公开(公告)号：CN119804868A

公开(公告)日：2025-04-11

申请号：CN202510301610.3

申请日：2025-03-14

Applicant: 中国计量科学研究院

Inventor： 宋德伟 ,  孙浩峰 ,  刘健仪 ,  张琦

IPC: G01N33/574 ,  G01N33/68 ,  G01N33/543 ,  G01N33/577 ,  G01N33/60 ,  G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/14 ,  G01N30/08 ,  G01N30/72

Abstract: 本发明公开了一种基于磁固相萃取‑同位素稀释质谱法的血清中甲胎蛋白定值方法，包括以下步骤：（1）血清中甲胎蛋白（AFP）的富集；（2）胰蛋白酶酶切；（3）AFP定量分析。本发明的定值方法分别将两种AFP的单克隆抗体结合到磁珠上制备混合磁珠溶液，通过磁固相萃取（MSPE）的方式富集血清中的AFP实现在对血清中低丰度AFP的高效富集，通过在洗脱溶液中添加有机相增强蛋白的洗脱，实现高回收率，经胰蛋白酶酶切后，通过加入同位素标记特征肽段，用同位素稀释液相色谱串联质谱法（ID‑LC‑MS/MS）对其进行定量分析，使定量结果可以溯源至SI单位。

公开(公告)号：CN116046923A

公开(公告)日：2023-05-02

申请号：CN202211387044.5

申请日：2022-11-07

Applicant: 中国计量科学研究院

Inventor： 刘健仪 ,  张琦 ,  蒋泽琳 ,  倪小丽 ,  宋德伟

IPC: G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/32 ,  G01N30/34 ,  G01N30/72 ,  G01N30/86

Abstract: 本发明公开了一种血清中降钙素原的定值方法，包括以下步骤：(1)血清降钙素原(PCT)的纯化富集；(2)降钙素原纯度检测；(3)酶切；(4)降钙素原定量分析。本发明方法使用LC‑MS/MS方法对血清PCT进行定值，原理是通过特征肽段的浓度推算出蛋白质的浓度，而肽段的浓度可以根据液质分析MRM模式谱图的峰面积表示，选用3条肽段计算PCT浓度，以3者平均值定值。在通常实验中，蛋白质的提取率、酶切效率、仪器的稳定性、实验误差等都会影响蛋白质的定量，而本发明方法在样品中添加等量的内标——标记肽段，可以消除以上误差，得到血清样品中PCT的浓度。

公开(公告)号：CN115950969A

公开(公告)日：2023-04-11

申请号：CN202211389577.7

申请日：2022-11-08

Applicant: 中国计量科学研究院

Inventor： 宋德伟 ,  蒋泽琳 ,  张琦 ,  孙浩峰 ,  刘健仪 ,  倪小丽

IPC: G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/32 ,  G01N30/34 ,  G01N30/72 ,  G01N30/86

Abstract: 本发明公开了一种血清中游离前列腺特异抗原的定值方法，包括以下步骤：(1)空白血清的选择；(2)前列腺特异抗原(PSA)纯品物质的选择；(3)血清样品制备；(4)血清中游离前列腺特异抗原的纯化富集；(5)酶切；(6)高标、低标溶液的配制；(7)前列腺特异抗原定量分析。该方法无需考虑蛋白质提取率、酶切效率、仪器稳定性等因素，在样品中添加等量的内标——标记肽段，可以消除以上误差，计算得到血清样品中游离PSA的浓度。本方法通过肽段对蛋白进行定值，其数值可靠、可溯源至SI单位，并且添加原料是天然PSA，因此无需考虑其结构的差异。

公开(公告)号：CN116046923B

公开(公告)日：2023-09-01

申请号：CN202211387044.5

申请日：2022-11-07

Applicant: 中国计量科学研究院

Inventor： 刘健仪 ,  张琦 ,  蒋泽琳 ,  倪小丽 ,  宋德伟

IPC: G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/32 ,  G01N30/34 ,  G01N30/72 ,  G01N30/86

Abstract: 本发明公开了一种血清中降钙素原的定值方法，包括以下步骤：(1)血清降钙素原(PCT)的纯化富集；(2)降钙素原纯度检测；(3)酶切；(4)降钙素原定量分析。本发明方法使用LC‑MS/MS方法对血清PCT进行定值，原理是通过特征肽段的浓度推算出蛋白质的浓度，而肽段的浓度可以根据液质分析MRM模式谱图的峰面积表示，选用3条肽段计算PCT浓度，以3者平均值定值。在通常实验中，蛋白质的提取率、酶切效率、仪器的稳定性、实验误差等都会影响蛋白质的定量，而本发明方法在样品中添加等量的内标——标记肽段，可以消除以上误差，得到血清样品中PCT的浓度。

公开(公告)号：CN115950969B

公开(公告)日：2023-09-01

申请号：CN202211389577.7

申请日：2022-11-08

Applicant: 中国计量科学研究院

Inventor： 宋德伟 ,  蒋泽琳 ,  张琦 ,  孙浩峰 ,  刘健仪 ,  倪小丽

IPC: G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/32 ,  G01N30/34 ,  G01N30/72 ,  G01N30/86

Abstract: 本发明公开了一种血清中游离前列腺特异抗原的定值方法，包括以下步骤：(1)空白血清的选择；(2)前列腺特异抗原(PSA)纯品物质的选择；(3)血清样品制备；(4)血清中游离前列腺特异抗原的纯化富集；(5)酶切；(6)高标、低标溶液的配制；(7)前列腺特异抗原定量分析。该方法无需考虑蛋白质提取率、酶切效率、仪器稳定性等因素，在样品中添加等量的内标——标记肽段，可以消除以上误差，计算得到血清样品中游离PSA的浓度。本方法通过肽段对蛋白进行定值，其数值可靠、可溯源至SI单位，并且添加原料是天然PSA，因此无需考虑其结构的差异。