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公开(公告)号:CN106047713A
公开(公告)日:2016-10-26
申请号:CN201610245351.8
申请日:2016-04-19
Applicant: 北京理工大学 , 南京精微生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一株嗜松篮状菌(Talaromyces pinophilum)菌株Li‑93,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.11765。本发明还提供一种用于制备单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的制品,该制品的活性成分为嗜松篮状菌Li‑93。本发明还提供一种制备单葡萄糖醛酸基甘草次酸的方法。利用上述制品和方法制备GAMG时,具有产物单一,无副产物生成的特点,在常规条件下制备GAMG得率为96%左右,高于现有水平,因此本发明为制备GAMG提供了一种简单有效的产品及方法。
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公开(公告)号:CN110055232B
公开(公告)日:2020-08-25
申请号:CN201910022893.2
申请日:2019-01-10
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明涉及二个甘草蔗糖合酶及其在合成甘草次酸糖基化衍生物中的应用。本发明通过对乌拉尔甘草基因组数据库的系统分析,从乌拉尔甘草细胞中克隆得到二种来源于新型甘草蔗糖合酶基因GuSuS1和GuSuS2及其编码的蛋白,在大肠杆菌细胞中成功异源表达,并验证其催化功,同时偶联蔗糖合酶GuSuS1和糖基转移酶UGT73C11构建UDP循环再生系统,该系统可催化甘草次酸合成3‑O‑单葡萄糖基甘草次酸、30‑O‑单葡萄糖基甘草次酸、3‑O‑单葡萄糖基‑30‑O‑单葡萄糖基甘草次酸三种甘草次酸糖基化衍生物。本发明填补了甘草蔗糖合酶研究方面的空白,为后续甘草细胞蔗糖及核苷糖代谢相关研究提供了一定的参考和依据,同时提供的UDP循环再生体系也大大简便了甘草次酸糖基化修饰过程。
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公开(公告)号:CN106978407B
公开(公告)日:2020-04-14
申请号:CN201610953058.7
申请日:2016-11-02
Applicant: 北京理工大学 , 南京精微生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种β‑葡萄糖醛酸苷酶及其基因、表达载体和转化体及在制备单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)中的应用。该β‑葡萄糖醛酸苷酶的基因序列如SEQ ID No.1所示。将该基因与表达载体连接后,转化进毕赤酵母中,获得毕赤酵母工程菌。将该工程菌表达的β‑葡萄糖醛酸苷酶重组酶用于GAMG的生产时,发现该酶具有底物特异性高,无副产物甘草次酸的生成,GAMG的产率为95%左右,显示了该β‑葡萄糖醛酸苷酶及其基因在生产GAMG中的良好应用前景。
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公开(公告)号:CN106047713B
公开(公告)日:2019-07-02
申请号:CN201610245351.8
申请日:2016-04-19
Applicant: 北京理工大学 , 南京精微生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一株嗜松篮状菌(Talaromyces pinophilum)菌株Li‑93,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.11765。本发明还提供一种用于制备单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的制品,该制品的活性成分为嗜松篮状菌Li‑93。本发明还提供一种制备单葡萄糖醛酸基甘草次酸的方法。利用上述制品和方法制备GAMG时,具有产物单一,无副产物生成的特点,在常规条件下制备GAMG得率为96%左右,高于现有水平,因此本发明为制备GAMG提供了一种简单有效的产品及方法。
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公开(公告)号:CN109706091A
公开(公告)日:2019-05-03
申请号:CN201811564910.7
申请日:2018-12-20
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明“一种工业生产甘草次酸的工程菌GA108/PGAPZαA-Atgusmix及方法”,属于酶工程及微生物技术领域。所述工程菌GA108/PGAPZαA-Atgusmix的保藏号为CGMCC No.16731。同时基于所述工程菌GA108/PGAPZαA-Atgusmix本发明还提供一种工业化生产甘草次酸的方法,其包括:采用工程菌GA108/PGAPZαA-Atgusmix对底物进行催化反应。本发明的工程菌GA108/PGAPZαA-Atgusmix性能优良、可用于工业生产GA且GA得率高达94.9%,为甘草次酸大规模工业化生产奠定基础。
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公开(公告)号:CN106047839A
公开(公告)日:2016-10-26
申请号:CN201610245024.2
