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公开(公告)号：CN114152604A
公开(公告)日：2022-03-08
申请号：CN202010925734.6
申请日：2020-09-07
Applicant: 南京大学
IPC: G01N21/76 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种用于细胞成像的无试剂电致化学发光(ECL)检测方法。该方法用设计合成的三乙胺基团(TEA)偶联聚合点(TEA‑Pdots)为发光体，在无外加共反应剂存在时对活细胞表面待测分子进行原位无试剂ECL成像检测。本发明所述的成像方法首先将TEA‑Pdots与链霉亲和素(SA)偶联，再通过生物素标记抗体与相应待测分子及SA的双识别作用，将获得的SA@TEA‑Pdots标记到细胞表面待测分子上；进一步通过温育将该细胞固定在ITO导电玻片表面，利用循环电位扫描获得ECL信号。以人表皮生长因子受体‑2(HER2)为例，本发明实现了活细胞表面HER2的ECL成像检测。本发明基于分子内双电子转移增强聚合物点的ECL，首次实现了活细胞表面待测分子在无外加共反应剂存在时的ECL成像检测，为活细胞表面相关分子的原位检测提供了一个简单、可靠的生物成像方法。
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公开(公告)号：CN111735801B
公开(公告)日：2021-09-28
申请号：CN201910226079.2
申请日：2019-03-25
Applicant: 南京大学
IPC: G01N21/64 , C12Q1/6813
Abstract: 本发明涉及一种基于水凝胶的HCR和阳离子交换反应的荧光分析方法，通过硅烷化反应在基片表面修饰C‑C双键，利用紫外光引发的自由基聚合反应借助光掩膜在基片上构建PEG水凝胶阵列。目标分子打开修饰在水凝胶上的捕获探针的发卡结构，引发生物素化发卡H1、H2间的杂交链反应，在传感位点形成长串双链DNA。通过生物素‑链霉亲和素特异结合反应，将生物素化的量子点CdS固定到传感位点。通过Ag+引发CdS发生阳离子交换反应，Cd2+使得Rhod‑5N的荧光极大增强。利用基因芯片扫描仪对阵列点荧光进行定量，从而实现目标分子的高灵敏高特异性分析。本发明方法操作简单、成本低、灵敏度高、特异性好、普适性高。
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公开(公告)号：CN109870433B
公开(公告)日：2021-06-15
申请号：CN201711272434.7
申请日：2017-12-01
Applicant: 南京大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明涉及一对用于细胞表面神经节苷脂定量筛查的浮力微球探针及其制备方法。该浮力微球探针包含提取探针和收集探针。提取探针以马来酰亚胺修饰的二氧化硅浮力微球为基底，在其上共价结合具有核酸内切酶切割位点和硼酸末端的DNA分子。通过硼酸与细胞表面唾液酸的共价识别作用，提取探针可以将细胞表面包含唾液酸的生物分子通过浮力提取。在核酸内切酶的作用下，被提取的生物分子可以被释放到溶液中，并由十八烷硅烷化的收集探针通过疏水作用收集其中的结合有核酸碎片的神经节苷脂，进一步利用体外杂交链反应对神经节苷脂进行荧光定量。
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公开(公告)号：CN107153092B
公开(公告)日：2019-07-23
申请号：CN201710512030.4
申请日：2017-06-28
Applicant: 南京大学
IPC: G01N27/62 , G01N1/28 , C08F120/54
Abstract: 本发明涉及温敏响应高分子阵列的制备方法及其在样品预处理中的应用，基于光影印技术和炔基与巯基的点击化学技术，在氧化铟锡玻片(ITO玻片)构建羟基亲水性微阵列，再在亲水微阵列内基于表面引发原子转移自由基聚合生成高分子聚(N‑异丙基丙烯酰胺)(PNIPAM)的可控亲水性阵列。当低于临界温度时高分子阵列其亲水性作用使得样品汇聚在玻片表面，高于临界温度时蛋白质/肽段通过疏水作用与疏水性的高分子阵列相吸附，而共存的盐和污染物则被冲走，从而实现样品靶上自除盐和高效富集的预处理，进而可对目标样品进行MALDI‑MS一步快速检测。本发明制备及操作简单、普适性高、分析时间短、成本低廉，具有一定的生物医学应用价值。
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公开(公告)号：CN104225595B
公开(公告)日：2018-12-21
申请号：CN201310222239.9
申请日：2013-06-06
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明涉及一种乳腺癌诊疗一体化纳米粒子(Apt‑TNP)及其制备方法。Apt‑TNP以聚乳酸‑聚乙二醇为载体，内部包埋酸性pH响应荧光探针BDP‑688及近红外光敏剂R16FP，表面共价偶联乳腺癌特异核酸适体制得。Apt‑TNP能特异结合乳腺癌细胞并到达溶酶体，溶酶体酸性pH环境触发BDP‑688产生荧光，实现癌细胞的精确成像；用808nm光激活R16FP产生活性氧，引发溶酶体内组织蛋白酶释放，使癌细胞凋亡，实现光动力学治疗；细胞凋亡过程伴随pH的变化，导致BDP‑688荧光减弱，实现疗效的实时监测。Apt‑TNP同时具备乳腺癌靶向成像、高效治疗及疗效监测功能，具有很好的临床应用潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109030429A
公开(公告)日：2018-12-18
