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公开(公告)号:CN118147030A
公开(公告)日:2024-06-07
申请号:CN202410321892.9
申请日:2024-03-20
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/117 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种提高禽用CpG产量的方法。本发明提供了一种大豆蛋白胨的应用量范围为16~30g/L,酵母粉的应用量范围为8~20g/L,甘油为8~25g/L的培养基。使用该培养基培养CpG合成工程菌,可以有效提高CpG的产量。此外,通过将溶氧量维持在30%,通过采取指数流法加补料策略进行高密度发酵,以及30℃到42℃的变温培养策略,进一步的提高了CpG的产量,最高能达到853mg/L的最高质粒产量,平均质粒产量达到538mg/L。对比摇瓶培养的质粒产量,本发明的发酵工艺将质粒产量提高了50~100倍。
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公开(公告)号:CN117164705B
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202311121402.2
申请日:2023-08-31
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种靶向H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的纳米抗体;所述纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示;该纳米抗体具有良好的生物活性且具有良好的特异性;为建立H5亚型禽流感快速诊断方法奠定基础,解决了以往检测过程中灵敏度低,效率低的问题;而且将抗体基因通过连接肽与麦芽糖结合蛋白基因连接构建表达载体,诱导融合蛋白表达,抗H5禽流感病毒纳米抗体融合蛋白为可溶性蛋白,该融合蛋白可实现规模化生产,对H5禽流感的监测具有重大的意义。
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公开(公告)号:CN117264984A
公开(公告)日:2023-12-22
申请号:CN202310489923.7
申请日:2023-04-28
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种微菌素MccH47和MccM表达优化工程菌及其构建及抗菌应用。该工程菌保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M2023417。该工程菌是通过pREDCas9大肠杆菌基因编辑技术,以EcN菌株为底盘菌,将组成型启动子219p、表达转录后修饰基因mchA序列整合至EcN基因组中得到的,具有无抗性标记基因、具有良好生长活性、遗传稳定性、高效表达MccH47和MccM的显著特点。相比野生型EcN和现有工程菌具有更强以及更广的抑菌效果,使其在微生态制剂方面具有潜在的应用价值。
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公开(公告)号:CN114774391B
公开(公告)日:2023-03-14
申请号:CN202210232896.0
申请日:2022-03-09
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种抗大肠杆菌的噬菌体内溶素及其应用。该噬菌体内溶素的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明将噬菌体内溶素的基因(SEQ ID NO.2)克隆进入表达载体,得到重组表达载体,然后将其转入宿主菌株,经诱导表达获得噬菌体内溶素蛋白,该生产方法操作简单、蛋白纯度较高,具有良好的稳定性和生物学活性,对大肠杆菌具有一定杀菌作用,能够有效地控制大肠杆菌病,可应用于生产和实践中保障公共卫生安全。
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公开(公告)号:CN113045670B
公开(公告)日:2022-11-01
申请号:CN201911381263.0
申请日:2019-12-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种可溶性鸡α干扰素融合蛋白及其生产方法与应用。本发明融合蛋白包括鸡α干扰素与鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白。本发明通过基因工程的方法,将鸡α干扰素基因与鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白基因连接,并进行密码子优化,构建表达载体,诱导融合蛋白表达,来促进鸡α干扰素在表达系统中的可溶表达,从而解决了鸡α干扰素在原核系统呈不可溶的难题,提高了准确性和重复性。本发明提供的鸡α干扰素融合蛋白的生产方法操作简单、成本低,可实现鸡α干扰素规模化生产。本发明生产的鸡α干扰素融合蛋白具有良好的生物学活性和稳定性,对鸡病毒性传染病的防治具有重大的意义。
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公开(公告)号:CN114574412A
公开(公告)日:2022-06-03
申请号:CN202210149824.X
