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公开(公告)号:CN109593694B
公开(公告)日:2022-04-22
申请号:CN201811318486.8
申请日:2018-11-07
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于Ngpiwi蛋白介导的牛源大肠杆菌基因敲除菌株及其构建方法;所述牛源大肠杆菌基因敲除菌株为在牛源大肠杆菌基因组上缺失潜在毒力相关基因的ORF序列或部分序列的缺失菌株。该方法首先成功构建带有Ngpiwi和待缺失靶基因序列左右同源臂的重组质粒;其次将重组质粒化学转化至牛源大肠杆菌中,在28℃传代诱导双交换重组,PCR筛选出缺失靶基因序列的菌株,之后在无抗生素培养基中37℃诱导质粒丢失,从而获得缺失潜在毒力基因相关序列的菌株。该遗传操作系统质粒较小,操作容易,应用广泛,不存在潜在的脱靶效应,敲除效率较高,无抗性基因筛选标记,为牛源大肠杆菌基因工程疫苗的研发提供了优良工具。
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公开(公告)号:CN103421733B
公开(公告)日:2015-10-28
申请号:CN201310040712.1
申请日:2013-01-31
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/63 , C12N15/31 , A61K39/116 , A61K39/112 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/42
Abstract: 本发明属于动物细菌性疾病基因工程疫苗技术领域,具体涉及一种无抗性标记表达副猪嗜血杆菌表面抗原基因HbpB的重组猪霍乱沙门氏菌减毒疫苗的菌株构建、疫苗制备以及应用。获得一株无抗性标记的表达副猪嗜血杆菌表面抗原PalA的猪霍乱沙门氏菌asd-C500/pYA-PalA(保藏号为CCTCC NO:M2013053)。该重组菌缺失了猪霍乱沙门氏菌基因组上的asd基因,含有能在该菌株中表达asd基因和副猪嗜血杆菌外膜抗原PalA基因的重组质粒pYA-PalA。还公开了猪霍乱沙门氏菌asd-C500/pYA-PalA的构建方法与相应弱毒疫苗的制备方法,及在制备猪霍乱沙门氏菌-副猪嗜血杆菌疫苗中的应用。
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公开(公告)号:CN103421731B
公开(公告)日:2015-10-28
申请号:CN201310039080.7
申请日:2013-01-31
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/63 , C12N15/31 , A61K39/116 , A61K39/112 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/42
Abstract: 本发明属于动物细菌性疾病基因工程疫苗技术领域,具体涉及一种无抗性标记表达副猪嗜血杆菌表面抗原基因hps06257的重组副猪嗜血杆菌减毒沙门氏菌苗的菌株构建、疫苗制备及应用。获得一株无抗性标记的表达副猪嗜血杆菌表面抗原HPS06257的重组猪霍乱沙门氏菌asd- C500/pYA-06257(保藏号为CCTCC NO:M2013054)。该重组菌缺失了猪霍乱沙门氏菌基因组上的asd基因,含有能在该菌株中表达asd基因和副猪嗜血杆菌外膜抗原HPS06257基因的重组质粒pYA-06257。还公开了重组菌株asd- C500/pYA-06257的构建方法与相应副猪嗜血杆菌减毒沙门氏菌苗的制备方法,以及在制备副猪嗜血杆菌减毒沙门氏菌苗中的应用。
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公开(公告)号:CN103336121A
公开(公告)日:2013-10-02
申请号:CN201310234084.0
申请日:2013-06-13
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , C12N5/20
Abstract: 本发明公开了一种猪流感病毒H3亚型胶体金检测试剂盒,包括检测试纸,所述检测试纸包括PVC底板、滤样纸、免疫胶体金垫、免疫硝酸纤维素膜和吸水纸,所述免疫胶体金垫上包被有胶体金标记的单克隆抗体2B8和4H9,所述免疫硝酸纤维素膜上设有包被有单克隆抗体1F6和3D1的检测线和包被有抗鼠IgG抗体的质控线。本发明的试剂盒能直接对猪流感病毒H3亚型的临床样品进行检测,具有特异性强,灵敏度高,检测时间短等特点。
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公开(公告)号:CN119241693B
公开(公告)日:2025-05-27
申请号:CN202411368112.2
申请日:2024-09-29
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种抗犬瘟热病毒的基因工程嵌合抗体及应用。本发明的抗犬瘟热病毒基因工程嵌合抗体包括鼠‑犬嵌合抗体或鼠‑大熊猫嵌合抗体;所述鼠‑犬嵌合抗体的重链氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示,轻链氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示;所述鼠‑大熊猫嵌合抗体的重链氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示,轻链氨基酸序列如SEQ ID NO:12所示。该基因工程嵌合抗体表现出良好的中和CDV病毒的活性,可直接应用于犬科及大熊猫科动物犬瘟热疾病的治疗,对推动犬源化和大熊猫源化单克隆抗体药物的发展具有重要意义。
