一种葡萄糖氧化酶的编码基因及制备方法和应用

    公开(公告)号:CN101348795B

    公开(公告)日:2010-09-01

    申请号:CN200710052784.2

    申请日:2007-07-19

    Abstract: 本发明公开了一种葡萄糖氧化酶突变体编码基因及制备方法和应用。这种高活力葡萄糖氧化酶突变体的编码基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,其编码的蛋白具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列,其步骤是:首先设计一对诱变引物;第二是获得大肠杆菌菌株DH5α/GOD-A137S;第三是鉴定重组质粒pPIC9kGOD-A137S;第四是培养大肠杆菌菌株DH5α/GOD-A137S;第五是得到含突变基因的线性DNA;第六是获得毕赤酵母菌株GS115/GOD-A137S;第七是诱导纯化获得目的蛋白。本发明方法易行,成本低廉,高酶活葡萄糖氧化酶突变株蛋白在食品糖类检测和保鲜中的应用,具有很高的实用价值。

    一种用于葡萄糖传感器的融合蛋白的制备方法

    公开(公告)号:CN1328156A

    公开(公告)日:2001-12-26

    申请号:CN01114379.7

    申请日:2001-07-25

    Abstract: 本发明公开了一种用于葡萄糖传感器的融合蛋白的制备方法,其步骤是:首先合成编码聚赖氨酸的DNA链,将合成的DNA链在65℃褪火形成双链的短DNA片段;其次是通过基因拼接,构建融合蛋白的表达载体pPICGLT;第三是表达载体pPICGLT经限制性内切酶StuⅠ线性化后,用原生质体转化法转化进酵母中;第四是酵母重组子的筛选,提取酵母的基因组DNA作检测;第五是融合蛋白的表达、纯化,转化子在30℃下MM培养基中培养72小时,每24小时加一次甲醇;第六是融合蛋白与介体的连接;第七是葡萄糖传感器的制备;第八是电化学检测。本发明制备葡萄糖传感器测量线性范围宽,可达45mmol/L,且响应信号大,保存期长。

    一种基于蛋白纳米线的3D探针-磁性微珠复合物及其应用

    公开(公告)号:CN105717287A

    公开(公告)日:2016-06-29

    申请号:CN201610051186.2

    申请日:2016-01-26

    CPC classification number: G01N33/543 G01N33/5434

    Abstract: 本发明提供一种基于蛋白纳米线的3D探针?磁性微珠复合物,包括磁性微珠和蛋白纳米线,所述蛋白纳米线表面包括至少一种功能配体和至少一种连接配体,所述蛋白纳米线通过连接配体连接在磁性微珠表面。本发明利用纳米线较大的比表面积,展示在其上的配体形成3D高密度固定,一方面提高配体数量,利用高密度展示形成多价效应,提高特异性配体的结合力;另一方面通过自组装的方式实现抗原或抗体等分子的定向固定,最大程度的保留功能分子活性,减少常规化学交联的损伤,从而提高对样品中待测目标的捕获效率。复合物通过连接配体将蛋白纳米线与磁性微珠相连,利用磁性微珠快速分离的性质,减少检测时间,进而实现快速高通量的病原筛查或疾病检测。

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