申请号：CN201710445317.X
申请日：2017-06-09
Applicant: 南京大学
IPC: G01N21/64
CPC classification number: G01N21/6486
Abstract: 本发明涉及一种对活细胞内microRNA(miRNA)原位成像的纳米放大自参比探针及其制备方法。该探针是将核酸发卡修饰的上转换纳米粒子(UNP‑H1)和荧光分子修饰的发卡分子(H2‑F)通过脂质体包裹而成。当探针进入细胞后，UNP‑H1和H2‑F被释放，只有当H1与miRNA杂交后，H2可以取代miRNA而与UNP‑H1杂交，释放出的miRNA启动下一个循环以放大信号。在近红外光激发下，UNP的发射带1(EEB1)与F之间发生发光共振能量转移(LRET)。以UNP的发射带2(EEB2)通道为自参比，LRET与EEB2通道的发光强度比值(ILRET/IEEB2)可用于细胞内miRNA的相对定量。
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公开(公告)号：CN103993078B
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201410193997.7
申请日：2014-05-09
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明涉及一种可对细胞内端粒酶活性进行原位成像检测的纳米探针及其制备方法。纳米探针以金纳米粒子(AuNP)为载体，负载特殊设计的DNA分子信标(MB)。该MB为茎‑环结构，并带有一个缺口，将整个DNA序列分为两段：较短的一段是端粒酶引物序列(TSP)；较长的一段(1‑MB)含环状结构，其茎部3’端的巯基可共价连接AuNP，5’端修饰荧光分子Cy5。由于荧光共振能量转移，Cy5的荧光被AuNP猝灭，纳米探针的荧光状态为“关”。将探针与细胞温育，探针进入细胞后，在细胞质内端粒酶的作用下，TSP被延长并发生内部链取代，使1‑MB环被打开，导致Cy5离开AuNP表面，将荧光状态转换为“开”，进而利用激光共聚焦荧光显微镜观察Cy5的荧光，可实现细胞内端粒酶活性的原位成像分析。该探针可区分肿瘤和正常细胞，还可用于监测细胞内端粒酶活性在端粒酶抑制药物作用下的变化，因此该发明具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN103792372A
公开(公告)日：2014-05-14
申请号：CN201410058187.0
申请日：2014-02-20
CPC classification number: G01N33/6803 , G01N27/3276
Abstract: 本发明涉及一种基于双核酸标记的比率电化学免疫传感器。在金电极表面组装两端分别标记巯基与二茂铁的DNA3，与亚甲基蓝标记的互补DNA1-抗体1杂交，构成比率电化学免疫传感界面。目标蛋白质存在时，DNA2-抗体2、目标蛋白质与DNA1-抗体1形成夹心免疫复合物，产生邻位效应，使DNA2与DNA1杂交，导致DNA1-抗体1脱离传感界面、自由的DNA3在表面形成发夹结构。在该过程中，电化学活性的亚甲基蓝和二茂铁分别远离和靠近电极表面，其氧化电流分别减小和增加。通过检测这两个电流的比值，实现溶液中目标蛋白质的浓度测定。该传感器灵敏度高，检测浓度范围宽，实现了蛋白质的快速、一步化检测，具有临床应用价值。
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公开(公告)号：CN103529022A
公开(公告)日：2014-01-22
申请号：CN201210232537.1
申请日：2012-07-06
Applicant: 南京大学
IPC: G01N21/78
Abstract: 本发明涉及一种用氧化还原性有机染料指示量子点光电过程而实现可视化快速检测铜离子的方法。特征是：①有机染料直接接受量子点光电子及其耦合质子而被还原；②通过铜离子对量子效应的干扰，影响染料的还原效率；③染料还原效率的改变导致其颜色发生变化；④颜色变化可由肉眼直接读出，并与铜离子浓度相关。本发明直接用太阳光光照产生量子点的光电效应，有机染料、量子点与待测溶液直接在玻璃或类似基质上混合、反应并产生颜色变化，利用扫描或照相方法获得检测信号，无需其它设备，检测成本低，操作方便，方法灵敏、快速，检测的浓度范围宽，抗干扰能力强，适用于铜含量分析的广阔领域。
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公开(公告)号：CN1866018B
公开(公告)日：2012-03-28
申请号：CN200610040051.2
申请日：2006-04-30
Applicant: 南京大学
Inventor： 鞠熀先
IPC: G01N33/558 , G01N27/416
CPC classification number: G01N33/5438 , G01N27/30 , G01N33/57484
Abstract: 本发明公开了一种恶性肿瘤电化学筛查与早期诊断仪，该仪器的免疫测定芯片(1)通过接口与时间分辨多通道恒电位仪(2)相连接，时间分辨多通道恒电位仪(2)通过接口和数据处理与显示系统(3)相连接；其中免疫测定芯片(1)包括固定有不同抗原分子功能化膜的八个工作电极和Ag导线(a)、Ag/AgCl参比电极(b)、碳对电极(c)、绝缘膜(d)；利用电极表面固定的抗原分子与样品中的抗原分子竞争温育溶液中的酶标抗体，使部分酶标抗体连接到电极表面，获得催化电流，间接获得溶液中待测的8种抗原的含量；通过软件处理，以直观易读的图像颜色，显示测定结果。本诊断仪成本低，智能化，检测快，在肿瘤的筛查和监测方面具有广阔的应用前景。
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