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公开(公告)号:CN112430653A
公开(公告)日:2021-03-02
申请号:CN202011399863.2
申请日:2020-12-04
Applicant: 南昌大学
Abstract: 本发明涉及PCR步移技术领域,具体涉及一种用于基因组步移的差异退火介导的茎环PCR技术。本发明利用长度与退火温度适中的引物介导茎环形成,构成特异性扩增目标分子的结构基础,这些茎环形成引物还具有如下特点:或与已知序列一致,或额外在其3’端引入1‑3个自由碱基。上述特点确保在有限的已知区域设计多条引物用于平行反应,利用高退火温度的特异性引物和退火温度适中的茎环形成引物进行第一轮PCR,用于介导茎环形成;第二轮使用一对特异性引物:茎引物和环引物对目标分子进行指数富集,非特异性分子因为没有茎特异性引物或者环特异性引物的结合位点而被消除。
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公开(公告)号:CN108850995A
公开(公告)日:2018-11-23
申请号:CN201810658031.4
申请日:2018-06-25
Applicant: 南昌大学
Abstract: 一种香葱粉制备方法,包括以下步骤:1)将鲜香葱打浆,加入鲜香葱液重量1‑5倍的乙醇溶液在10‑40℃下浸泡1‑3h,经压滤后,得到鲜香葱浸提液;2)向食盐中加入食盐重量1‑4倍的鲜香葱浸提液,并分别加入食盐重量2‑10%的β‑环糊精和5‑15%的麦芽糊精,煮沸加热浓缩,回收乙醇,边加热边搅拌,锚式搅拌器桨叶外缘的圆周速度为0.2‑1.5m/s,直至水分收干,物料完全结晶,得到香葱盐共结晶包埋物;3)粉碎,过30目筛。本发明有效防止香葱中的疏水性成分的挥发和氧化损失,防止香葱中的亲水性成分的氧化损失,显著延长产品的稳定性和保质期。产品具有香味释放快、呈味快、入味快的优点,口感无渣和外观洁净。
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公开(公告)号:CN108850979A
公开(公告)日:2018-11-23
申请号:CN201810657846.0
申请日:2018-06-25
Applicant: 南昌大学
Abstract: 一种抑制咸鱼氧化的香辛料盐制备方法,包括以下步骤:1)将丁香、八角、花椒、肉蔻和良姜的混合香辛料粉碎后过筛,加入10‑30倍的乙醇溶液在30‑80℃下浸泡2‑5h经压后,得到香辛料浸提液;(2)向食盐中加入1‑6倍的香辛料浸提液,并分别加入2‑10%的β‑环糊精和2‑10%的麦芽糊精,煮沸加热浓缩,回收乙醇,边加热边搅拌,直至水分收干,物料完全结晶,得到香辛料盐共结晶包埋物;(3)粉碎,过30目筛。本发明能有效防止香辛料中抗氧化成分的损失,有效成分能随盐均匀分布在鱼肉表面,渗入鱼肉速度快,且鱼肉表面无香辛料细屑,无须清洗,易于实现咸鱼的标准化绿色生产。
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公开(公告)号:CN105039439B
公开(公告)日:2018-06-08
申请号:CN201510423414.X
申请日:2015-07-20
Applicant: 南昌大学
Abstract: 包衣菌体在有机介质中生物合成共轭亚油酸异构体的方法,包括以下步骤:(1)将每克干酪乳杆菌CGMCC 1.574菌体重悬于5mL透性化处理液中,37℃处理20min,离心收集透性化菌体;(2)用50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液洗涤后,离心收集菌体,将每克透性化湿菌体重悬于20mL50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液中,加入菌悬液体积0.5‑2.0%的吐温‑20混合均匀,4‑40℃处理2‑6h,离心收集菌体,冷冻干燥后得到包衣菌体;(3)将每克包衣菌体加入到600mL正己烷中,搅拌均匀,加入正己烷体积0.1‑0.3%的亚油酸,4‑40℃下反应1‑12h;(4)离心分离包衣菌体,回收正己烷,产物为c9,t11‑共轭亚油酸异构体。本发明反应时间短,包衣菌体可重复使用多次,产量得到了显著提高,无环境污染,显著降低生产成本。
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公开(公告)号:CN105087691B
公开(公告)日:2018-04-17
申请号:CN201510423890.1
申请日:2015-07-20
Applicant: 南昌大学
CPC classification number: Y02P20/588
Abstract: 表面活性剂包衣菌体催化合成共轭亚油酸异构体的方法,包括以下步骤:(1)将每克干酪乳杆菌CGMCC 1.574菌体重悬于5mL透性化处理液中,37℃处理20min,离心收集透性化菌体;(2)用60mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液洗涤后,离心收集菌体,将每克湿菌体重悬于20mL60mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液中,再滴加含1%谷氨酸双油醇酯核糖醇的丙酮溶液,边加边混匀,4‑40℃处理2‑6h,离心收集菌体,冷冻干燥后得包衣菌体;(3)将每克冻干包衣菌体加入到500mL正己烷中,搅拌均匀,加入正己烷体积百分比0.1‑0.3%的亚油酸,4‑40℃下反应1‑12h;(4)离心分离包衣菌体,回收正己烷,产物为c9,t11‑共轭亚油酸异构体。本发明反应时间短,包衣菌体可重复使用多次,产量得到了显著提高,无环境污染,显著降低生产成本。
