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公开(公告)号：CN110804675A
公开(公告)日：2020-02-18
申请号：CN201911148269.3
申请日：2019-11-21
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种不结球白菜微卫星DNA标记指纹图谱及其应用。本发明以9对SSR引物等位片段的组合为基础，以8个不结球白菜品种/系为标准材料，通过DNA的提取、PCR扩增、PCR产物的鉴定、数据分析，最终构建得到DNA指纹图谱。该指纹图谱可以区分开供试的不结球白菜品种/系，可用于不结球白菜品种/系的鉴定或纯度分析。本发明与传统的形态学和细胞学鉴定检测相比，具有检测时间短、准确性高、可重复性好的优点。
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公开(公告)号：CN109652455A
公开(公告)日：2019-04-19
申请号：CN201910121665.0
申请日：2019-02-19
Applicant: 南京农业大学 , 南京市蔬菜科学研究所
IPC: C12N15/87
Abstract: 为解决不结球白菜再生率低，受基因型影响大，使得转化效率低的技术问题，本发明提供一种磁性纳米载体介导的不结球白菜高效遗传转化方法，包括将含有外源基因的质粒与具有顺磁性、表面覆盖一层PEI薄膜的Fe3O4的磁性纳米载体以质量比1：1连接，得到基因—磁性纳米载体复合物；在花粉培养基中混合基因—磁性纳米载体与待转化植物花粉，在0.1～0.5T的磁场介导下进行磁转化，直接递送基因—磁性纳米载体复合物进入花粉细胞；然后通过植物授粉和受精过程实现待转化植物的外源基因遗传转化。本发明花粉培养基配方、磁性纳米粒子和质粒DNA的质量比、磁转化时间三者的组合，能够保证不结球白菜的花粉活力并有效提高磁转化效率，建立简单高效的遗传转化体系。
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公开(公告)号：CN103718965A
公开(公告)日：2014-04-16
申请号：CN201310726458.0
申请日：2013-12-25
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种快速高效获得芸薹属蔬菜游离小孢子培养再生植株的方法，该方法是待小孢子胚状体产生时，将其转到2000lx、25℃、60r/min摇床上振荡培养，3～7d后将转绿的子叶型胚转移到含蔗糖2.5%，琼脂粉1%的B5固体培养基上继续培养获得再生芽；15～20d后，转入含10%椰汁，3%蔗糖，0.78%琼脂粉的MS固体培养基中，20～30d后大多数植株长成健壮且生根的幼苗，可驯化移栽，培养条件都为90uE/m2/s、12hr/d、25℃。再生植株平均成苗率达83.5%。本发明有效解决小孢子胚易褐化、玻璃化的问题；有效缩短利用游离小孢子培养获得DH株系的时间；不需添加任何激素，更安全。
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公开(公告)号：CN117512161A
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202210931718.7
申请日：2022-08-04
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11 , C12Q1/686
Abstract: 本发明公开了一种与不结球白菜色素含量紧密相关的InDel分子标记及其应用，本发明公开的与不结球白菜色素含量相关的分子标记在SEQ ID No.1和SEQ ID No.2引物的扩增下获得SEQ ID No.3或SEQ ID No.4所示的DNA片段，试验证明，该分子标记与不结球白菜中的叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素、叶黄素、胡萝卜素和类胡萝卜素的含量相关，利用该分子标记，可以有效的鉴定不结球白菜中叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素、叶黄素、胡萝卜素和类胡萝卜素的含量，具有重复性好、特异性高的特点，可以用于不结球白菜的分子标记辅助育种选择，这不仅节约了育种成本还大大的加快了育种进程。
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公开(公告)号：CN113549617B
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202110618334.5
