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公开(公告)号：CN118064400B
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202410469408.7
申请日：2024-04-18
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 , 济南国科医工科技发展有限公司
Abstract: 本发明公开了一种高催化活性的S选择性ω‑转氨酶突变体及其构建方法和应用，该S选择性ω‑转氨酶突变体是通过将如SEQ ID NO.1所示的野生型ω‑转氨酶TbTA氨基酸序列的第263位异亮氨酸突变为丙氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或组氨酸得到的。本发明获得的突变体TbTA‑I263A、TbTA‑I263G催化苯乙酮的酶活相较于野生型提升67.83倍和61.26倍，热稳定性与野生型接近或更好；突变体TbTA‑I263C、TbTA‑I263M、TbTA‑I263V、TbTA‑I263F和TbTA‑I263H酶活分别提升11.85倍、8.76倍、3.56倍、3.49倍和2.55倍。
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公开(公告)号：CN117106855B
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202311382378.8
申请日：2023-10-24
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12Q1/48
Abstract: 本发明公开了一种测定Taq DNA聚合酶绝对活性的方法，该方法为：以环状单链DNA为模板，在含有扩增引物和dATP的反应体系中，以待测Taq DNA聚合酶引发延伸复制反应，消耗反应体系中的dNTPs；然后测定dATP的消耗量，再根据预先构建的表征Taq DNA聚合酶的绝对活性与dATP消耗量之间关系的标准曲线f1计算得到Taq DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染，具有绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点，可用于高通量、自动化的聚合酶活性筛选。
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公开(公告)号：CN119193763A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202411334801.1
申请日：2024-09-24
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种测定Bst DNA聚合酶绝对活性的方法，该方法为：以环状单链DNA为模板，在含有扩增引物和dATP的反应体系中，以待测Bst DNA聚合酶引发延伸复制反应，消耗反应体系中的dNTPs；然后根据预先构建的表征dATP的浓度与萤光值之间关系的标准曲线f1计算dATP的消耗量，再通过预先构建的表征Bst DNA聚合酶浓度与dATP消耗量之间关系的标准曲线f2计算得到Bst DNA聚合酶浓度，最后根据Bst DNA聚合酶的绝对活性定义计算得到待测Bst DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染，具有测定Bst DNA聚合酶聚合活性、绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点。
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公开(公告)号：CN118620860A
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202410723929.0
申请日：2024-06-05
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体及其在不对称合成普拉替尼药物中间体中的应用，该ω‑转氨酶突变体由野生型ω‑转氨酶通过以下任意一种突变方式得到的：第62位色氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为异亮氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为亮氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为甲硫氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸。本发明公开的转氨酶突变体催化合成(S)‑1‑(6‑(4‑氟‑1H‑吡唑‑1‑甲基)吡啶‑3‑甲基)乙胺的转化率高、立体选择性高，具有实现(S)‑1‑(6‑(4‑氟‑1H‑吡唑‑1‑甲基)吡啶‑3‑甲基)乙胺绿色合成路线工业化的应用前景。
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