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公开(公告)号:CN105039444B
公开(公告)日:2018-03-02
申请号:CN201510423878.0
申请日:2015-07-20
Applicant: 南昌大学
IPC: C12P7/64
Abstract: 有机介质中生物合成共轭亚油酸异构体的方法,包括以下步骤:(1)将干酪乳杆菌CGMCC 1.574菌体重悬于脉冲介质中,经脉冲电场处理后,离心收集菌体;(2)用50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液洗涤后,离心收集菌体,将每克湿菌体重悬于20mL50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液中,加入菌悬液体积0.5‑2.0%的吐温‑80混合均匀,4‑40℃处理2‑6h,离心收集菌体,冷冻干燥后得到包衣菌体;(3)将每克包衣菌体加入到600mL正己烷中,搅拌均匀,加入正己烷体积0.1‑0.3%的亚油酸,4‑40℃下反应1‑12h;(4)离心分离包衣菌体,回收正己烷,产物为c9,t11‑共轭亚油酸异构体。本发明反应时间短,包衣菌体可重复使用多次,产量得到了显著提高,无环境污染,生产成本显著降低。
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公开(公告)号:CN104480150A
公开(公告)日:2015-04-01
申请号:CN201410609389.X
申请日:2014-11-04
Applicant: 南昌大学
CPC classification number: C12P7/6427
Abstract: 一种共轭亚麻酸异构体的生物富集方法,包括生物富集培养基的制备、生产用菌种的制备、共轭亚麻酸异构体的生物富集等步骤,得到c9,t11,c15-共轭亚麻酸异构体。本发明所得产品中c9,t11,c15-共轭亚麻酸异构体的含量大于质量百分比0.36%,底物的转化率大于90%,通过生物富集培养,不仅得到富含c9,t11,c15-共轭亚麻酸异构体的抗癌功能产品,脱脂大豆中的蛋白质和纤维素也被乳酸菌分解成多肽和可溶性膳食纤维等具有保健功能的活性因子,产物的保健功能显著增强,进一步拓宽了该产品的应用范围。
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公开(公告)号:CN115943994B
公开(公告)日:2025-02-14
申请号:CN202211598523.1
申请日:2022-12-14
Applicant: 南昌大学
IPC: A23C9/13
Abstract: 本发明公开了一种抑制酸牛乳乳清析出的方法,将无抗生素脱脂奶粉用水调配成5‑15%的脱脂乳液,向脱脂乳液中加入0‑2%的低聚糖,经均质、巴氏灭菌得到脱脂乳液;将嗜酸乳杆菌接入脱脂乳液,经三级扩大培养后得到生产用菌种;向脱脂乳液中接入质量百分比5%的菌种,加入脱脂乳液0.05‑0.2%的亚油酸底物,混匀后于30‑45℃,发酵培养12‑36h,得到富含c9,t11‑CLA的酸牛乳。本发明在脱脂乳液中加入亚油酸底物,通过乳酸菌发酵,得到富含c9,t11‑共轭亚油酸的酸牛乳,通过小分子脂肪酸促进了乳蛋白分子间的共价交联,进而减少80%以上酸牛乳乳清析出。该方法不改变传统酸牛乳生产工艺,几乎不增加生产成本,在获得富含抗癌活性成分c9,t11‑共轭亚油酸的同时,达到显著抑制酸牛乳乳清析出的效果。
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公开(公告)号:CN118048440A
公开(公告)日:2024-05-17
申请号:CN202410104483.3
申请日:2024-01-25
Applicant: 南昌大学
IPC: C12Q1/686 , C12Q1/6848 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于N7HW‑PCR的基因组步移引物及方法,通过将一级PCR的随机步移引物pWP的5’端的7个碱基简并为N7,其余部分保持不变,得到引物ds/tWP;将ds/tWP用于二级和三级PCR中,使得二级、三级步移引物与一级步移引物之间不完全匹配,进而使一级PCR所得非目标产物在二级和三级PCR中不能被有效扩增而被消除。本发明方法相较于传统PCR方法,具有引物用量少、操作简单、效率高等优点。
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公开(公告)号:CN117844910A
公开(公告)日:2024-04-09
申请号:CN202311854834.4
申请日:2023-12-29
Applicant: 南昌大学
Abstract: 本发明公开了一种基于尿嘧啶引物PCR的基因组步移方法,通过在随机引物(arbitrary walking primer,AWP)3’端的倒数第二个位置引入了尿嘧啶碱基,并在二级UP‑PCR之前,使AWP序列在UNG的作用下被破坏,使得在二级UP‑PCR的热循环中,避免不需要的扩增子被扩增,仅两轮UP‑PCR就足以完成基因组步移任务,并获得足够的扩增特异性,相较传统的热不对称交错PCR、腕表PCR、桥接PCR等基因组步移方法更为简单易行,且具有同等的成功率。
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