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公开(公告)号：CN112048484A
公开(公告)日：2020-12-08
申请号：CN202010730869.7
申请日：2020-07-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于兽用生物制品技术领域，公开了一株表达传染性法氏囊强毒株VP2蛋白的基因Ⅶ型新城疫重组病毒，所述重组病毒在病毒rDHN3mF的P基因和M基因之间插入VP2蛋白编码基因得到，所述VP2蛋白编码基因如序列表SEQ ID NO：2所述，所述病毒rDHN3‑mF的序列表如SEQ ID NO：1所述。该重组病毒为弱毒型、应用后具有较强烈的保护性免疫反应、是针对流行毒株的NDV/IBDV二联疫苗的具有实用性的潜在毒株，同时本发明还公开了该重组病毒的制备方法和疫苗。
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公开(公告)号：CN111019966A
公开(公告)日：2020-04-17
申请号：CN201911367696.0
申请日：2019-12-26
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为一种具有较髙棒状杆菌复制能力的表达质粒，所述表达质粒的第1786位点的核苷酸为A或G，其余位点与质粒pXMJ19相同；所述表达质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO:13或SEQ ID NO:14所示。通过在pXMJ19载体的棒状杆菌复制子调节部位，将第1786位点的核苷酸C进行人工突变，成功获得2株比pXMJ19质粒拷贝能力高6～8.5倍的棒状杆菌/大肠杆菌双用载体pXMJ19C1786A和pXMJ19C1786G质粒，pXMJ19C1786A拷贝数约为115，pXMJ19C1786G质粒的拷贝数约为170。
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公开(公告)号：CN109517809A
公开(公告)日：2019-03-26
申请号：CN201811449640.5
申请日：2018-11-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明将野生型传染性支气管炎病毒的E蛋白的第26位氨基酸由丙氨酸突变为苯丙氨酸，得到的缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒。本发明通过构建缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒，以及获得了回复突变体，对突变后的病毒进行分离纯化方法及其特性分析，有助于开发特异性的抗病毒药物和预防病毒感染的有效疫苗，对冠状病毒的研究具有重大的公共卫生和经济意义。
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公开(公告)号：CN111019966B
公开(公告)日：2023-01-24
申请号：CN201911367696.0
申请日：2019-12-26
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为一种具有较髙棒状杆菌复制能力的表达质粒，所述表达质粒的第1786位点的核苷酸为A或G，其余位点与质粒pXMJ19相同；所述表达质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO:13或SEQ ID NO:14所示。通过在pXMJ19载体的棒状杆菌复制子调节部位，将第1786位点的核苷酸C进行人工突变，成功获得2株比pXMJ19质粒拷贝能力高6～8.5倍的棒状杆菌/大肠杆菌双用载体pXMJ19C1786A和pXMJ19C1786G质粒，pXMJ19C1786A拷贝数约为115，pXMJ19C1786G质粒的拷贝数约为170。
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公开(公告)号：CN110592031B
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN201910910558.6
申请日：2019-09-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一株S蛋白融合HiBiT的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明是将野生型传染性支气管炎病毒(IBV)的S蛋白水解切割位点处第539位插入HiBiT的氨基酸，并在HiBiT前后各加上4个连接氨基酸，获得IBV突变型病毒株。该突变株的获得有助于研究IBV HiBiT‑S2融合蛋白的结构、病毒的增殖能力、形成空斑的大小，并可判断病毒的复制能力和致病力是否发生改变，并且为定量IBV提供了新方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115094088A
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN202210412508.7
申请日：2022-04-19
