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公开(公告)号：CN115950969B
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN202211389577.7
申请日：2022-11-08
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种血清中游离前列腺特异抗原的定值方法，包括以下步骤：(1)空白血清的选择；(2)前列腺特异抗原(PSA)纯品物质的选择；(3)血清样品制备；(4)血清中游离前列腺特异抗原的纯化富集；(5)酶切；(6)高标、低标溶液的配制；(7)前列腺特异抗原定量分析。该方法无需考虑蛋白质提取率、酶切效率、仪器稳定性等因素，在样品中添加等量的内标——标记肽段，可以消除以上误差，计算得到血清样品中游离PSA的浓度。本方法通过肽段对蛋白进行定值，其数值可靠、可溯源至SI单位，并且添加原料是天然PSA，因此无需考虑其结构的差异。
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公开(公告)号：CN110865193B
公开(公告)日：2020-08-18
申请号：CN201911162765.4
申请日：2019-11-25
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N33/68 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料制备方法及应用，包括以下步骤：(1)传统法制备单分散SiO2微球；(2)丁二酸改性；(3)浸渍SiO2微球；(4)多孔PVDF膜的制备；(5)多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料的制备。将制备的多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料应用于C肽定量限考察，通过与未分散免疫磁珠对比，用多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料提取C肽纯品后将定量限由柱上0.3ng降低至0.05ng，与日本计量院发表的C肽潜在参考测量程序相比，不通过衍生化处理后就能达到定量正常人血清C肽的目标，简化了检测流程，同时减少了磁珠和抗体的用量。
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公开(公告)号：CN111909948A
公开(公告)日：2020-11-10
申请号：CN202010864911.4
申请日：2020-08-25
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种稳定肌钙蛋白I标准物质及其制备方法，在cTnI稳定片段氨基酸序列基础上，转化BL21(DE3)感受态细胞，超声破碎诱导表达的工程菌获取cTnI包涵体，经1％Triton X-100，2M脲洗涤后溶解在8M脲中，后经CM-FF柱上复性和稀释复性纯化得到了肌钙蛋白I的标准物质。其中，所述cTnI稳定片段氨基酸序列选自cTnI蛋白序列中第30-第110的氨基酸序列片段，所述cTnI蛋白序列如SEQ No：1所示。本发明采用了一种新方法实现了对肌钙蛋白I标准物质的制备，解决了肌钙蛋白不稳定的问题。该标准物质可在低温条件下保持长期稳定，满足国家一级标准物质的要求。该标准物质为肌钙蛋白序列的稳定片段，能够覆盖市面上多数试剂盒的抗原表位要求。
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公开(公告)号：CN110865193A
公开(公告)日：2020-03-06
申请号：CN201911162765.4
申请日：2019-11-25
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N33/68 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料制备方法及应用，包括以下步骤：(1)传统法制备单分散SiO2微球；(2)丁二酸改性；(3)浸渍SiO2微球；(4)多孔PVDF膜的制备；(5)多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料的制备。将制备的多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料应用于C肽定量限考察，通过与未分散免疫磁珠对比，用多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料提取C肽纯品后将定量限由柱上0.3ng降低至0.05ng，与日本计量院发表的C肽潜在参考测量程序相比，不通过衍生化处理后就能达到定量正常人血清C肽的目标，简化了检测流程，同时减少了磁珠和抗体的用量。
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公开(公告)号：CN110850099A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201911162764.X
申请日：2019-11-25
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N27/447 , G01N30/72
Abstract: 本发明公开了一种血清中C反应蛋白的定值方法，包括以下步骤：(1)血清C反应蛋白(CRP)的纯化富集；(2)C反应蛋白纯度检测；(3)酶切；(4)C反应蛋白定量分析。该方法无需考虑蛋白质提取率、酶切效率、仪器稳定性等因素，整个实验只需要考虑纯品CRP浓度的准确性，而本发明使用的纯品CRP溶液是国家一级标准物质(由中国计量院研制)，数值可靠、可溯源至SI单位，并且原料是天然CRP，也无需考虑结构的差异，而这也是相较于同位素标记的全蛋白优异的地方。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114113278B