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公开(公告)号:CN115029291B
公开(公告)日:2025-02-18
申请号:CN202210615032.7
申请日:2022-05-31
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种表达鸭圆环病毒抗原Cap蛋白的重组禽多杀性巴氏杆菌,其制备方法和应用。本发明获得的重组禽多杀性巴氏杆菌具有良好的遗传稳定性和安全性,能诱导免疫鸭分别产生特异性针对禽巴氏杆菌和鸭圆环病毒的体液免疫反应,并对鸭圆环病毒感染引起的体重增长变缓及免疫系统损伤有良好的保护作用,可作为同时预防禽多杀性巴氏杆菌和鸭圆环病毒的疫苗株。
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公开(公告)号:CN119241693A
公开(公告)日:2025-01-03
申请号:CN202411368112.2
申请日:2024-09-29
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种抗犬瘟热病毒的基因工程嵌合抗体及应用。本发明的抗犬瘟热病毒基因工程嵌合抗体包括鼠‑犬嵌合抗体或鼠‑大熊猫嵌合抗体;所述鼠‑犬嵌合抗体的重链氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示,轻链氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示;所述鼠‑大熊猫嵌合抗体的重链氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示,轻链氨基酸序列如SEQ ID NO:12所示。该基因工程嵌合抗体表现出良好的中和CDV病毒的活性,可直接应用于犬科及大熊猫科动物犬瘟热疾病的治疗,对推动犬源化和大熊猫源化单克隆抗体药物的发展具有重要意义。
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公开(公告)号:CN118389749A
公开(公告)日:2024-07-26
申请号:CN202410489690.5
申请日:2024-04-23
Applicant: 华中农业大学 , 武汉科前生物股份有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于检测禽呼吸道重要病毒的4重荧光RT‑PCR引物组合及其试剂盒,所述4重荧光RT‑PCR引物组合包括检测禽流感病毒的引物和探针组合、检测新城疫病毒强毒的引物和探针组合、检测鸡传染性支气管炎病毒的引物和探针组合和检测鸡传染性喉气管炎病毒的引物和探针组合;本发明提供的4重荧光定量RT‑PCR检测方法覆盖广,特异性强,与传统的PCR检测方法和血凝试验等方法相比,操作简便,通量高,且具有更好的特异性和敏感性,因此在检测方法中囊括了特异性检测新城疫强毒株核酸的方法,省去了新城疫病毒感染样品扩增和测序的过程,给临床的诊断提供了便捷的工具。
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公开(公告)号:CN118256657A
公开(公告)日:2024-06-28
申请号:CN202410355367.9
申请日:2024-03-27
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了犬瘟热病毒、犬冠状病毒和犬副流感病毒的三重实时荧光RT‑PCR引物探针组合及应用,属于生物检测技术领域。本发明根据目前犬瘟热病毒、犬冠状病毒和犬副流感病毒的特点,设计出一组检测犬瘟热病毒、犬冠状病毒和犬副流感病毒的三重实时荧光RT‑PCR引物探针组合,采用本发明的引物探针组合能够同时快速检测出目前全世界各地流行的各种类型的犬瘟热病毒、犬冠状病毒和犬副流感病毒,且灵敏度普遍高于现有技术。基于本发明引物探针组合的RT‑PCR方法可特异性检测犬瘟热病毒、犬冠状病毒和犬副流感病毒,并可根据定量结果尽快采取有效的治疗和防控措施,减少这些疾病对养犬业造成的危害,对犬传染病的防控具有重要意义。
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公开(公告)号:CN117721249A
公开(公告)日:2024-03-19
申请号:CN202311669696.2
申请日:2023-12-07
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种犬呼吸道病毒三重实时荧光RT‑PCR引物探针组合,所述三重实时荧光RT‑PCR引物探针组合包括用于扩增犬瘟热病毒的引物探针组合、用于扩增犬腺病毒的引物探针组合和用于扩增犬副流感病毒的引物探针组合,基于该试剂盒的RT‑PCR方法可特异性的检测目前全世界各地流行的各种类型的犬瘟热病毒、犬腺病毒以及犬副流感病毒,且灵敏度普遍高于世面上的检测试剂盒,具有灵敏度好、特异性高、用时短、稳定性高等特点。从而为检测犬呼吸道传染病病原提供重要工具,为犬呼吸道传染病诊断提供技术支持,对犬呼吸道传染病防控具有重要意义。
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