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公开(公告)号:CN111778177B
公开(公告)日:2021-09-21
申请号:CN202010490087.0
申请日:2020-06-02
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体Mbov_0274基因突变株,属于动物传染病防治技术领域,所述突变株命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T9.202,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2020084,所述Mbov_0274基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示。本发明通过qRT‑PCR检测T9.202株刺激BoMac细胞表达IL‑8的能力,结果显示牛支原体菌株T9.202诱导BoMac细胞表达细胞因子的能力下降,可望在牛支原体免疫防治领域发挥重要作用。
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公开(公告)号:CN111394366B
公开(公告)日:2021-07-30
申请号:CN202010153884.X
申请日:2020-03-07
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防制技术领域,涉及牛分枝杆菌卡介苗低侵袭力突变株B2855,突变株B2855含有牛分枝杆菌卡介苗LipQ的突变体基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,突变位点位于基因组2757121位点后,位于为LipQ基因序列的564位点后,是一种新的结构基因和功能基因。本发明的突变株为低侵袭力,高胞内存活能力及高生长速度。突变株B2855保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2018865。本发明分离的突变基因及其突变株可望在牛分枝杆菌致病机理研究、免疫机制研究和制备防制牛结核病疫苗或药物中应用。
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公开(公告)号:CN113061581A
公开(公告)日:2021-07-02
申请号:CN202110301274.4
申请日:2021-03-22
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N7/00 , A61K39/265 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域,具体涉及一种山羊源牛疱疹病毒1型毒株BoHV‑1/Goat/CHN/HB01/2016。该毒株分离自腹泻山羊的粪便,在体外MDBK细胞中,通过病毒毒价、一步生长曲线、噬斑大小等结果,证明该毒株的复制能力减弱。病毒的基因组全长133,971bp,GC含量高达71%,通过gC片段的比对分析,该病毒属于BoHV‑1.1亚型,其中在gB、gK、gM、VP8蛋白中存在特异性突变,可能与毒株的致病力相关。该毒株攻毒牛后,通过临床症状评分、鼻腔排毒和肺脏组织病理变化,表明毒株致病力减弱。本发明为研究BoHV‑1的致病力和跨物种传播机制奠定重要基础,同时也为临床上的疫苗研制提供了重要材料。
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公开(公告)号:CN109750054B
公开(公告)日:2021-07-02
申请号:CN201910129071.4
申请日:2019-02-21
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防制技术领域,具体涉及牛支原体蛋白基因MbovGdpP及其应用。Mbov_0276根据牛支原体HB0801基因组序列人工合成获得。针对大肠杆菌对密码子的偏爱性,对Mbov_0276基因进行了修饰:将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中编码色氨酸的密码子UGG,得到大肠杆菌重组蛋白rMbovGdpP。Mbov_0276基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所示。突变株T6.290出现生长缺陷表型,在PPLO培养基上呈小菌落形态,对EBL细胞黏附减少,对盐离子的敏感性升高。该突变株可望在牛支原体致病机理和制备免疫防制药物中应用。
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公开(公告)号:CN112345768A
公开(公告)日:2021-02-09
申请号:CN202011155394.X
申请日:2020-10-26
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于生物医药检测技术领域,尤其涉及一种基于重组蛋白rsPgp3(rsPGP3)的家畜衣原体抗体的间接ELISA检测方法及试剂盒。本发明通过基因克隆表达技术,获取家畜衣原体rsPgp3。以rsPgp3为包被抗原建立起间接ELISA方法,包括抗原rsPgp3的制备、间接ELISA建立、判定标准的建立及临床血清学检测的应用。可用于家畜衣原体Pgp3蛋白特异性抗体的检测,以此判断牛羊群中衣原体发病情况及自然感染水平。目前该方法是国内首次利用家畜衣原体Pgp3蛋白建立检测牛羊衣原体抗体的ELISA。二抗采用HRP标记的链球菌G蛋白(HRP‑SPG),其特异性和敏感性明显高于传统二抗。
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公开(公告)号:CN111850002A
公开(公告)日:2020-10-30
申请号:CN202010571850.2
申请日:2020-06-22
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了牛支原体分泌蛋白MbovP570在制备牛支原体诊断试剂、药物或疫苗中的应用,属于动物传染病防治技术领域。所述牛支原体分泌蛋白MbovP570具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列,试验证明,所述牛支原体分泌蛋白MbovP570具有抗原性,可以与牛支原体阳性血清反应而不与牛支原体阴性血清反应,而且该蛋白可以诱导牛巨噬细胞高表达IL-8、IL-12,而IL-8可以激活中性粒细胞,IL-12可以激活NK细胞和T细胞。因此认为MbovP570可以激活宿主免疫系统,在研发新药和疫苗方面具有重要潜力。
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公开(公告)号:CN110257405B
公开(公告)日:2020-10-27
申请号:CN201910541509.X
申请日:2019-06-20
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体乙醇脱氢酶基因,具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,本发明还公开了一种牛支原体乙醇脱氢酶基因编码的蛋白,具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列,属于动物传染病防治与生物技术领域。本发明的重组蛋白具有乙醇脱氢酶活性,能够黏附牛肺上皮细胞系细胞(EBL),能与牛纤连蛋白(Fn)结合,同时还具有良好的免疫原性和反应原性,是牛支原体的一种毒力相关蛋白,在牛支原体致病机制研究、疫苗和诊断试剂研发中具有较好的应用前景。
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公开(公告)号:CN111394366A
公开(公告)日:2020-07-10
申请号:CN202010153884.X
申请日:2020-03-07
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防制技术领域,涉及牛分枝杆菌卡介苗低侵袭力突变株B2855,突变株B2855含有牛分枝杆菌卡介苗LipQ的突变体基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,突变位点位于基因组2757121位点后,位于为LipQ基因序列的564位点后,是一种新的结构基因和功能基因。本发明的突变株为低侵袭力,高胞内存活能力及高生长速度。突变株B2855保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2018865。本发明分离的突变基因及其突变株可望在牛分枝杆菌致病机理研究、免疫机制研究和制备防制牛结核病疫苗或药物中应用。
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公开(公告)号:CN108660144A
公开(公告)日:2018-10-16
申请号:CN201710200623.7
申请日:2017-03-30
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域,具体涉及一种牛支原体多功能蛋白基因CDNPase,蛋白基因Mbov_0328是从牛支原体HB0801基因组中克隆获得。根据大肠杆菌对密码子的偏爱性,申请人对Mbov_0328基因进行了修饰,将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中编码色氨酸的密码子UGG,最终获得由大肠杆菌表达的重组蛋白rCDNPase。本发明克隆的蛋白的编码基因的核苷酸序列是SEQ ID NO:11中1-969位碱基所示的序列,其蛋白质的序列如SEQ ID NO:12所示。本发明的重组蛋白具有磷酸二酯酶和超小片段核酸酶的活性。
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公开(公告)号:CN107176977A
公开(公告)日:2017-09-19
申请号:CN201610144587.2
申请日:2016-03-11
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/30 , C12N1/21 , G01N33/68 , G01N33/569 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域,具体涉及牛支原体MbovP730蛋白在自然感染和疫苗免疫鉴别中的应用。根据大肠杆菌的密码子偏爱性,对M.bovis HB0801的Mbov_730基因进行克隆,将Mbov_730基因修饰,将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中的色氨酸密码子UGG,进而在大肠杆菌中表达重组的牛支原体MbovP730蛋白。本发明的MbovP730蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO:13所示,该蛋白可作为抗原蛋白在制备鉴别诊断牛支原体野毒株感染和疫苗株免疫鉴别试剂盒中的应用。
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