申请日:2022-02-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/31 , C12P21/02 , C07K14/245 , A61K35/742 , A61K38/16 , A61P31/04 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种表达MccJ25的枯草芽孢杆菌工程菌及其构建方法与应用。该工程菌通过将套索肽MccJ25改造后的mcjABCD序列克隆到枯草芽孢杆菌上构建得到;其中,mcjABCD序列如SEQ ID NO.1所示。本发明中构建的枯草芽孢杆菌工程菌能够成功表达MccJ25,且由于枯草芽孢杆菌属于食品级益生菌,可以避免内毒素的影响,因此,可将其作为生产MccJ25的益生菌使用;同时,该工程菌还对肠炎沙门氏菌等具有较强的抑制作用,可用在抗菌产品方面,以提升MccJ25的应用价值。
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公开(公告)号:CN113121680B
公开(公告)日:2022-03-29
申请号:CN202110390340.X
申请日:2021-04-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/569 , G01N33/68 , A61K39/42 , A61K39/44 , A61P31/16 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物药物技术领域,具体涉及一种抗H5亚型禽流感纳米抗体蛋白及其编码基因与应用。所述的抗H5亚型禽流感病毒纳米抗体蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该纳米抗体蛋白特异性针对甲型H5亚型禽流感病毒可以解决现有H5亚型禽流感诊断试剂研发过程中抗体亲和力低、生产过程中纯度低、检测过程中灵敏度低的问题。本发明进一步将抗H5亚型禽流感病毒纳米抗体蛋白在大肠杆菌体内和麦芽糖结合蛋白标签融合表达,可实现快速检测抗原,并应用于甲型H5亚型禽流感快速检测试剂盒的开发,且该融合蛋白可用于防治甲型H5亚型禽流感产品的开发。
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公开(公告)号:CN112876543B
公开(公告)日:2021-10-08
申请号:CN202110087972.9
申请日:2021-01-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/195 , C12N15/31 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K38/16 , A61P31/04 , A23K20/147 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种小菌素MccY及其制备方法与应用,该小菌素MccY的氨基酸序列为GGRGHIAEYFSGPITQVSFYG。相较于MccJ25仅对肠炎等小部分血清型沙门菌有杀菌活性,该小菌素MccY对鸡白痢沙门菌、鼠伤寒沙门菌、肯塔基沙门菌、婴儿沙门菌、伦敦沙门菌、宋内志贺氏菌具有抑菌/杀菌作用,可杀灭MccJ25不能杀灭的其他沙门菌血清型,尤其是对畜禽生产中常见的鼠伤寒沙门菌、鸡白痢沙门菌具有显著杀菌效果,同时,对宋内志贺氏菌也有抑菌/杀菌作用,克服了小菌素窄谱性的短板,具有突破性的意义,具有作为抗生素替代物的潜力。
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公开(公告)号:CN106939042B
公开(公告)日:2020-12-15
申请号:CN201710045372.X
申请日:2017-01-19
Applicant: 华南农业大学 , 北京利昂盛生物技术有限公司
Abstract: 本发明提供一种猪α干扰素及其应用,依据大肠杆菌原核表达系统密码子的偏嗜性,选择高表达密码子设计合成一种猪α干扰素,其氨基酸序列序列如SEQ ID NO.1所示,编码其的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明制备猪α干扰素的方法简单,成本低,易于工业化生产,猪α干扰素表达量高,包涵体处理过程中变性彻底,复性蛋白得率高,本发明制得的猪α干扰素效价高,能够抑制100TCID50的水泡性口炎病毒,比活性高达108,具有较好的生物学活性功能,可用于制备预防和治疗猪的病毒感染类疾病和增强免疫功能的药物,具备广阔的市场应用前景。
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公开(公告)号:CN106399321A
公开(公告)日:2017-02-15
申请号:CN201610743781.2
申请日:2016-08-27
Applicant: 华南农业大学 , 北京利昂盛生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种制备融合表达重组鸡α干扰素的生产工艺,其包括以下步骤:S1、根据大肠杆菌密码子的偏好性对Genebank中发表的鸡α干扰素基因序列进行密码子优化,人工合成该鸡α干扰素基因;S2、根据密码子优化后的鸡α干扰素基因,设计三条特异性的引物;S3、构建含ProS2促溶标签的重组鸡α干扰素质粒;S4、重组表达质粒的转化和鉴定;S5、重组鸡α干扰素的诱导表达;S6、表达产物的提取与蛋白复性纯化:S61、包涵体的提取与处理;S62、包涵体变性;S63、变性液复性;S64、镍柱亲和纯化。本发明通过细胞病变抑制法测出了该干扰素具有抑制水泡口炎病毒繁殖的活性,活性单位达到7.32×107UI/mg。
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