申请日:2016-04-19
Applicant: 北京理工大学 , 南京精微生物科技有限公司
CPC classification number: C12N9/2402 , C12Y302/01031
Abstract: 本发明提供一种用于提高真菌产β‑葡萄糖醛酸苷酶酶活的发酵培养基及方法。该发酵培养基为马铃薯和水的煮沸物过滤所得滤液中加入促进剂和水所得的溶液,所述促进剂为甘草酸或其盐。利用本发明提供的发酵培养基和方法分别将产紫青霉(Penicillium purpurogenum)Li‑3、嗜松篮状菌(Talaromyces pinophilum)Li‑93、土曲霉(Aspergillus terreus)Li‑20和焦曲霉(Aspergillus ustus)Li‑62进行发酵产β‑葡萄糖醛酸苷酶的培养,发现上述各真菌发酵酶活单位与现有发酵方法所得相比提高了100‑600%,发酵时间提前了36‑60小时。因此,本发明提供的真菌产β‑葡萄糖醛酸苷酶的发酵培养基及方法具有操作简单、成本廉价、发酵酶活单位高、产酶时间短的特点。
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公开(公告)号:CN105002188A
公开(公告)日:2015-10-28
申请号:CN201510069358.4
申请日:2015-02-10
Applicant: 北京理工大学
IPC: C12N15/31 , C12N15/113 , C12N15/09 , C12R1/19
Abstract: 发酵过程中,微生物的生长和生产经常遭受热胁迫的限制。以构建耐热大肠杆菌底盘宿主为目的,本发明利用合成生物学方法创建了一种微生物智能梯级耐热调控方法,能在细胞和菌群两个层面上提高微生物的耐热性,其主要包括梯级耐热系统和数量调控系统。梯级耐热系统包括热激蛋白(HSPs)、泛素和转录因子等耐热功能元件,以人工设计的RNA温敏开关与启动子组合为调控元件,可以实现微生物的梯级耐热。微生物数量调控系统则利用群体感应系统和RNA温敏开关组合为与门开关,动态地开启利他性程序死亡系统,有效地控制代谢热,在菌群层面上提高微生物适应热胁迫的能力。通过两个系统的协同作用,提高了微生物对特定高温以及高温波动的适应性与鲁棒性。
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公开(公告)号:CN118879754B
公开(公告)日:2025-05-09
申请号:CN202410963001.X
申请日:2024-07-18
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本申请公开了一种基于FRET原位检测酵母表面展示寡聚酶四级结构的方法,包括:以酿酒酵母为底盘菌株,敲除基因PPQ1、ALO1、NAM7和GAL80,引入多拷贝的酪氨酰‑tRNA合酶和tRNACUATyr;选择寡聚酶界面处的位点分别突变成半胱氨酸和TAG密码子,使用锚定蛋白介导寡聚酶的酿酒酵母表面展示;通过添加半乳糖和对叠氮基‑苯丙氨酸发酵,诱导蛋白表达;添加Cy3‑马来酰亚胺用于偶联酵母表面展示寡聚酶的半胱氨酸,添加Cy5‑DBCO用于偶联酵母表面展示寡聚酶的叠氮基团;使用共聚焦显微镜表征供体、受体和FRET信号。本发明无需从酵母细胞表面分离展示的寡聚酶,能够在细胞表面原位检测寡聚酶的四级结构。
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公开(公告)号:CN118272337A
公开(公告)日:2024-07-02
申请号:CN202410433715.X
申请日:2024-04-11
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 发明“三个UDP‑糖基转移酶及其在合成齐墩果酸糖苷化合物中的应用”属于生物工程与技术领域。本发明提供一种UDP‑糖基转移酶,涉及三个来源于油橄榄的UDP‑糖基转移酶Oe440、Oe139、Oe535,实现在齐墩果酸C28‑COOH特异性修饰一分子糖基生成28‑氧‑葡萄糖‑齐墩果酸;提供了一株工程化酿酒酵母菌株,以酿酒酵母为宿主,异源表达来源于甘草的β‑香树脂醇合酶(GgbAS)、来源于蒺藜苜蓿的P450氧化酶(CYP716A12)、来源于迷迭香的还原酶(RoCPR)及来源于油橄榄的UDP‑糖基转移酶(Oe440)实现了利用微生物从头合成28‑氧‑葡萄糖‑齐墩果酸。本发明通过设计和创建微生物细胞工厂,发酵生产28‑氧‑葡萄糖‑齐墩果酸,既能有效控制原料供给,又能保护自然资源及环境,是一种绿色高效的新型生产模式。
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公开(公告)号:CN114134060A
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN202111498550.7
申请日:2021-12-09
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明“4株可高效合成人参皂苷Ro合成途径中间产物或终产物的工程酵母菌及方法”属于合成生物学及代谢工程领域。4株工程酵母菌分别是:保藏号为CGMCC No.23731的一株可高效合成金盏花苷E的工程酵母菌CE‑P1,保藏号为CGMCC No.23732的一株可高效合成竹节参皂苷Ⅳa的工程酵母菌IVA‑P1,保藏号为CGMCC No.23733的一株可高效合成姜状三七苷R1的工程酵母菌R1‑P1,保藏号为CGMCC No.23734的一株可高效合成人参皂苷Ro的工程酵母菌Ro‑P1。上述工程酵母菌稳定,生长周期短,培养条件温和,培养成本低,目标产物产量高,实现了目标化合物的高效从头合成。
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