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公开(公告)号：CN118308395A
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202410466807.8
申请日：2024-04-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/74 , C12N15/65 , C12Q1/6897
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种检测革兰氏阴性菌启动子转录活性的报告基因质粒载体、质粒及应用；本发明报告基因质粒载体包括pFA‑Gm和/或pFA‑Kan质粒，pFA‑Gm质粒包括复制子元件、mob元件以及筛选标记庆大霉素抗性基因，pFA‑Gm质粒的多克隆位点区域两侧分别含有大肠杆菌编码核糖体RNA的rrnB基因的终止区T1和T2，pFA‑Gm质粒的多克隆位点的3′端方向含有1×Flag标签；报告基因质粒为将报告基因片段连接到报告基因质粒载体上而得到；本发明通过报告基因质粒实现对革兰氏阴性细菌中基因启动子转录活性的评估，较实时荧光定量PCR技术的成本以及操作难度更低。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115216478B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202210618518.6
申请日：2022-06-01
Applicant: 华南农业大学
Inventor： 陈爱华 , 梁昭平 , 冯赛祥 , 江金飞 , 梁铭治 , 桑运芬 , 周梦若 , 赵一珊 , 孙娟 , 张广文 , 许斯祺 , 谢倩梅 , 代绘琳 , 刘宇彤 , 林敏 , 秦苗苗
Abstract: 本发明公开一种禽多杀性巴氏杆菌内毒素减毒灭活疫苗菌株的构建方法及应用。本发明通过构建表达LpxE基因的重组质粒，进行电击转化到禽多杀性巴氏杆菌中，成功获得内毒素减毒菌株。本发明采用优化后的LpxE基因特异性的去除也野生型菌株上部分类脂A1位上的磷酸基团，成功改造巴氏杆菌；且内毒素致凝活性显著高于野生型菌株，表明脂多糖结构改造后内毒素毒性下降；同时，能使细胞因子IL‑6，TNF‑α和趋化因子CXCL2的含量显著下降，减少MH‑S细胞促炎因子的产生。采用内毒素减毒菌株制备的灭活疫苗与野生型菌株灭活疫苗相比，保护效率更高，安全性也更好，能更好地应用于禽多杀性巴氏杆菌病的防治中。
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公开(公告)号：CN117535212A
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202210941651.5
申请日：2022-08-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/31 , C12N15/52 , C12N15/56 , C07K14/24 , A61K35/742 , A61P31/04 , A23K10/18 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一株具有广谱抗菌作用的枯草芽孢杆菌工程菌株及其构建方法与应用。该枯草芽孢杆菌工程菌株是通过将优化的mcyABCD基因和mcjABCD基因分别插入宿主枯草芽孢杆菌的Amye和SigF位点，获得的可同时生产微菌素Y和微菌素J25的枯草芽孢杆菌WYA25S工程菌株；其中，优化的mcyABCD基因序列如SEQ ID NO.1所示，优化的mcjABCD基因序列如SEQ ID NO.2所示。本发明中的枯草芽孢杆菌WYA25S工程菌株在正常生长(无诱导，无抗性)的情况下，对沙门氏菌等菌株具有抑菌作用，且在生长过程中不产生芽孢，具有生长可控性和菌株安全性，其应用前景好。
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公开(公告)号：CN114836460B
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202210553568.0
申请日：2022-05-19
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种表达微菌素Y的枯草芽孢杆菌工程菌株及其制备和应用，属于基因工程技术和生物技术领域，本发明首先将mcyA和mcyBCD的基因序列调整为相同方向，并且用SD和起始密码子序列相连获取mcyABCD改造基因，然后以PHT43作为载体，通过枯草芽孢杆菌对改造后的mcyABCD基因进行表达并成功表达MccY，其表达产物具有良好的鼠伤寒沙门氏菌和鸡白痢沙门氏菌的杀菌活性，为MccY在养殖业生产实践中的应用提供了更经济便捷的模式。
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公开(公告)号：CN115747126A
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202211015993.0
申请日：2022-08-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生产微菌素J25的枯草芽孢杆菌重组整合工程菌株、构建方法及应用，属于微生物技术、药物和基因工程领域，本发明通过对mcjABCD基因序列和表达原件的优化，使得MccJ25可以在枯草芽孢杆菌中成功表达，并将mcjABCD基因同时整合至枯草芽孢杆菌基因组两个位点中，得到一株可以高效生产MccJ25的枯草芽孢杆菌W25AS2工程菌株，该菌可以在无抗性、无诱导、双位点共表达且无芽孢生成的条件下，对MccJ25具有较高的表达水平，并且表达产物对于肠炎沙门氏菌具有良好的杀菌活性，为MccJ25的生产应用开发了新的应用模式。
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公开(公告)号：CN114574412B
公开(公告)日：2022-11-29
申请号：CN202210149824.X
申请日：2022-02-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/31 , C12P21/02 , C07K14/245 , A61K35/742 , A61K38/16 , A61P31/04 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种表达MccJ25的枯草芽孢杆菌工程菌及其构建方法与应用。该工程菌通过将套索肽MccJ25改造后的mcjABCD序列克隆到枯草芽孢杆菌上构建得到；其中，mcjABCD序列如SEQ ID NO.1所示。本发明中构建的枯草芽孢杆菌工程菌能够成功表达MccJ25，且由于枯草芽孢杆菌属于食品级益生菌，可以避免内毒素的影响，因此，可将其作为生产MccJ25的益生菌使用；同时，该工程菌还对肠炎沙门氏菌等具有较强的抑制作用，可用在抗菌产品方面，以提升MccJ25的应用价值。
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