申请日：2021-06-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开编辑不结球白菜CENH3基因的sgRNA及其CRISPR/Cas9载体和应用，本发明设计了不结球白菜CENH3基因的sg RNA，构建CRISPR/Cas9基因编辑载体，将连接了目的DNA片段的CRISPR/Cas9载体转入不结球白菜基因组中，通过基因编辑实现对不结球白菜CENH3基因的定点突变。本发明使用花粉纳米磁转化技术结合CRISPR/Cas9技术对不结球白菜内源基因CENH3进行编辑，通过植株抗性筛选、PCR检测、基因测序筛选得到CENH3单倍体诱导系，为在不结球白菜双单倍体育种中利用CENH3介导的染色体消除机制获得单倍体奠定基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110804675B
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN201911148269.3
申请日：2019-11-21
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种不结球白菜微卫星DNA标记指纹图谱及其应用。本发明以9对SSR引物等位片段的组合为基础，以8个不结球白菜品种/系为标准材料，通过DNA的提取、PCR扩增、PCR产物的鉴定、数据分析，最终构建得到DNA指纹图谱。该指纹图谱可以区分开供试的不结球白菜品种/系，可用于不结球白菜品种/系的鉴定或纯度分析。本发明与传统的形态学和细胞学鉴定检测相比，具有检测时间短、准确性高、可重复性好的优点。
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公开(公告)号：CN109852717B
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN201811566959.6
申请日：2018-12-19
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于鉴定不结球白菜油亮矮脚黄、黄玫瑰、绿星的分子标记方法，利用开发的SSR分子标记引物对及其检测方法可以将不结球白菜油亮矮脚黄、黄玫瑰、绿星三个品种同时区分开来。本方法不受植株生长发育阶段和环境的影响，具有检测快速、准确等优点，当出现品种假冒或有争议情况时可进行有效地监督和仲裁，值得大范围推广。
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公开(公告)号：CN113755623A
公开(公告)日：2021-12-07
申请号：CN202110941003.5
申请日：2021-08-17
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一组不结球白菜早抽薹的分子标记引物及其应用，属于分子生物学技术领域。所述分子标记引物的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，以不结球白菜DNA为模板，通过聚合酶链式反应扩增该片段，根据目的条带的有无，可筛选出不结球白菜早抽薹品种或材料。本发明提供的分子标记引物，可以快速检测不结球白菜早抽薹的品种和材料，极大的节约时间和资源，大大提高选择效率，从而加快育种进程。
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公开(公告)号：CN112575117A
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN202110018658.5
申请日：2021-01-07
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一组用于鉴定不结球白菜红菜薹“靓红玫瑰”和“十月红”的SSR分子标记引物及其应用，属于蔬菜品种鉴定与良种技术领域。所述SSR分子标记引物的序列为：BrcSSR60‑F:5’‑GAGCATCATCACCAAGCTCA‑3’，BrcSSR60‑R:5’‑ATGTAACCGTTTCCTGGCTG‑3’。利用本发明公开的SSR分子标记引物及其检测方法可以将不结球白菜红菜薹“靓红玫瑰”和“十月红”两个品种进行有效区分。该方法不受植株生长发育阶段和环境的影响，操作简单，检测准确迅速，当出现品种混淆或有争议时可进行有效地监督和仲裁。
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公开(公告)号：CN109937876A
公开(公告)日：2019-06-28
申请号：CN201910220015.1
申请日：2019-03-22
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种提高不结球白菜小孢子胚胎诱导率的方法。一种提高不结球白菜小孢子胚胎诱导率的方法，包括：(1)采集花蕾；(2)培育小孢子胚胎：将步骤(1)采集的花蕾消毒清洗、润洗；将润洗后的花蕾研磨，过滤，离心，黄绿色沉淀用添加1号培养基稀释，进行热激处理，24-26℃暗培养14-16天，形成胚状体；1号培养基为添加0.04～0.08mg/L6-BA、10～20mg/L抗坏血酸和1mg/mL活性炭的NLN-13培养基；(3)成熟胚萌发成植株。本发明所述方法在能够保证出胚率的情况下，简化操作步骤，大大减少了操作时间，提高了植株生产效率。
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