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202111402846.4
申请日：2021-11-24
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N27/447 , G01N27/62 , G01N30/02
Abstract: 本发明公开了一种基于质谱的体外诊断试剂抗体的表位定位方法，通过表面等离子体共振对试剂盒内的多种抗体分别与被测抗原相互作用的分析，获得能与待测抗原直接发生相互作用的抗体，通过冰上孵育来制备待测抗原与抗体的免疫复合物，再通过尺寸排阻色谱确定免疫复合物的孵育时间、孵育浓度以及结合比例。最后通过在线酶切技术获得待测抗原的肽图，再使用基于质谱的氢氘交换技术对免疫复合物进行分析，通过数据处理获得试剂盒内抗体的表位图谱。本发明采用了一种全新的方法实现了体外诊断试剂盒内抗体的表位定位。该方法具有快速、灵敏、高通量、样品用量少、无分析质量上限等特点，能够应用于市面上多数试剂盒的表位定位分析。
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公开(公告)号：CN115950969A
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202211389577.7
申请日：2022-11-08
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种血清中游离前列腺特异抗原的定值方法，包括以下步骤：(1)空白血清的选择；(2)前列腺特异抗原(PSA)纯品物质的选择；(3)血清样品制备；(4)血清中游离前列腺特异抗原的纯化富集；(5)酶切；(6)高标、低标溶液的配制；(7)前列腺特异抗原定量分析。该方法无需考虑蛋白质提取率、酶切效率、仪器稳定性等因素，在样品中添加等量的内标——标记肽段，可以消除以上误差，计算得到血清样品中游离PSA的浓度。本方法通过肽段对蛋白进行定值，其数值可靠、可溯源至SI单位，并且添加原料是天然PSA，因此无需考虑其结构的差异。
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公开(公告)号：CN110850099B
公开(公告)日：2020-08-18
申请号：CN201911162764.X
申请日：2019-11-25
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N27/447 , G01N30/72
Abstract: 本发明公开了一种非疾病诊断目的的血清中C反应蛋白的定值方法，包括以下步骤：(1)血清C反应蛋白(CRP)的纯化富集；(2)C反应蛋白纯度检测；(3)酶切；(4)C反应蛋白定量分析。该方法无需考虑蛋白质提取率、酶切效率、仪器稳定性等因素，整个实验只需要考虑纯品CRP浓度的准确性，而本发明使用的纯品CRP溶液是国家一级标准物质(由中国计量院研制)，数值可靠、可溯源至SI单位，并且原料是天然CRP，也无需考虑结构的差异，而这也是相较于同位素标记的全蛋白优异的地方。
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公开(公告)号：CN119804868A
公开(公告)日：2025-04-11
申请号：CN202510301610.3
申请日：2025-03-14
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N33/574 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/577 , G01N33/60 , G01N30/02 , G01N30/06 , G01N30/14 , G01N30/08 , G01N30/72
Abstract: 本发明公开了一种基于磁固相萃取‑同位素稀释质谱法的血清中甲胎蛋白定值方法，包括以下步骤：（1）血清中甲胎蛋白（AFP）的富集；（2）胰蛋白酶酶切；（3）AFP定量分析。本发明的定值方法分别将两种AFP的单克隆抗体结合到磁珠上制备混合磁珠溶液，通过磁固相萃取（MSPE）的方式富集血清中的AFP实现在对血清中低丰度AFP的高效富集，通过在洗脱溶液中添加有机相增强蛋白的洗脱，实现高回收率，经胰蛋白酶酶切后，通过加入同位素标记特征肽段，用同位素稀释液相色谱串联质谱法（ID‑LC‑MS/MS）对其进行定量分析，使定量结果可以溯源至SI单位。
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公开(公告)号：CN114113278A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202111402846.4
申请日：2021-11-24
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N27/447 , G01N27/62 , G01N30/02
Abstract: 本发明公开了一种基于质谱的体外诊断试剂抗体的表位定位方法，通过表面等离子体共振对试剂盒内的多种抗体分别与被测抗原相互作用的分析，获得能与待测抗原直接发生相互作用的抗体，通过冰上孵育来制备待测抗原与抗体的免疫复合物，再通过尺寸排阻色谱确定免疫复合物的孵育时间、孵育浓度以及结合比例。最后通过在线酶切技术获得待测抗原的肽图，再使用基于质谱的氢氘交换技术对免疫复合物进行分析，通过数据处理获得试剂盒内抗体的表位图谱。本发明采用了一种全新的方法实现了体外诊断试剂盒内抗体的表位定位。该方法具有快速、灵敏、高通量、样品用量少、无分析质量上限等特点，能够应用于市面上多数试剂盒的表位定位分析。
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