Applicant: 华南农业大学 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种pSFV‑flagX‑CMV复制子质粒，采用含塞姆利基森林病毒复制子的载体，并将p54，p22，p32，p72，pCD2v，M448R，MGF505‑7R和M1249L基因分别插入所述载体而得；所述p54，p22，p32，p72，pCD2v，M448R，MGF505‑7R基因序列依次如SEQ ID NO.15‑NO.21所示。该质粒通过插入非洲猪瘟抗原基因(X)，制得的pSFV‑flagX‑CMV复制子质粒在真核细胞能够高效表达ASFV抗原蛋白，有利于非洲猪瘟鸡尾酒DNA疫苗的研制，也有利于通过Flag抗体胶对这些蛋白进行纯化，制取有别于原核表达的，具备翻译后修饰的高质量抗原蛋白；同时，本发明还公开了该质粒的制备方法和鸡尾酒混合疫苗。
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公开(公告)号：CN114836471A
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202210297300.5
申请日：2022-03-24
Applicant: 华南农业大学 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12N15/113
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于敲除cFOS宿主基因的质粒，所述质粒为连接有sgRNA的载体，所述sgRNA包括添加有Bbsl酶切位点的sgRNA‑F和sgRNA‑R；sgRNA‑F如核苷酸序列SEQ ID NO：1所示；sgRNA‑R如核苷酸序列SEQ ID NO：2所示。此外还公开了敲除了cFOS宿主基因的人肺癌细胞系H1299及其制备方法和用途。本发明通过上述方案得到的H1299细胞系对于cFOS宿主基因的把控更为稳定，能够更确切的为cFOS基因及其调控基因的全功能研究。
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公开(公告)号：CN110904055A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911119406.0
申请日：2019-11-15
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了猪繁殖与呼吸综合征病毒重组疫苗株PRRSV-SP及其制备方法与应用。本发明将疫苗株SP的T3448A位点突变，得到重组疫苗株PRRSV-SP。本发明将一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒湖北分离株HUB2的主要结构蛋白GP5和M的基因ORF5和ORF6放进重组疫苗株PRRSV-SP相应编码区域进行表达，获得了嵌合毒株vSP-Hub2。本发明提供的重组疫苗株PRRSV-SP和嵌合毒株vSP-Hub2没有明显的致病性，可以作为进一步研究弱毒疫苗及PRRSV毒株变异机制的基础材料，通过感染性克隆系统构建新的弱毒疫苗株的成功，也可用于制备抗PRRSV同源以及异源毒株的新型高效广谱疫苗。
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公开(公告)号：CN110904055B
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN201911119406.0
申请日：2019-11-15
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了猪繁殖与呼吸综合征病毒重组疫苗株PRRSV‑SP及其制备方法与应用。本发明将疫苗株SP的T3448A位点突变，得到重组疫苗株PRRSV‑SP。本发明将一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒湖北分离株HUB2的主要结构蛋白GP5和M的基因ORF5和ORF6放进重组疫苗株PRRSV‑SP相应编码区域进行表达，获得了嵌合毒株vSP‑Hub2。本发明提供的重组疫苗株PRRSV‑SP和嵌合毒株vSP‑Hub2没有明显的致病性，可以作为进一步研究弱毒疫苗及PRRSV毒株变异机制的基础材料，通过感染性克隆系统构建新的弱毒疫苗株的成功，也可用于制备抗PRRSV同源以及异源毒株的新型高效广谱疫苗。
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公开(公告)号：CN111926025B
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202010346610.2
申请日：2020-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及反向遗传操作技术领域，公开了一株经过密码子替换的基因Ⅶ型新城疫病毒的拯救方法。分别将新城疫病毒的NP、P和L基因以及表达T7 RNA聚合酶的DE3基因克隆进pXJ40载体，获得质粒pXJ40‑NP、pXJ40‑P、pXJ40‑L和pXJ40‑DE3；将新城疫病毒的全基因组cDNA克隆进pBR322质粒中得到pBR322‑DHN3；将NP基因编码区部分密码子统一替换成使用频率最高的密码子，替换到pBR322‑DHN3质粒上，形成新质粒pBR322‑mNPDHN3；采用上述5种质粒共转染BHK‑21细胞，得到拯救病毒rDHN3‑mNP。本发明方法更利于病毒的拯救和病毒致病机制的研究。
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