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公开(公告)号：CN110068687A
公开(公告)日：2019-07-30
申请号：CN201910408895.5
申请日：2019-05-17
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N33/68 , G01N27/447 , G01N1/34
Abstract: 本发明公开了一种血清中心肌肌钙蛋白I复合物的定量测量方法，先将EDTA螯合基质环境和cTnC本身所包含的Ca2+，再外加Ca2+使cTnC和Ca2+重新结合，最后通过EDTA螯合和cTnC结合的Ca2+，对Ca2+检测，从而定量测量血清中所有与cTnC结合的cTnI复合物。本发明的方法明确了被测物质，实现了对待测物质的范围划定，定义了混合物中被测组分中具体形式。通过ICP-MS法简化了蛋白质前处理步骤，消除了过程中引入的其他变量和由此导致的不确定度。不选用特征肽段进入质谱的检测方法，消除了由于异质性而产生的质荷比改变所产生的结果差异。不选用制备过程复杂表征困难的同位素标记的重组cTnI作为内标，简化了实验方案。标准物质定值结果可最终溯源到SI单位。
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公开(公告)号：CN101974556B
公开(公告)日：2015-02-11
申请号：CN201010541455.6
申请日：2010-11-11
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明涉及一种同位素标记的重组C反应蛋白的制备方法，包括以下步骤：构建含有C反应蛋白基因的重组载体;将该重组载体转化入宿主细胞进行重组表达，所述用于重组表达的培养基中添加有稳定同位素;将表达的重组蛋白纯化，并测定其纯度。本发明的有益效果是：设计了以同位素15N标记的重组C反应蛋白，替代培养基中的N源，得到的表达纯化后的产物可作为内标与目标C反应蛋白同时酶切，之后进行质谱测量，这样就可以抵消酶切不完全对测量结果造成的不确定度，从而达到对蛋白的更准确定量，准确度高，解决现有技术中由于蛋白质酶解、水解不完全所造成的测量误差，从而极大的降低测量过程中所产生的不确定度，提高测量精度。
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公开(公告)号：CN102262134B
公开(公告)日：2013-07-31
申请号：CN201110163340.2
申请日：2011-06-17
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明提供一种CryIAb蛋白标准物质定值的方法，BT晶体蛋白具有高特异的杀虫活性，是近年来应用最为广泛的生物杀虫剂。在实际检测工作中，经常需要对待检测转基因作物进行CryIAb蛋白定性和定量检测，但是对于其标准物质定值是否准确的研究现在还很少。本发明所解决的技术问题是填补上述技术空白，提供一种CryIAb蛋白标准物质定值的方法，具有良好的准确性、可靠性和溯源性。
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公开(公告)号：CN102353726A
公开(公告)日：2012-02-15
申请号：CN201110163446.2
申请日：2011-06-17
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明提供一种CryIAc蛋白标准物质定值的方法，BT晶体蛋白具有高特异的杀虫活性，是近年来应用最为广泛的生物杀虫剂。在实际检测工作中，经常需要对待检测转基因作物进行CryIAc蛋白定性和定量检测，但是对于其标准物质定值是否准确的研究现在还很少。本发明所解决的技术问题是填补上述技术空白，提供一种CryIAc蛋白标准物质定值的方法，具有良好的准确性、可靠性和追溯性。
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公开(公告)号：CN102262134A
公开(公告)日：2011-11-30
申请号：CN201110163340.2
申请日：2011-06-17
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明提供一种CryIAb蛋白标准物质定值的方法，BT晶体蛋白具有高特异的杀虫活性，是近年来应用最为广泛的生物杀虫剂。在实际检测工作中，经常需要对待检测转基因作物进行CryIAb蛋白定性和定量检测，但是对于其标准物质定值是否准确的研究现在还很少。本发明所解决的技术问题是填补上述技术空白，提供一种CryIAb蛋白标准物质定值的方法，具有良好的准确性、可靠性和溯源性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116046923A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202211387044.5
申请日：2022-11-07
