公开(公告)号：CN109870433A

公开(公告)日：2019-06-11

申请号：CN201711272434.7

申请日：2017-12-01

Applicant: 南京大学

Inventor： 鞠熀先 ,  陈云龙 ,  刘惠普

IPC: G01N21/64

Abstract: 本发明涉及一对用于细胞表面神经节苷脂定量筛查的浮力微球探针及其制备方法。该浮力微球探针包含提取探针和收集探针。提取探针以马来酰亚胺修饰的二氧化硅浮力微球为基底，在其上共价结合具有核酸内切酶切割位点和硼酸末端的DNA分子。通过硼酸与细胞表面唾液酸的共价识别作用，提取探针可以将细胞表面包含唾液酸的生物分子通过浮力提取。在核酸内切酶的作用下，被提取的生物分子可以被释放到溶液中，并由十八烷硅烷化的收集探针通过疏水作用收集其中的结合有核酸碎片的神经节苷脂，进一步利用体外杂交链反应对神经节苷脂进行荧光定量。

公开(公告)号：CN109870433B

公开(公告)日：2021-06-15

申请号：CN201711272434.7

申请日：2017-12-01

Applicant: 南京大学

Inventor： 鞠熀先 ,  陈云龙 ,  刘惠普

IPC: G01N21/64

Abstract: 本发明涉及一对用于细胞表面神经节苷脂定量筛查的浮力微球探针及其制备方法。该浮力微球探针包含提取探针和收集探针。提取探针以马来酰亚胺修饰的二氧化硅浮力微球为基底，在其上共价结合具有核酸内切酶切割位点和硼酸末端的DNA分子。通过硼酸与细胞表面唾液酸的共价识别作用，提取探针可以将细胞表面包含唾液酸的生物分子通过浮力提取。在核酸内切酶的作用下，被提取的生物分子可以被释放到溶液中，并由十八烷硅烷化的收集探针通过疏水作用收集其中的结合有核酸碎片的神经节苷脂，进一步利用体外杂交链反应对神经节苷脂进行荧光定量。

公开(公告)号：CN115704823A

公开(公告)日：2023-02-17

申请号：CN202110928483.1

申请日：2021-08-13

Applicant: 南京大学

Inventor： 鞠熀先 ,  陈云龙 ,  刘惠普

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/53 ,  C12Q1/6834 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明涉及一种用于分析细胞表面膜蛋白与细胞膜之间的相互作用的分子测力计。它是一种磷脂双分子层修饰的空心二氧化硅微球，表面嵌有两端分别修饰烷烃链和叠氮的DNA1。检测方案首先用二苯并环辛炔、二嗪和荧光染料FAM标记的DNA2识别细胞表面待检测的膜蛋白，紫外光照使二嗪与相应膜蛋白共价连接。然后利用浮力使细胞和分子测力计先接触后分离，烷烃链‑磷脂双分子层相互作用与膜蛋白‑细胞膜相互作用间的竞争会将膜蛋白拔出细胞膜。最后，对不同烷烃链长度制得的分子测力计处理过的细胞进行荧光成像，确定细胞表面荧光强度下降前后所使用的分子测力计上的烷烃链长度，代入光镊获得的相互作用力标尺，实现膜蛋白与细胞膜相互作用的定量。