二醇聚合物-白介素-1受体拮抗剂偶联物及制备方法和用途

    公开(公告)号:CN101125206A

    公开(公告)日:2008-02-20

    申请号:CN200610089288.X

    申请日:2006-08-15

    Abstract: 本发明涉及二醇聚合物-白介素-1受体拮抗剂偶联物及制法和用途。该偶联物将二醇聚合物活化为末端具有醛基或N-羟基琥珀酰亚胺功能基的活性中间体,再与白介素-1受体拮抗剂反应;二醇聚合物分子根据活化方式的不同共价连接在白介素-1受体拮抗剂的氨基或其组氨酸的咪唑基上,产物通过液相色谱分离得电泳纯二醇聚合物-白介素-1受体拮抗剂偶联物;偶联物保留了未修饰蛋白45%-75%生物学活性。动物实验表明其在生物体内的循环半衰期从未修饰蛋白的6小时提高到18小时;在牛胶原蛋白造型的类风湿性关节炎大鼠模型试验中,能显著(p<0.05)改善动物踝关节和后脚掌病症;说明可作长效活性化合物药物有效地用于治疗类风湿关节炎。

    一种从Cohn组分Ⅴ上清中分离纯化人血清白蛋白的方法

    公开(公告)号:CN109627322A

    公开(公告)日:2019-04-16

    申请号:CN201910012824.3

    申请日:2019-01-07

    CPC classification number: C07K14/765

    Abstract: 本发明提供了一种从Cohn组分Ⅴ上清中分离纯化人血清白蛋白的方法,包括以下步骤:将Cohn组分Ⅴ的上清液上样至含有阴离子交换层析介质的层析柱中,使用洗脱液洗脱层析柱,收集洗脱液得到人血清白蛋白;本方法首次提出以低温乙醇沉淀组分V上清为原料分离纯化白蛋白的新思路,不采用超滤工艺脱除乙醇,从而大大降低了缓冲液用量,减少操作时间,避免了蛋白长时间在较高乙醇溶液中的变性失活问题,具有操作简单,成本低廉,过程耗时短,蛋白活性收率高等优点。利用本发明方法可以对组分Ⅴ上清中的白蛋白进一步回收,有效提高血浆利用率,降低成本,对于实际应用具有重要的价值。

    一种从乳腺生物反应器表达产物中分离重组人抗体的方法

    公开(公告)号:CN102321150A

    公开(公告)日:2012-01-18

    申请号:CN201110240519.3

    申请日:2011-08-19

    Abstract: 本发明涉及抗体分离纯化领域,具体地,涉及一种从乳腺生物反应器表达产物中分离重组人抗体的方法。该方法包括如下步骤:(1)将乳腺生物反应器所产转基因动物乳液进行脱脂预处理,获得脱脂乳;(2)将所得脱脂乳进行去除酪蛋白处理,获得含目标抗体的乳清液;(3)将所得乳清液进行粗分离处理,获得含目标抗体的粗分离样品;(4)将所得粗分离样品进行免疫亲和层析,从穿透峰中获得目标抗体,或者,将去除酪蛋白的乳清液直接进行免疫亲和层析,收集穿透峰;将所得穿透峰进行精分离处理,获得目标抗体。本发明生产工艺稳定,适于乳腺生物反应器表达的重组人抗体的规模化生产,产品纯度高,工艺回收率高。

    一种电荷诱导抗体亲和吸附介质、其制备方法及其在蛋白纯化中的应用

    公开(公告)号:CN119972013A

    公开(公告)日:2025-05-13

    申请号:CN202510079266.8

    申请日:2025-01-17

    Abstract: 本申请涉及一种电荷诱导抗体亲和吸附介质、其制备方法及其在抗体纯化中的应用,通过将短肽亲和配基与带羧基的间隔臂连接,接枝到活化的交联琼脂糖微球上,利用羧基的静电作用诱导抗体吸附于短肽亲和配基上,在保持亲和介质高选择性的同时,大幅度提升了亲和介质的载量(动态吸附载量与静态载量均高于商品化的抗体Protein A亲和介质),克服了传统Protein A亲和介质吸附载量低,处理量小的问题,有利于血浆蛋白亲和层析的规模化应用。本申请的电荷诱导抗体亲和吸附介质制备简单,层析操作方便,适应性广,可从多种复杂物料体系包括人血浆(血清)、抗体发酵液中一步层析操作分离纯化抗体,纯度大于92%,收率大于90%。