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种血清中降钙素原的定值方法，包括以下步骤：(1)血清降钙素原(PCT)的纯化富集；(2)降钙素原纯度检测；(3)酶切；(4)降钙素原定量分析。本发明方法使用LC‑MS/MS方法对血清PCT进行定值，原理是通过特征肽段的浓度推算出蛋白质的浓度，而肽段的浓度可以根据液质分析MRM模式谱图的峰面积表示，选用3条肽段计算PCT浓度，以3者平均值定值。在通常实验中，蛋白质的提取率、酶切效率、仪器的稳定性、实验误差等都会影响蛋白质的定量，而本发明方法在样品中添加等量的内标——标记肽段，可以消除以上误差，得到血清样品中PCT的浓度。
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公开(公告)号：CN111909948A
公开(公告)日：2020-11-10
申请号：CN202010864911.4
申请日：2020-08-25
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种稳定肌钙蛋白I标准物质及其制备方法，在cTnI稳定片段氨基酸序列基础上，转化BL21(DE3)感受态细胞，超声破碎诱导表达的工程菌获取cTnI包涵体，经1％Triton X-100，2M脲洗涤后溶解在8M脲中，后经CM-FF柱上复性和稀释复性纯化得到了肌钙蛋白I的标准物质。其中，所述cTnI稳定片段氨基酸序列选自cTnI蛋白序列中第30-第110的氨基酸序列片段，所述cTnI蛋白序列如SEQ No：1所示。本发明采用了一种新方法实现了对肌钙蛋白I标准物质的制备，解决了肌钙蛋白不稳定的问题。该标准物质可在低温条件下保持长期稳定，满足国家一级标准物质的要求。该标准物质为肌钙蛋白序列的稳定片段，能够覆盖市面上多数试剂盒的抗原表位要求。
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公开(公告)号：CN110865193A
公开(公告)日：2020-03-06
申请号：CN201911162765.4
申请日：2019-11-25
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N33/68 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料制备方法及应用，包括以下步骤：(1)传统法制备单分散SiO2微球；(2)丁二酸改性；(3)浸渍SiO2微球；(4)多孔PVDF膜的制备；(5)多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料的制备。将制备的多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料应用于C肽定量限考察，通过与未分散免疫磁珠对比，用多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料提取C肽纯品后将定量限由柱上0.3ng降低至0.05ng，与日本计量院发表的C肽潜在参考测量程序相比，不通过衍生化处理后就能达到定量正常人血清C肽的目标，简化了检测流程，同时减少了磁珠和抗体的用量。
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公开(公告)号：CN110850099A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201911162764.X
申请日：2019-11-25
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N27/447 , G01N30/72
Abstract: 本发明公开了一种血清中C反应蛋白的定值方法，包括以下步骤：(1)血清C反应蛋白(CRP)的纯化富集；(2)C反应蛋白纯度检测；(3)酶切；(4)C反应蛋白定量分析。该方法无需考虑蛋白质提取率、酶切效率、仪器稳定性等因素，整个实验只需要考虑纯品CRP浓度的准确性，而本发明使用的纯品CRP溶液是国家一级标准物质(由中国计量院研制)，数值可靠、可溯源至SI单位，并且原料是天然CRP，也无需考虑结构的差异，而这也是相较于同位素标记的全蛋白优异的地方。
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公开(公告)号：CN110068687B
公开(公告)日：2020-01-31
申请号：CN201910408895.5
申请日：2019-05-17
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N33/68 , G01N27/447 , G01N1/34
Abstract: 本发明公开了一种血清中心肌肌钙蛋白I复合物的非诊断目的的定量测量方法，先将EDTA螯合基质环境和cTnC本身所包含的Ca2+，再外加Ca2+使cTnC和Ca2+重新结合，最后通过EDTA螯合和cTnC结合的Ca2+，对Ca2+检测，从而定量测量血清中所有与cTnC结合的cTnI复合物。本发明的方法明确了被测物质，实现了对待测物质的范围划定，定义了混合物中被测组分中具体形式。通过ICP‑MS法简化了蛋白质前处理步骤，消除了过程中引入的其他变量和由此导致的不确定度。不选用特征肽段进入质谱的检测方法，消除了由于异质性而产生的质荷比改变所产生的结果差异。不选用制备过程复杂表征困难的同位素标记的重组cTnI作为内标，简化了实验方案。标准物质定值结果可最终溯源到SI单位。
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