NDV F48E8在细胞上的增殖、抗AIV(H5N1)病毒对细胞的致病作用。
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公开(公告)号：CN1403155A
公开(公告)日：2003-03-19
申请号：CN02138397.9
申请日：2002-10-08
Applicant: 扬州大学
IPC: A61K38/21 , C12N15/81 , C07K14/555 , A61P15/08
Abstract: 本发明属于生物技术制药工业中的基因工程生产多肽药物的技术领域。应用一步法逆转录—聚合酶链式反应(RT－PCR)技术对奶牛γ－干扰素(BovIFN－γ)基因的cDNA序列进行扩增，从奶牛脾淋巴细胞的总RNA中扩增出特异性片段。将BovIFN－γ基因克隆到大肠杆菌表达载体PGEX－6P－1谷光甘肽－S－转移酶的下游，经IPTG诱导后，表达融合蛋白；或将BovIFN－γ基因克隆到酵母高效表达载体，通过转化酵母细胞，获得阳性克隆，并大量表达基因产物；通过亲和层析纯化，大量制备表达产物，通过细胞病变抑制试验证实，表达产物有极好的抑制VSV病毒的活性。或将BovIFN－γ基因插入到pcDNA3，通过大量制备质粒DNA，以质粒DNA直接注射奶牛乳腔，使其BovIFN－γ基因在乳腺中大量表达，从而达到预防或治疗奶牛隐性乳房炎的目的。
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公开(公告)号：CN118006690A
公开(公告)日：2024-05-10
申请号：CN202410035165.6
申请日：2024-01-10
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/866 , A61K39/295 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12N15/62 , C07K19/00 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于基因工程和疫苗开发技术领域，公开了三种猪致病性冠状病毒主要保护性蛋白串联表达载体的构建及应用，选取PEDV、PDCoV、TGEV的中和抗原表位基因，按一定顺序与pFastBacHTA昆虫表达载体连接，通过对不同位点的酶切及测序验证是否串联成功；而后通过重组杆状病毒真核表达系统对串联基因进行融合蛋白表达，以间接免疫荧光、Western Blot验证融合蛋白表达效果；将表达融合蛋白的重组病毒免疫小鼠并通过间接免疫荧光验证其免疫原性；并以串联重组病毒感染Sf9细胞后获得的病变细胞的破碎上清作为包被抗原，建立了针对三种冠状病毒主要保护性蛋白的ELISA检测方法。本发明为预防致猪腹泻的三种冠状病毒提供了一种行之有效的方法，为冠状病毒新型疫苗的开发提供了新思路。
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公开(公告)号：CN103773891B
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201410067290.1
申请日：2014-02-26
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种用环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测耐药基因TetK的试剂盒及检测方法。本发明含有10X等温反应缓冲液、Bst DNA聚合酶8Μ/μL、l0mM dNTP、100mM硫酸镁、10μM内引物1、10μM内引物2、l0μM外引物1、10μM外引物2和4M甜菜碱的反应液A、反应液B（50mM MgCl2）和反应液C（100X的荧光染料SYBR GreenⅠ）。通过对细菌基因组DNA提取、耐药基因TetK的环介导等温扩增、扩增产物的显色检测，从而检测出耐药基因TetK。解决了现有技术时间长、工作量大、交叉污染、操作复杂等缺陷。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速且成本低、操作方法更简单，适于现场快速检测。
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公开(公告)号：CN102924577A
公开(公告)日：2013-02-13
申请号：CN201210494560.8
申请日：2012-11-28
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了鸡高迁移率族蛋白B1（chHMGB1）抗原多肽和抗chHMGB1的单克隆抗体。该chHMGB1抗原多肽序列为VDAGKKVVAKAEKSKK。以该抗原多肽为免疫原免疫Balb/c小鼠，筛选得到一株杂交瘤细胞株2G1，保藏编号为CGMCCNo.6708。该细胞株能够持续稳定地分泌抗chHMGB1的单克隆抗体。该单克隆抗体不仅能够与融合蛋白表达的chHMGB1反应，而且能够与禽类巨噬细胞系HD11和CEF、DF1细胞中天然的chHMGB1特异性反应；该抗体还可以用于细胞刺激后培养上清中chHMGB1的分析，因此可用于对chHMGB1分子生物学功能的深入研究。
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公开(公告)号：CN102808037A
公开(公告)日：2012-12-05
申请号：CN201210341354.3
申请日：2012-09-14
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属生物技术领域，涉及定量RT-PCR检测试剂盒，具体是一种实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测的鸡高迁移率族蛋白B1的试剂盒。该试剂盒含有逆转录反应液、莫洛尼氏鼠白血病病毒逆转录酶、RNA酶抑制剂、聚合酶链反应液、耐热DNA聚合酶、标准品、对照品。本发明试剂盒通过逆转录(RT)mRNA样品得到cDNA，再结合实时荧光定量PCR检测技术，可以精确定量检测标本中鸡高迁移率族蛋白B1的mRNA表达量。该试剂盒可以用于鸡体内各组织脏器中HMGB1的表达分析，也可以用于检测不同状态下细胞中鸡HMGB1表达水平的变化。该发明为研究鸡HMGB1表达水平提供了一种快速、准确、可重复的检测方法。
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公开(公告)号：CN1916637A
公开(公告)日：2007-02-21
申请号：CN200610127111.4
申请日：2006-09-07
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/547 , G01N33/52
Abstract: 单克隆抗体介导的呋喃它酮残留检测方法及其应用，属于药物残留检测领域。本发明以抗呋喃它酮单克隆抗体为介导建立呋喃它酮残留ELISA快速检测方法，可用于制作检测试剂盒和检测试纸条，可方便地对呋喃它酮残留量进行ELISA快速。该方法相对于液质联用色谱仪分析法，对样品的前处理要求较低，分析过程很简单，检测时间较短，而且检测灵敏度也较高，使用成本低。
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公开(公告)号：CN1916636A
公开(公告)日：2007-02-21
申请号：CN200610127110.X
申请日：2006-09-07
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/547 , G01N33/52
Abstract: 单克隆抗体介导的呋喃咀啶残留检测方法及其应用，属于药物残留检测领域。本发明以抗呋喃咀啶单克隆抗体为介导建立呋喃咀啶残留ELISA快速检测方法，可用于制作检测试剂盒和检测试纸条，可方便地对呋喃咀啶残留量进行ELISA快速。该方法相对于液质联用色谱仪分析法，对样品的前处理要求较低，分析过程很简单，检测时间较短，而且检测灵敏度也较高，使用成本低。
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公开(公告)号：CN118086305B
公开(公告)日：2024-12-10
申请号：CN202410322987.2
申请日：2024-03-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , A61K31/713 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于基因工程和疫苗开发研究技术领域，具体涉及一种抑制猪轮状病毒的amiRNA及其应用。本发明提供了一种抑制猪轮状病毒的amiRNA，包括amiRNA‑323或amiRNA‑345。本发明所提供的amiRNA能够有效抑制猪轮状病毒，特别是PORV‑GD‑01‑2015毒株，经实施例验证，本发明所提供的amiRNA能有效抑制猪轮状病毒PORV‑GD‑01‑2015毒株的复制和增殖，也可与抗病毒药物联合使用并用于猪轮状病毒抗病体系的培育，为amiRNA疫苗开发治疗猪轮状病毒提供了一种行之有效的方法，具有良好的应用前景。
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