    一种电荷诱导亲和吸附介质、其制备方法及其在蛋白纯化中的应用

    公开(公告)号:CN116078363A

    公开(公告)日:2023-05-09

    申请号:CN202310112685.8

    申请日:2023-02-14

    Abstract: 本申请涉及一种电荷诱导亲和吸附介质、其制备方法及其在蛋白纯化中的应用,其通过将烷基琥珀酸酐与带羧基的间隔臂连接,接枝到活化的交联琼脂糖微球上,利用羧基的静电作用诱导白蛋白吸附于烷基琥珀酸酐亲和配基上,在保持亲和介质高选择性的同时,大幅度提升了亲和介质的载量(动态吸附载量是传统蓝胶亲和介质的2倍以上),克服了传统亲和介质吸附载量低,处理量小的问题,有利于血浆蛋白亲和层析的规模化应用。本申请的电荷诱导亲和吸附介质制备简单,层析操作方便,适应性广,可从多种复杂物料体系包括人血浆(血清)、人血浆低温乙醇沉淀组分IV和组分VI中一步层析操作分离纯化白蛋白,纯度大于98%,收率大于90%。

    一种分离纯化凝血因子VIII的方法

    公开(公告)号:CN102584983B

    公开(公告)日:2014-11-05

    申请号:CN201210022202.7

    申请日:2012-02-01

    Abstract: 本发明涉及血液制品分离纯化领域,具体地,本发明涉及一种分离纯化凝血因子VIII的方法。所述方法采用超大孔离子交换层析分离含有凝血因子VIII的层析原料,所述方法还包括在超大孔离子交换层析分离前进行粗分离处理的步骤。本发明所述方法中FVIII层析回收率稳定高达85%左右,比活高达154IU/mg蛋白,工艺稳定,易于放大,而现有技术中FVIII层析回收率稳定一般为25%左右,比活为20-50IU/mg蛋白,因此相对于现有技术本发明的方法取得了意想不到的技术效果。

    一种从乳腺生物反应器表达产物中分离重组人抗体的方法

    公开(公告)号:CN102321150B

    公开(公告)日:2014-09-24

    申请号:CN201110240519.3

    申请日:2011-08-19

    Abstract: 本发明涉及抗体分离纯化领域,具体地,涉及一种从乳腺生物反应器表达产物中分离重组人抗体的方法。该方法包括如下步骤:(1)将乳腺生物反应器所产转基因动物乳液进行脱脂预处理,获得脱脂乳;(2)将所得脱脂乳进行去除酪蛋白处理,获得含目标抗体的乳清液;(3)将所得乳清液进行粗分离处理,获得含目标抗体的粗分离样品;(4)将所得粗分离样品进行免疫亲和层析,从穿透峰中获得目标抗体,或者,将去除酪蛋白的乳清液直接进行免疫亲和层析,收集穿透峰;将所得穿透峰进行精分离处理,获得目标抗体。本发明生产工艺稳定,适于乳腺生物反应器表达的重组人抗体的规模化生产,产品纯度高,工艺回收率高。

    一种从转基因哺乳动物乳液中分离重组人抗体的方法

    公开(公告)号:CN102311498A

    公开(公告)日:2012-01-11

    申请号:CN201110240626.6

    申请日:2011-08-19

    Abstract: 本发明涉及抗体分离纯化领域,具体地,涉及一种从转基因哺乳动物乳液中分离重组人抗体的方法。该方法包括如下步骤:(1)将转基因哺乳动物乳液进行脱脂预处理,获得脱脂乳;(2)将所得脱脂乳进行去除酪蛋白处理,获得含目标抗体的乳清液;(3)将所得乳清液进行免疫亲和层析,从洗脱峰中获得目标抗体,其中,免疫亲和层析介质的配基为针对人抗体种属特征区域的单克隆抗体或其可变区。本方法还包括将免疫亲和层析中穿透峰进行精分离处理。本发明生产工艺稳定,适于乳腺生物反应器表达的重组人抗体的规模化生产,产品纯度高,工艺回收率高。

    一种高效纯化金属离子结合蛋白的疏水层析分离纯化方法

    公开(公告)号:CN101948529A

    公开(公告)日:2011-01-19

    申请号:CN201010252608.5

    申请日:2010-08-13

    Abstract: 本发明一种高效纯化金属离子结合蛋白的疏水层析分离纯化方法,其步骤为:选取含有金属离子结合蛋白的待分离物料,添加沉淀剂进行沉淀粗分离获得蛋白混合物。在蛋白混合物中添加过量的螯合剂去除目标蛋白的辅基金属离子I,透析去除螯合剂后添加适量不易沉淀的金属离子II,以保持目标蛋白的三级结构。将处理所得蛋白混合物进行疏水层析分离操作,并在层析缓冲液中添加适量的金属离子II,由于金属离子辅基II可以有效地保持目标蛋白的天然结构,因此可以有效地提高目标蛋白与杂蛋白在疏水层析中的分辨率。进一步通过凝胶过滤层析可以得到高纯度、高回收率的金属离子结合蛋白的纯品,生产工艺稳定,适于规模化生产。

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