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公开(公告)号:CN110850017B
公开(公告)日:2020-08-18
申请号:CN201911162865.7
申请日:2019-11-25
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N30/88 , G01N33/543 , G01N33/532
Abstract: 本发明公开了一种非疾病诊断目的的非衍生化准确定量血清中C肽的方法,从提高C肽提取源头效率出发,使其能够不通过衍生化处理就可以进一步提高方法定量限。从增加抗体和抗原的接触面积,确定抗原和磁珠的接触方向为出发点,制备了多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠的复合材料。将制备的PVDF模板分散免疫磁珠复合材料应用于C肽定量限考察,通过与未分散免疫磁珠对比,用PVDF模板分散免疫磁珠复合材料提取C肽纯品后将定量限由柱上0.3ng降低至0.05ng,与日本计量院发表的C肽潜在参考测量程序相比,不通过衍生化处理后就能达到定量正常人血清C肽的目标,简化了检测流程,同时减少了磁珠和抗体的用量。
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公开(公告)号:CN111909948A
公开(公告)日:2020-11-10
申请号:CN202010864911.4
申请日:2020-08-25
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种稳定肌钙蛋白I标准物质及其制备方法,在cTnI稳定片段氨基酸序列基础上,转化BL21(DE3)感受态细胞,超声破碎诱导表达的工程菌获取cTnI包涵体,经1%Triton X-100,2M脲洗涤后溶解在8M脲中,后经CM-FF柱上复性和稀释复性纯化得到了肌钙蛋白I的标准物质。其中,所述cTnI稳定片段氨基酸序列选自cTnI蛋白序列中第30-第110的氨基酸序列片段,所述cTnI蛋白序列如SEQ No:1所示。本发明采用了一种新方法实现了对肌钙蛋白I标准物质的制备,解决了肌钙蛋白不稳定的问题。该标准物质可在低温条件下保持长期稳定,满足国家一级标准物质的要求。该标准物质为肌钙蛋白序列的稳定片段,能够覆盖市面上多数试剂盒的抗原表位要求。
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公开(公告)号:CN110865193A
公开(公告)日:2020-03-06
申请号:CN201911162765.4
申请日:2019-11-25
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N33/68 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料制备方法及应用,包括以下步骤:(1)传统法制备单分散SiO2微球;(2)丁二酸改性;(3)浸渍SiO2微球;(4)多孔PVDF膜的制备;(5)多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料的制备。将制备的多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料应用于C肽定量限考察,通过与未分散免疫磁珠对比,用多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料提取C肽纯品后将定量限由柱上0.3ng降低至0.05ng,与日本计量院发表的C肽潜在参考测量程序相比,不通过衍生化处理后就能达到定量正常人血清C肽的目标,简化了检测流程,同时减少了磁珠和抗体的用量。
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公开(公告)号:CN110850099A
公开(公告)日:2020-02-28
申请号:CN201911162764.X
申请日:2019-11-25
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N27/447 , G01N30/72
Abstract: 本发明公开了一种血清中C反应蛋白的定值方法,包括以下步骤:(1)血清C反应蛋白(CRP)的纯化富集;(2)C反应蛋白纯度检测;(3)酶切;(4)C反应蛋白定量分析。该方法无需考虑蛋白质提取率、酶切效率、仪器稳定性等因素,整个实验只需要考虑纯品CRP浓度的准确性,而本发明使用的纯品CRP溶液是国家一级标准物质(由中国计量院研制),数值可靠、可溯源至SI单位,并且原料是天然CRP,也无需考虑结构的差异,而这也是相较于同位素标记的全蛋白优异的地方。
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公开(公告)号:CN110865193B
公开(公告)日:2020-08-18
申请号:CN201911162765.4
申请日:2019-11-25
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N33/68 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料制备方法及应用,包括以下步骤:(1)传统法制备单分散SiO2微球;(2)丁二酸改性;(3)浸渍SiO2微球;(4)多孔PVDF膜的制备;(5)多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料的制备。将制备的多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料应用于C肽定量限考察,通过与未分散免疫磁珠对比,用多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠复合材料提取C肽纯品后将定量限由柱上0.3ng降低至0.05ng,与日本计量院发表的C肽潜在参考测量程序相比,不通过衍生化处理后就能达到定量正常人血清C肽的目标,简化了检测流程,同时减少了磁珠和抗体的用量。
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公开(公告)号:CN110850017A
公开(公告)日:2020-02-28
申请号:CN201911162865.7
申请日:2019-11-25
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N30/88 , G01N33/543 , G01N33/532
Abstract: 本发明公开了一种非衍生化准确定量血清中C肽的方法,从提高C肽提取源头效率出发,使其能够不通过衍生化处理就可以进一步提高方法定量限。从增加抗体和抗原的接触面积,确定抗原和磁珠的接触方向为出发点,制备了多孔PVDF模板几何约束免疫磁珠的复合材料。将制备的PVDF模板分散免疫磁珠复合材料应用于C肽定量限考察,通过与未分散免疫磁珠对比,用PVDF模板分散免疫磁珠复合材料提取C肽纯品后将定量限由柱上0.3ng降低至0.05ng,与日本计量院发表的C肽潜在参考测量程序相比,不通过衍生化处理后就能达到定量正常人血清C肽的目标,简化了检测流程,同时减少了磁珠和抗体的用量。
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公开(公告)号:CN110850099B
公开(公告)日:2020-08-18
申请号:CN201911162764.X
申请日:2019-11-25
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N27/447 , G01N30/72
Abstract: 本发明公开了一种非疾病诊断目的的血清中C反应蛋白的定值方法,包括以下步骤:(1)血清C反应蛋白(CRP)的纯化富集;(2)C反应蛋白纯度检测;(3)酶切;(4)C反应蛋白定量分析。该方法无需考虑蛋白质提取率、酶切效率、仪器稳定性等因素,整个实验只需要考虑纯品CRP浓度的准确性,而本发明使用的纯品CRP溶液是国家一级标准物质(由中国计量院研制),数值可靠、可溯源至SI单位,并且原料是天然CRP,也无需考虑结构的差异,而这也是相较于同位素标记的全蛋白优异的地方。
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